细胞膜透性和细胞.doc

实验四 细胞膜的通透性和细胞的凝集反应第一部分 细胞膜的通透性【实验目的】了解相对分子质量、脂溶性大小、电解质和非电解质溶液对细胞膜透性的影响。【实验原理】细胞膜在不断变化的环境中，必须保持自身的稳恒状态，才能生存。细胞膜允许一些物质通透，又能降低甚至阻挡另一些物质的通透，所以细胞膜具有选择通透性。水分子可以自由通过细胞膜，当细胞处于低渗液环境时，水分子大量渗到细胞内，使细胞膨胀，进而破裂，血红蛋白释放到介质中，由不透明的红细胞悬液变为红色透明的血红蛋白溶液，这就是溶血现象。溶血现象可作为测量物质进入红血细胞速度一种指标。溶血现象发生的快慢与进入细胞的物质的分子量大小有关。相对分子量大的进入细胞慢，发生溶血所需时间也长。非极性化合物易溶于脂溶剂，但在水中溶解度很小。碳链越长，脂溶性越大。各种非电解质溶液，只要单位面积中所含的分子数相同，就具有相同的渗透压。电解质溶液，如NaCl与葡萄糖分子数相等时，NaCl产生的渗透压要大得多。【材料与物品】（1）材料：兔血悬液（含适量肝素钠和用于稀释兔血的0.85NaCl）（2）试剂：lmol/L乙二醇溶液、lmol/L丙三醇溶液、lmol/L葡萄糖溶液、3mol/L甲醇溶液、3mol/L乙醇溶液、3mol/L丙醇溶液、1/8mol/L葡萄糖溶液、1/9mol/L葡萄糖溶液、1/12mol/L葡萄糖溶液、1/13mol/L葡萄糖溶液、1/8mol/LNaCl溶液、1/9mol/LNaCl溶液、1/12mol/LNaCl溶液、1/13mol/LNaCl溶液。（3）器械：小烧杯、试管、秒表、显微镜等。【方法与步骤】（1）将15支试管编号，分别加入4mol待测试剂。（2）一支作为对照的试管中加入4mol蒸镏水，用1ml注射器滴入兔血悬液0.1ml，迅速摇匀。（3）按上步依次在14支待测试管中分别加入兔血悬液0.1ml，并按下秒表开始计时，摇匀，待发生与对照管相同的溶血现象即停止计时。时间超过12分钟记为不溶血。【结果与分析】将实验结果分别填写如下表格并作分析：1. 相对分子质量大小对膜通透性的影响溶液相对分子质量溶血时间lmol/L乙二醇62lmol/L丙三醇92lmol/L葡萄糖1802. 脂溶性大小对细胞膜透性的影响溶液相对分子质量分配系数溶血时间3mol/L甲醇32.040.00973mol/L乙醇46.070.0353mol/L丙醇58.00.1563. 电解质和非电解质溶液对细胞膜透性的影响溶质物质的浓度/(lmol/L)1/8M1/9M1/12M1/13M葡萄糖NaCl第二部分 细胞的凝集反应1 实验原理n 细胞膜是双层脂镶嵌蛋白，表面蛋白和脂类常和糖基结合形成糖外被n 凝集素一类含糖的并能和糖专一结合的蛋白质，具备凝集细胞和刺激细胞分裂的作用n 凝集素+细胞表面的糖分子=bridge2 实验步骤n 土豆2克+ 10 mlPBS，2小时后取含凝集素溶液备用n 用生理盐水纯化红细胞共3次 取1ml血液加5ml生理盐水， 2000rpm/转离心5分钟，收集沉淀。重复纯化 3次。 最后一次纯化的沉淀用生理盐水制备为2%的溶液备用n 一