葛花解酲汤---立题1.doc

葛花解酲滴丸设计流程目录：一、立题依据二、活性成分提取与检视三、葛花解酲滴丸滴丸制备工艺四、葛花解酲滴丸滴丸质量考察五、稳定性考察参与人员：08中药（1）班 汪勇 08311034 王灿 08311035 王桂玉 08311036 王曼丽 08311037 王梦迪 08311038一、立题依据 近年来我国酗酒和酒精中毒者日益增多,严重影响人们身体健康和家庭、社会的稳定。酒对人体有广泛的药理作用,急性大量饮酒可引起恶心、呕吐、记忆力减退、注意力不集中、精细运动能力受损和情绪不稳定,严重时甚至可因呼吸肌麻痹而导致死亡。长期饮酒可引起精神障碍、胃溃疡以及脂肪肝、酒精性肝炎、肝硬化等疾病,有资料表明食道癌、肝癌发病率的升高似乎也与饮酒有关。因此开发有效的解酒药物受到各国政府和人民的普遍重视。目前西方国家开发的解酒药以合成药物为主,而亚洲国家则侧重天然药物的研究开发。（一）为什么选择滴丸？ 中药滴丸剂是在中药丸剂的基础上发展起来的,与传统中药制剂相比具有本质的区别,避免了传统中药生物利用度低、服用不方便、起效慢的缺点,同时发扬了传统中药安全性好、不良反应小的优点。临床中药滴丸制剂具有多种有用途,除可口服或含服的速效救心丸、复方丹参滴丸等速效、高效的滴丸,还可制成缓释和控释滴丸、包衣滴丸、栓剂滴丸、硬胶囊滴丸、肠溶滴丸、药液固化滴丸等以适应多种给药途径。 剂型体积和剂量比较小，便于携带和长期服用；具有速效的作用，便于急救；具有长效的作用，可以减少服药次数；制剂具有良好的稳定性，基本能符合现代制剂“三效”、“三小”、“五方便”的要求。（二）葛根解酲汤的组成：君：葛花 臣：神曲 白豆蔻仁 砂仁 茯苓 猪苓 泽泻 人参 白术 干姜佐：木香 青皮 陈皮 该方是温脾胃、消酒积、利湿清热的效方,虽为治疗酒积之症而设,然其方配伍精当,力专效著,在芳香化湿、淡渗利湿之中,又寓以温中健脾,故临床上不拘于酒积之症,亦适用于其它湿热为患之证,如胃脘痛、腹泻、眩晕等。凡以脾胃湿热症状出现,且湿重于热者,随证治之,常可收药后病瘥之效。（3） 活性成分及药理作用：1、 王东坡,谭学林以56白酒灌胃,制成酒精性肝病模型,分设模型组、对照组、人剂量治疗组、小剂量治疗组,10天后取血及肝脏送检。结果表明葛花解酲汤对小鼠酒精性肝病有明显的防治作用,能减轻酒精对肝细胞的损害，证明葛花解酲汤是治疗酒精肝病的良方。 2、 葛根解酲汤含有葛花，茯苓等药物，王会肖，刘继锋，白玉等探讨了葛花茯苓片的解酒作用及相关机制，用56白酒,分别观察葛花茯苓片对急性酒精中毒小鼠的醉酒时间,睡眠时间,肝脏组织中的谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)及乙醇脱氢酶(ADH)含量的影响。结果表明葛花茯苓片能延长醉酒时间,缩短睡眠时间,并能明显提高小鼠肝组织GSH、ADH水平和抑制酒精引起的MDA含量的增加，证明葛花茯苓片具有显著的解酒作用,这可能与其提高肝组织GSH、ADH水平和抑制MDA等的抗氧化作用有关。3、 李 萍，钟赣生为了探讨葛花对急性酒精中毒的防治作用，将雄性小鼠随机分为空白组、模型组、葛花提取物组。 给药 30 min 后，模型组与葛花组灌酒 0.10 mL/10 g，在灌酒后 0.5，1，1.5，2，2.5，3 h 分别摘眼球取血和取肝组织。采用生化酶法测定小鼠酒后不同时间内血中乙醇浓度和肝中乙醇脱氢酶（ADH）活性。结果显示，小鼠血中乙醇浓度在酒后 0.52 h 达到高峰，与模型组相比，葛花提取物组 0.53 h 内的血中乙醇浓度数值降低。 葛花提取物组对小鼠酒后 0.51 h 肝中 ADH 的影响较为明显，使其活性增加；酒后 1.53 h 肝中 ADH 活性虽然也增强，但与模型组比较无显著差异。 结果显示，葛花提取物可降低酒后血中乙醇浓度，增强肝中 ADH 活性，其机制可能是通过抑制消化道对乙醇的吸收，从而起到有效的降醇解酒作用。4、伍嘉宁，潘锄云，周楚华4研究了葛花解酲汤抗乙醇中毒的分子机理。结果提示，葛花解酲汤加枳椇子的组方都具有降低乙醇中毒小鼠血液乙醇含量，提高肝脏乙醇脱氢酶的活性，从而增强了肝胜对乙醇的生物转化功能，达到解醉（抗乙醇中毒）的作用。并发现葛花解酲汤加枳椇子组方有更强的抗乙醇中毒的作用。5、王春华等以此方为基础加枳子和麝香,化裁为加味葛花解酲汤,临床观察发现,加味葛花解酲汤灌胃联合纳洛酮治疗急性重症酒精中毒,疗效不仅优于单用纳络酮,且优于传统的葛花解酲汤,能大大缩短酒精中毒患者昏迷时间,还能有效减少并发症和患者清醒后各种不适症状5。6、不醉丹是老中医杨更禄研制的解酒方剂,主要由白术、葛花、人参、蔻仁、青皮、木香、干姜等组成,方中葛花独入阳明,解酒醒脾,蔻仁、青皮、木香、干姜温中健脾,行气和胃,人参、白术补气健脾,神曲解酒化食,诸药同用,共奏温和健脾,分消酒湿之功。经试用,解酒效果较为明显。利用小鼠醉酒模型进一步验证该处方的解酒功效,并对其解酒机理进行初步探讨,结果表明不醉丹能有效改善小鼠的醉酒状态,其作用机理可能与降低血浆酒精浓度相关6。7、张若明,李经才7引用日本学者研究葛花对乙醇引起人体代谢异常的影响。他们将葛花的甲醇提取物进行分离,对各个有效部位进行药理研究发现其中甲醇提取物和包含于其中的异黄酮类成分能够抑制乙醇诱导的小鼠血糖升高;甲醇提取物和三萜皂苷类成分能够抑制血中甘油三酯的升高;另外异黄酮和三萜皂苷还可以降低乙醇引起的尿氮浓度的升高。这些结果为阐明葛花的解酒功效提供了重要的实验依据。8、王庆端等8,9的实验表明葛根中的总黄酮成分可以提高小鼠对乙醇的耐受量,缩短小鼠大剂量乙醇中毒时翻正反射消失的时间,并缩短睡眠潜伏期,降低血中乙醇含量。9、 葛根花可通过清除自由基和抗脂质过氧化途径而降低血黏度, 促进血液循环, 使乙醇加速排泄, 减少对肝脏及其他各系统的损害, 起到保肝健脑等作用。另外, 葛根花善解酒毒, 醒脾和胃, 解渴, 临床上主治饮酒过度, 头痛头昏, 烦渴呕吐, 胸膈饱胀等症10，11。2、 活性成分提取与检视由古方葛花解醒汤经水煮醇沉精制而成，能醒酒、温中健脾，主治嗜酒中虚，湿伤脾胃、头痛心烦，眩晕呕吐等酒伤之证。（1） 论述： 1.医方考：葛花之寒，能解酒中之毒；茯苓、泽泻之淡，能利中酒之湿；砂仁、豆蔻、木香、青皮、陈皮之辛，能行酒食之滞；生姜所以开胃止呕，神曲所以消磨炙腻；而人参、白术之甘，所以益被伤之胃尔。2.杏苑：用葛花解酒毒；以神曲、砂仁、白豆蔻等消宿食；茯苓、猪苓、泽泻等利小便，导湿热；人参、白术补中健脾；生姜、陈皮、青皮、木香等行郁气而除痞闷。3.医方集解：此手足阳明药也。过饮无度，湿热之毒积于肠胃，葛花独入阳明，令湿热从肌肉而解，豆蔻、砂仁皆辛散解酒，故以为君，神曲解酒而化食，木香、干姜调气而温中，青皮、陈皮除痰而疏滞，二苓、泽泻能驱湿热从小便出，乃内外分消之剂，饮多则中气伤，故又加参、术以补其气也。4.冯氏锦囊杂症：曲糵之积，令人腹痛，盖中州受伤，气逆而湿郁也。豆蔻、砂仁推逆气有功，且兼辛散之力，葛花独入阳明，令湿热之毒从肌肉而解，故以三味为君，解上焦之酲也；茯苓、猪苓、泽泻令湿热之毒从小便而出，故以三味为臣，解下焦之酲也；参、术、木香、二皮、干姜，中气赖以调和，湿热捣其巢穴，解中焦之酲也。 （二）活性成分1、葛花：从野葛新鲜花中提得挥发油，其中性油中含1-辛烯-3-醉，丁香油酚，芳樟醇，酸性油中得苯甲酸甲酯，丙酸甲酯，异戊酸甲酯，正己酸甲酯。另外得尼泊尔鸢尾黄酮，染料木素，大豆素 ，槲皮素，葛花甙，鹰嘴豆芽素A，刺芒柄花素，芒柄花甙，降紫香甙，又从中提得三萜皂甙：槐花二醇，槐花皂甙。此外，还分得-谷甾醇，-谷甾醇-3-O-D-葡萄糖。性凉味甘、辛，可入脾经和胃经，有和胃解酒、生津止渴之功，适用于饮酒过度、头痛、头晕、烦渴、胸隔饱胀、小思饮食、呕叶酸水等病症。葛根、葛谷也有醒酒作用。葛花是中国的传统药物，长期以来被用于缓解酒后呕叶等症状。葛花中分离出13种异黄酮和3种皂角有，并确定了它们的结构。在对人体细胞的实验中，他们发现其中的一种皂角有有强大的保肝功效，而异黄酮则有较强的消除活性氧的作用。2、木香：含挥发油油中含香叶烯、对-伞花烃、芳樟醇、-榄香烯、丁香烯、律草烯、雪松烯、-紫罗兰酮、雪松醇、-木香醇、（1,8,11,14正十七四烯、以及木香内酯、二氢木香内酯、去氢木香内酯、木香烃内酯、二氢木香烃内酯、12-甲氧基二氢木香烃内酯及12-甲氧基二氢去氢木香内酯另含-木香酸及24种氨基酸。3、干姜：有散寒止痛，温中止呕之功。本草从新载其“暖胃散寒，消食醒酒，治胃脘冷痛。”4、白豆蔻：有温中行气，固肠止泻，消食之功。日华子本草载其“调中，下气，止泻痢，开胃，消食。皮外络，下气，解酒毒，治霍乱。”得配本草亦认为其“消宿食，解酒毒。”5、茯苓：主要含-茯苓聚糖（-Pachy man）, 约占干重的93%, 和三萜类化合物茯苓酸、土牧酸、三萜羧酸、齿孔酸、松苓酸等亦含脂肪酸, 如辛酸、十一酸、月桂酸、十二酸和棕榈酸此外, 尚含麦角甾醇、树胶、甲壳质、蛋白质、脂肪、甾醇、卵磷脂、右旋葡萄糖、腺嘌呤、组胺酸、胆碱、-茯苓聚糖分解酶、脂肪酶、蛋白酶等。主治：小便不利；水肿胀满；痰饮咳逆；呕吐；脾虚食少；泄泻；心悸不安；失眠健忘；遗精白浊。6、阳春砂仁：含有挥发油，其成分十分复杂，主要有柠檬烯、芳樟醇、乙酸龙脑酯等。除有浓烈芳香气味和强烈辛辣外，还对肠道有抑制作用。有化湿醒脾、行气和胃、消食的作用。7、青皮：性味归经苦、辛，温。归肝、胆、胃经。主治疏肝破气，消积化滞。用于胸胁胀痛，疝气，乳核，乳痈，食积腹痛。8、陈皮：的外果皮含挥发油，主成分为柠檬醛，牻牛儿醇，芳樟醇，邻氨基本甲酸甲酯。另据报道，挥发油中主含柠檬烯，还含a-蒎烯等。主治化痰止咳、风寒咳嗽、慢性气管炎、哮喘、喉痒痰多、胸中痰滞、呕吐呃逆、饮食积滞、食积伤酒、呕恶痞闷、长期胃痛、气痛等有独特疗效。9、白术：含挥发油1.4%, 主要成分为苍术酮、苍术醇亦含苍术醚、杜松脑、苍术内酯、羟基苍术内酯、脱水苍术内酯、棕榈酸、果糖、菊糖以及白术内酯、及 8-乙氧基白术内酯健脾益气，燥湿利水，止汗，安胎。用于脾虚食少，腹胀泄泻，痰饮眩悸，水肿，自汗，胎动不安。土白术健脾，和胃，安胎。用于脾虚食少，泄泻便溏，胎动不安。10、人参：人参皂甙(可以分为三组 ,即齐墩果酸组、原人参二醇组和原人参三醇组)，分别称为人参皂甙, 有机酸及酯类等。功效：大补元气，复脉固脱，补脾益肺，生津止渴，安神益智。主治：劳伤虚损、食少、倦怠、反胃吐食、大便滑泄、虚咳喘促、自汗暴脱、惊悸、健忘、眩晕头痛、阳痿、尿频、消渴、妇女崩漏、小儿慢惊及久虚不复，一切气血津液不足之证。11、党参：党参含三萜类化合物无羁萜、蒲公英萜醇乙酸酯、菠甾醇及其葡萄糖甙、7-豆甾烯醇及其葡萄糖甙、菠甾酮。主治补中益气，健脾益肺。用于脾肺虚弱，气短心悸，食少便溏，虚喘咳嗽，内热消渴。12、甘草：根和根茎主含三萜皂甙。其中主要的一种，俗称甘草甜素的，系甘草的甜味成份，是1分子的18-甘草次酸和2分子的葡萄醛酸结合生成的甘草酸的钾盐和钙盐。主治补脾益气，清热解毒，祛痰止咳，缓急止痛，调和诸药。用于脾胃虚弱，倦怠乏力，心悸气短，咳嗽痰多，脘腹、四肢挛急疼痛，痈肿疮毒，缓解药物毒性、烈性。13、泽泻：块茎含挥发油与树脂等, 并含泽泻萜醇A、B、泽泻萜醇A乙酸酯、泽泻萜醇B乙酸酯, 表泽泻萜醇A以及泽泻萜醇C乙酸酯, 还含泽泻醇、环氧泽泻烯, 以及卵磷脂、胆碱、2-糠醛味甘；淡；性寒，归肾；膀胱经利水渗湿；泄热通淋。主小便不利；热淋涩痛；水肿胀满；泄泻；痰饮眩晕；遗精。三、葛花解酲滴丸滴丸制备工艺（一）、滴丸工艺原理：分散的固体或液体药物与水性或油性基质混合均匀，通过滴嘴逐滴进入冷却剂中并固化成滴丸。（二）、滴丸制备工艺的一般流程：选材、配料、混合、滴制成丸、洗涤、干燥、定计量分装。1、药材及饮片的选择流程： 药材，饮片的质量控制：优质的药品首先要靠优质的原料，道地药材与非道地药材质量上有明显的差异，当药材在有效成分含量上有很大差异时，很难想象同样配料下生产的药品会有等价或者接近的疗效，优质药材再预处理和炮制过程中都需要符合GMP的现代要求，无论是厂房，设备还是人员技术上都有可靠的保障。关于葛花解酲滴丸的配方药材只有严格的按照国家药典制定的药材标准采购原料才能保证葛花解酲滴丸的质量和药效。采购时应严格按照：性状鉴别，显微鉴别，理化鉴别等一系列鉴别后才能选择，该法能保证原料的质量。 葛花：豆科植物野葛的干燥花，晒干后，去除杂质即为选用的饮片葛花。砂仁：姜科植物阳春砂、绿壳砂、海南砂、的干燥成熟果实，低温干燥后去除杂质即为本品用的砂仁饮片（用时捣碎）肉豆蔻：肉豆蔻科植物肉豆蔻的干燥种仁，晾干后去除杂质，即为选用的肉豆蔻饮片泽泻：泽泻科植物泽泻的干燥块茎，去除泥沙，大小分档，润透后切厚片，干燥，筛去碎屑，即为所选用的泽泻原料。青皮：芸香科植物，橘子的干燥幼果。陈皮：芸香科，橘子的干燥成熟果皮。白术：菊科植物，白术的干燥根。干姜：姜科植物，姜的干燥根茎。人参：五加科植物人参的干燥根。茯苓：多孔菌科茯苓的干燥子实体。猪苓：多孔菌科猪苓的干燥子实体。木香：菊科，木香的干燥根。2、 配料流程（环境10000级） 按照经典方剂“葛花解酲汤”的方剂组合，按葛花：砂仁：豆蔻仁：青皮：炒神曲：白术：干姜：泽泻：陈皮：人参：茯苓：猪苓：木香（10：10：10：6：4：4：4：4：3：3：3：3：1）投料，再结合设备的容量计算总药物量。在多功能中药提取罐对药物进行水煮，低温浓缩（考虑挥发油类成分），得到1:1浓缩液。3、 混合（环境10000级）混合是生产滴丸的关键工序，固体药物应以很高的细度以有利于药物溶解和机体吸收，溶液的粘度，密度，温度，都是影响滴丸质量的关键因素，所以一定在实验条件下摸索准确后，没确定最佳温度，最佳粘度，因此应选择辅料聚乙二醇6000、聚乙二醇4000、甘油、单硬脂酸甘油酯按实验比例热容混合法制取滴丸溶液。4、滴制成丸（环境10000级）（1) 、考虑影响丸重的主要因素滴管口径、基质形成溶液后的面张力和滴出口与冷凝剂液面的距离。一般认为,在一定围内管径大则滴制的丸也大,反之则小;温度影响表面张,温度上升,表面张力减小,丸重减小;反之丸重增大。滴口与冷凝剂液面的距离过大时,液滴会因重力作用被跌散产生细粒;距离过小时,液滴收缩不佳。因此制备滴丸时,管口的半径应大小适宜,操作时应保持恒温,自上向下滴滴管口与冷凝液的液面距离应控制在5cm以下,以防滴下降速度太快。(二)、考虑影响圆整度的主要因素液滴在冷凝剂中的移动速、表面积、冷凝剂的性质、温度、丸重和料温等。液滴在冷剂中移动速度越快,受重力(或浮力)的影响越大,就越容呈扁形。二者密度相差大或冷凝剂的黏度小都能增加移速度,影响其圆整度。表面积大的液滴收缩成球体的力量强,圆整度较好,因而小丸的圆整度较大丸好;含有空气的滴滴入冷凝剂中,在下降的同时逐渐冷却收缩成丸并逸出带入的气泡,倘若滴丸在气泡未能逸出前凝固,即可产生洞,此时需要适当增加冷凝剂和液滴的亲和力,使空气尽排出,提高凝固时滴丸的圆整度;滴丸应梯度冷却,上温度稍高,因滴出的液滴经空气到达冷凝剂的液面时,可碰成扁形,并带着空气进入冷凝剂,此时如冷凝液上部温太低,滴丸未收缩成圆前就凝固,导致滴丸不圆整、有空、带尾巴。丸重增加后散热缓慢,基质易形成粗大的结晶使滴丸的表面粗糙不平,使圆整度变差;料温过低,易出现尾,圆整度差;料温过高,挥发性药物可能损失,且料温过易使滴丸表面皱折严重,圆整度降低、冷却不充分而黏连。时可以减少每次的投料量,以缩短药液受热时间。另,干浸膏粉碎过筛后与基质混合或将稠浸膏与基质混合,其他条件相同的情况下分别滴制,结果后者所制的滴丸外光滑,色泽均匀,较前者更为理想,既省时又可减少原料损。在小青龙滴丸的实验中发现,基质与水的配比变化滴丸成形影响较大,而在一定范围内药液温度、滴头口径、速与冷凝剂温度的变化对滴丸成形影响较小。（三）、人员操作应完全按照滴丸基本流程工作，防止人为因素对制剂产生影响。4、 洗涤 洗涤对于纯化已冷却的滴丸，去除依附于滴丸表面的冷却剂是十分重要的，根据不同的冷却剂使用洗涤液及洗涤方法也可能是不同的，但是原则上是不变的，（1）低温（2）洗涤液只溶解冷却剂不溶解滴丸（3）少量多次，即少量的洗涤液分多次对滴丸洗涤，对于有回收价值的洗涤液也应该回收再利用。5、 干燥 滴丸的干燥考虑到滴丸的融散机制，所以干燥残留的洗涤剂时所选用的温度不能超过人体的体温，否则对滴丸的质量，稳定性，外观等都会产生很大的影响，最适温度在25 。6、 定计量分装由于葛花解酲滴丸用于解酒湿，醒脾胃。再加上滴丸的高效，速效的特点，所以滴丸的用量相对较少我们采用10粒为单次口服剂量，采用塑料瓶作为内包装，封口有腊封，洁净度要求10000级，瓶装剂量100丸/瓶。外包装用纸质盒。4、 葛花解酲滴丸滴丸质量考察（一）、检查通则： 滴丸剂系指药材经适宜的方法提取、纯化后与适宜的基质加热熔融混匀，滴入不相混溶的冷凝介质中制成的球形或类球形制剂。 滴丸剂在生产与贮藏期间应符合下列有关规定。 1、根据不同品种可选用水溶性基质或非水溶性基质。常用基质有聚乙二醇类、泊洛沙姆、硬脂酸聚烃氧（40）酯、明胶、硬脂酸、单硬脂酸甘油酯、氢化植物油等。 2、冷凝介质必须安全无害，且与药物不发生作用。常用的冷凝介质有液状石蜡、植物油、甲基硅油和水等。 3、滴丸应圆整均匀，色泽一致，无粘连现象，表面无冷凝介质黏附。 4、根据药物的性质与使用、贮藏的要求，在滴制成丸后可包衣。 5、除另有规定外，滴丸剂应密封贮存。（二）滴丸剂应进行以下相应检查。【重量差异】 除另有规定外，滴丸剂照下述方法检查应符合规定。 检查法 取供试品 20 丸，精密称定总重量，求得平均丸重后，再分别精密称定每丸的重量。每丸重量与平均丸重相比较，按表1中的规定，超出重量差异限度的不得多于2丸，并不得有1丸超出限度1倍。表1平均丸重重量差异限度 0.03g 及0.03g 以下 15% 0.03g 以上至0.1g 12% 0.1g 以上至0.3g 10% 0.3g 以上 7.5% 包糖衣滴丸应检查丸芯的重量差异并符合规定，包糖衣后不再检查重量差异。包薄膜衣滴丸应在包衣后检查重量差异并符合规定；凡进行装量差异检查的单剂量包装滴丸剂，不再检查重量差异。【装量差异】 单剂量包装的滴丸剂，照下述方法检查应符合规定。检查法 取供试品10袋（瓶），分别称定每袋（瓶）内容物的重量，每袋（瓶）装量与标示装量相比较，按表2的规定，超出装量差异限度的不得多于2袋（瓶），并不得有1袋（瓶）超出限度1倍。 表2 标示装量 装量差异限度 0.5g 及0.5g 以下 12 0.5g 以上至1g 11 1g 以上至2g 10 2g 以上至3g 8 3g 以上 6【溶散时限】 照崩解时限检查法（附录 A）检查，除另有规定外，应符合规定。检查法 将吊篮通过上端的不锈钢轴悬挂于金属支架上，浸入 1000ml 烧杯中，并调节吊篮位置使其下降时筛网距烧杯底部 25mm，烧杯内盛有温度为 371的水，调节水位高度使吊篮上升时筛网在水面下15mm处。不锈钢丝网的筛孔内径应为 0.42mm；除另有规定外，取供试品 6 粒，按上述方法不加挡板进行检查，应在 30 分钟内全部溶散，包衣滴丸应在1小时内全部溶散。如有1粒不能完全溶散，应另取6粒复试，均应符合规定。 以明胶为基质的滴丸，可在人工胃液中进行检查。 【附注】人工胃液 取稀盐酸16.4ml，加水约800ml与胃蛋白酶10g，摇匀后，加水稀释成1000ml，即得。 人工肠液 即磷酸盐缓冲液（含胰酶）（pH6.8）（附录 D 缓冲液）。【微生物限度检查】微生物限度检查法系检查非规定灭菌制剂及其原料、辅料受微生物污染程度的方法。检查项目包括细菌数、霉菌数、酵母菌数及控制菌检查。 微生物限度检查应在环境洁净度10000级下的局部洁净度100级的单向流空气区域内进行。检验全过程必须严格遵守无菌操作，防止再污染。单向流空气区域、工作台面及环境应定期按医药工业洁净室（区）悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法的现行国家标准进行洁净度验证。 供试品检查时，如果使用了表面活性剂、中和剂或灭活剂，应证明其有效性及对微生物无毒性。 除另有规定外，本检查法中细菌及控制菌培养温度为 3035；霉菌、酵母菌培养温度为2328。 检验结果以1g、1ml、10g、10ml、10cm 为单位报告，特殊品种可以最小包装单位报告。 方法 1 取供试品5g（或5ml），加至含溶化的（温度不超过45）5g司盘80、3g 单硬脂酸甘油酯、10g 聚山梨酯 80 无菌混合物的烧杯中，用无菌玻棒搅拌成团后，慢慢加入 45的 pH7.0 无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至 100ml，边加边搅拌，使供试品充分乳化，作为120的供试液。 方法 2 取供试品10g，加至含20ml无菌十四烷酸异丙酯（制法见附录 B无菌检查法中供试品的无菌检查项下）和无菌玻璃珠的适宜容器中，必要时可增加十四烷酸异丙酯的用量，充分振摇，使供试品溶解。然后加入45的 pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液 100ml，振摇 510 分钟，萃取，静置使油水明显分层，取其水层作为110的供试液。【含量测定】边永玲、李焕芬、张颖等25提取葛花总皂普及测定葛花生药、葛花50%甲醇浸膏、葛花总皂普粗品中总皂普和总黄酮的含量。利用正丁醇提取.乙醚脱脂的方法富集总皂普。利用香草醛一硫酸分光光度法测定总皂普:采用NaNO2,Al ( N03) 3, NaOH显色.分光光度法测定总黄酮。表明葛花生药、葛花50%甲醇浸膏及葛花总皂普粗品中总皂普的含量分别为2. 36%、4. 19%、13. 71 %:总黄酮的含量分别为0. 75 &、0. 96%、3.55%。证明经过提取.葛花总皂普和总黄酮同时得到了富集;总皂普和总黄酮的含量测定方法简便、快速、灵敏、准确，可作为葛花质量监控的方法；谢文健、黄月纯26建立阳春砂仁中棚皮昔的HPL(:含量测定方法。方法采用Nucleodur C,s Cravit、色谱柱;流动相为乙睛- 0. 0l mol L-磷酸二氢钾溶液一冰醋酸(18:82:2);检测波长为254 nm;柱温为35 0oC;流速为1. 0 mL .min-1 。结果表明棚皮昔在0. 029 0. 464 g ( r = 0. 999 9 )范围内线性关系良好，加样回收率为99. 27 % , RSD为1. 00 %。证明此方法方法简便、结果准确，可作为阳春砂仁的质量控制指标之一；王永、葛尔宁27采用PrP-HPLC法.Tgerkin柱(1 5 0mm X4. 6rnn,5m)以甲醇:0. 025rnol/ L磷酸(70: 30)为流动相.流速1. Ornl.min-1.柱温2500C 。结果表明在0. 4g2.0g内与峰面积线性关系良好r=0. 99980。 肉豆恙在沸水后下煎药法中.其肉豆恙醚在汤药中的含量在2. 45rnin达到高峰，其后汤药中肉豆恙醚的含量逐渐降低。五、稳定性考察【稳定性研究实验方法】 1、高温实验 将滴丸置于表面皿中，在60下放置10天，分别于第5天和第10天进行取样，对滴丸外观、溶散时限和含量进行考察，结果与0天进行对比。2、强光照射实验 将滴丸置于表面皿中，在室温下于照度为4500Lx条件下放置10天分别于第5天和第10天进行取样，对滴丸外观、溶散时限和含量进行考察结果与0天进行对比。3、高湿度实验将滴丸精密称重后，置表面皿中，在室温下相对湿度为75%5%条件下放置10天，于第5天和第10天取样，准确称量实验前后样品的重量，考察滴丸溶散时限、含量和丸重差异，结果与0天进行对比。加速实验 将三批滴丸装于玻璃瓶中，置于相度湿度为60%5%、温度为302的条件下放置6个月，于第1、2、3、6个月末取样一次，准确称量实验前后样品的重量，对滴丸外观、丸重、溶散时限和总含量进行考察，结果与0月进行对比。参考文献：【1】王东坡,谭学林.葛花解酲汤对酒精性肝病防治作用的研究.贵阳中医学院学报.2002,24（2）.【2】王会肖，刘继锋，白玉等.葛花茯苓片的解酒作用及其机制.实验动物科学.2009,26(6).【3】李 萍，钟赣生.葛花对酒后血中乙醇浓度和肝中乙醇脱氢酶活性的影响.科技导报.2009,27(23).【4】伍嘉宁，潘锄云，周楚华等.葛花解酲汤抗乙醇中毒的研究.江西中医学院学报.1994,6(4).【5】王春华,杨志兰,段淑云,等.加味葛花解酲汤灌胃干预急性重症酒精中毒的临床研究.实用临床医学,2005,6:30-32.【6】刘亚千,李春海,杨更禄,等.不醉丹的有效性研究.实验动物科学与管理.2006,23:7-8.【7】张若明,李经才.解酒天然药物研究进展.沈阳药科大学学报.2001,18(2).【8】王庆端,江金花,孙文欣,等.葛根总黄酮的抗啤酒中枢抑制作用