糖醛酸含量测定.doc

糖醛酸含量测定硫酸-咔唑（523 nm）1实验材料1.1药品：半乳糖醛酸、四硼酸钠、浓硫酸、无水乙醇、咔唑、漩涡混合器、具塞试管1.2对照品溶液的配制精密称取干燥至恒质量的半乳糖醛酸10mg, 用适量的蒸馏水溶解, 并定容于100mL 容量瓶中, 配成100g/mL 的对照品溶液。1.3供试品溶液的配制精密称取多糖10mg, 加入蒸馏水溶解, 并定容于10mL 容量瓶中, 配制成浓度为1mg/mL 溶液。1.4四硼酸钠- 硫酸溶液的配制精密称取0.478g 四硼酸钠溶解于100mL 浓硫酸中备用3。1.5咔唑溶液的配制精密称取咔唑75mg, 溶解于50mL 无水乙醇中,配制成0.15%的咔唑溶液备用。2实验方法2.1测定波长的选择分别吸取对照品溶液、供试品溶液1mL, 置于10mL 具塞试管中, 在冰水浴中分别加入四硼酸钠- 硫酸溶液5mL, 用漩涡混合器混匀, 于沸水浴中加热20min, 取出后立即冷却至室温, 加0.15%咔唑溶液0.2mL, 摇匀, 在室温下保持2h, 另取1mL 蒸馏水同法操作作参比, 在波长400800nm 扫描,2.2标准曲线的制作分别精密吸取对照品溶液0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0mL 于10mL 具塞试管中, 各管加水至1mL, 分别在冰水浴中加入四硼酸钠- 硫酸溶液5mL,取出后立即冷却至室温, 加0.15%咔唑溶液0.2mL, 摇匀, 在室温下保持2h, 在最佳测定波长下测定其吸光度。编号100g/mL半乳糖醛酸溶液（ml）蒸馏水（ml）浓度（g/mL）四硼酸钠- 硫酸溶液用漩涡混合器混匀, 于沸水浴中加热20min,0.15%咔唑溶液(ml)OD1OD2OD3平均值标1010502标2010910502标3020820502标4030730502标5040640502标6050550502标7060460502标8070370502标9080280502标10090190502标111001005022.3样品糖醛酸含量的测定取供试品溶液各1 mL，同时做三个重复, 以空白试剂为参比, 按上述标准曲线的测定法, 分别测定其吸光度值, 计算样品中蛋白质的含量。蕨麻多糖（1 mg/ml）编号OD1OD2OD3平均值浓度（mg/ml）蛋白含量%硒多糖PAP1-1粗糖1-11-21-21-31-32-1精糖1 mg/ml2-205mg/ml3200440058006120077000ASP8ASPJ9ASPC103001160012900131300145000白沙蒿15ASPJ16ASPc17S-2（7.4）185（6.992）1910（6.7）20W-2（6.4）21正9（5.9）22黑沙蒿23粗糖24精糖2519（9.9）2630（8.4）2725（7.9）2813（7.3）29WH1（5.9）30瓜尔豆胶313233G31（7.1）34G32（6.7）35G25(6)36G26(5.7)3.1 稳定性实验取同一供试品溶液1 mL, 按下列时间梯度 测定3 次,观测其稳定性, 结果见表。稳定性实验结果时间（min ）102030405060708090120150OD1OD2OD3平均值静置时间过长？3.2 精密度实验精密吸取100 g/mL标准溶液0.5 mL 进行精密度试验, 连续进行6 次测定其吸光度,时间（min ）1223456OD3.3重现性实验精密吸取来自同一批原料的试样, 按样品测定方法, 分别测定其吸光度, 检验该测定方法的重现性,表明重复性较好, 样品号123456平均值OD1OD2OD3平均值3.4回收率实验精密吸取1mg/mL 供试品溶液0.1mL, 分别加入0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mL 的对照品溶液, 按样品测定方法, 分