高考生物一轮总复习 专题36 植物的组织培养技术、DNA和蛋白质技术、植物有效成分的提取课件（选修1）.ppt

专题3 5 6植物的组织培养技术 dna 和蛋白质技术 植物有效成分的提取 一 植物的组织培养技术1 菊花的组织培养 1 理论基础 植物细胞的 2 基本过程 全能性 接种 移栽 外植体 愈伤组织 长出丛芽 生根 移栽 3 实验操作步骤 制备ms培养基 外植体消毒 培养 栽培 2 月季的花药培养 全能性 四分体时期 1 理论基础 花粉具有 2 花粉发育过程 单核期 双核期等阶段 3 产生花粉植株的两种途径 3 植物组织培养所用的培养基为固体培养基 二 dna和蛋白质技术1 dna的粗提取与鉴定 1 实验原理 0 14mol l 蓝色 杂质 dna在不同浓度的nacl溶液中的溶解度不同 浓度为 时其溶解度最小 dna不溶于酒精溶液 dna与二苯胺在沸水浴中呈 2 实验步骤 选材 制备鸡血细胞液 破碎细胞 获取含dna的滤液 去除滤液中的 dna的析出与鉴定 2 多聚酶链式反应扩增dna片段 1 pcr原理 在一定的缓冲溶液中提供 分别与两条模板链结合的两种引物 耐热的dna聚合酶 同时控制温度使dna复制在 反复 进行 dna模板 四种脱氧核苷酸 体外 复性 2 pcr的反应过程 变性 延伸 3 血红蛋白的提取和分离 1 凝胶色谱法 也称分配色谱法 是根据 分离蛋白质的有效方法 相对分子质量较小的移动速度较慢 而相对分子质量较大的无法 移动速度较快 相对分子质量 进入凝胶内部 的大小 2 缓冲溶液 能够抵制外界的 对溶液ph的影响 维持ph基本不变 3 电泳 带电粒子在 的作用下发生迁移的过 程 酸和碱 电场 凝胶色谱柱的 4 实验操作 样品处理及粗分离 红细胞的洗涤 血红蛋白的释放 分离血红蛋白溶液 透析 凝胶色谱柱操作 凝胶色谱柱的制作 样品的加入和洗脱 纯度鉴定 用sds 聚丙烯酰胺凝胶电泳 装填 三 植物有效成分的提取 1 植物芳香油的提取方法 挥发性 压榨 1 水蒸气蒸馏法 适合提取 较强的植物芳香油 但不适合柑橘 柠檬芳香油的提取 因为水中蒸馏会导致 原料的焦糊和有效成分的水解等问题 萃取 有机溶剂 2 法 适合柑橘 柠檬芳香油的提取 3 法 利用植物芳香油易溶于 如石油醚 酒精等 的特性 可将植物原料用有机溶剂浸泡 芳香油可溶解在有机溶剂中 再通过蒸发 可以达到提取的目的 2 玫瑰精油的提取 水蒸气蒸馏 1 方法 法 2 实验流程 鲜玫瑰花 油水混合物 分离油层 除水 玫瑰油 3 橘皮精油的提取 压榨 压榨 静置 1 方法 一般采用 法 2 实验流程 石灰水浸泡 漂洗 过滤 再次过滤 橘皮油 水蒸气蒸馏 nacl 无水na2so4 4 胡萝卜素的提取 水 有机溶剂 萃取 1 胡萝卜素 橘黄色结晶 化学性质稳定 不溶于 微溶于乙醇 易溶于石油醚等 2 获取胡萝卜素的方法 从植物中提取 从岩藻中获得 利用微生物发酵生产 3 用 法提取胡萝卜素 依据 根据胡萝卜易溶于有机溶剂的特点 萃取流程 胡萝卜 粉碎 干燥 萃取 过滤 浓缩 胡萝卜素 判断正误 1 单倍体植株的形成有两种途径 主要取决于培养基中植 物激素的种类及其浓度配比 2 dna与二苯胺在常温下显示出蓝色反应 3 pcr技术的变性过程中需要用到dna解旋酶 4 利用凝胶色谱法分离蛋白质时 相对分子质量小的先洗 脱出来 5 萃取是利用了芳香油易溶于有机溶剂的特性进行提取的 一种方法 答案 1 2 3 4 5 考点一植物的组织培养 1 高度分化的植物细胞全能性表达的条件 1 离体状态 2 营养物质 有机营养 无机营养 3 植物激素 生长素 细胞分裂素 4 无菌 适宜的外界条件 2 影响植物组织培养的因素 1 内部因素 材料的选取 2 外部因素 营养成分的种类及配比 植物激素的用量及 使用顺序 ph 温度 光照等 3 获得成功的关键 1 植物组织培养所利用的植物材料体积小 抗逆性差 对 培养条件要求较高 2 培养材料一旦被微生物污染 就会导致实验失败 原因是微生物增殖快 生长迅速 消耗养分多 并产生代谢废物毒害培养材料 3 无菌技术主要包括对操作空间 实验用具 实验材料以 及操作者的消毒或灭菌 4 植物激素在组织培养过程中的重要作用 1 使用顺序不同 结果不同 2 用量比值不同 生长素 细胞分裂素 结果也不同 比值高 利于根的分化 抑制芽的形成 比值低 利于芽的分化 抑制根的形成 比值适中 促进愈伤组织的形成 5 实验操作中应注意的几个问题 1 材料的选取 菊花的组织培养实验中 应选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝 月季花药的培养实验中 应选择花粉发育过程中的单核靠边期的花粉进行培养 2 外植体消毒 所用的消毒剂是体积分数为70 的酒精和质量分数为0 1 的氯化汞溶液 所使用的清洗液是无菌水 3 培养过程 在初期 菊花的组织培养需光照 月季花药 的培养不需光照 而在后期均需光照 高考探究 考向植物的组织培养 典例 2014年广东卷 铁皮石斛是我国名贵中药 生物碱是其有效成分之一 应用组织培养技术培养铁皮石斛拟原球茎 简称plbs 类似愈伤组织 生产生物碱的实验流程如下 在固体培养基上 plbs的质量 生物碱含量随增殖培养时 间的变化如下图所示 请回答下列问题 1 选用新生营养芽为外植体的原因是 诱导外植体形成plbs的过程称 2 与黑暗条件下相比 plbs在光照条件下生长的优势体现 在 3 脱落酸 aba 能提高生物碱含量 但会抑制plbs的生长 若采用液体培养 推测添加适量的aba可提高生物碱产量 同学们拟开展探究实验验证该推测 在设计实验方案时探讨了以下问题 aba的浓度梯度设置和添加方式 设4个aba处理组 1个空白对照组 3次重复 因aba受热易分解 故一定浓度的无菌aba母液应在各组液体培养基 后按比例加入 实验进程和取样 实验50天完成 每10天取样 将样品 plbs 称重 g 瓶 后再测定生物碱含量 如初始 第0天 数据已知 实验过程中还需测定的样品数为 依所测定数据确定适宜的aba浓度和培养时间 当某3个样品 重复样 的 时 其对应的aba浓度为适宜浓度 对应的培养时间是适宜培养时间 解析 1 新生营养芽分裂能力强 全能性容易表达 根据题干可知 plbs类似愈伤组织 外植体形成愈伤组织的过程是脱分化 2 据图分析 光照下plbs的质量高于黑暗条件下 原因可能是光照有利于细胞增殖 叶绿体的形成和进行光合作用制造有机物 3 由于aba受热易分解 所以各种液体培养基灭菌后 应冷却 再加入不同浓度的aba 根据题干可知 实验50天完成 每10天取样 需要取样5次 4个aba处理组 1个空白对照组 3次重复 因此每次取样需要记录15个样品中的数据 共需要测定样品数75 适量的aba可提高生物碱产量 当样品的平均值最大时 所对应的aba浓度和时间为最适 答案 1 细胞分化程度低 容易诱导形成plbs 细胞的 脱分化 2 生长起始快快速生长时间较长plbs产量较高 75 plbs质量和生物碱含量乘积的 3 灭菌 冷却平均值最大 考点练透 1 2015年河南三模 请回答下列生物技术方面的问题 1 菌落是在固体培养基上由 繁殖而来的形态可见的子细胞群体 微生物接种的方法中最常用的是平板划线法和 法 2 菊花的组织培养的大致过程如下图所示 图中b c依次表示 过程 填名称 添加的关键激素是 该实验操作成功的关键是 所以要对外植体 超净工作台等消毒 对培养基 或培养器具 等灭菌 3 随着环境污染的加剧和石油危机出现 越来越多的国家使用乙醇作为代替燃料 生产中玉米和麦草的秸秆可以用来生产燃料乙醇 已知秸秆的主要成分是纤维素 人们首先利用纤维素分解菌将纤维素分解 纤维素分解菌多分布在富含 的土壤中 从土壤中筛选纤维素分解菌需要配制 培养基并加入特殊染料 当形成菌落以后可以根据菌落周围是否产生 来筛选纤维素分解菌 这种筛选纤维素分解菌的方法是 法 解析 1 菌落是在固体培养基上由单个细胞繁殖而来的形态可见的子细胞群体 微生物接种的方法中最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法 2 图中b c依次表示脱分化 再分化过程 添加的关键激素是细胞分裂素 生长素 该实验操作成功的关键是无菌操作 3 纤维素分解菌多分布在富含纤维素的土壤 从土壤中筛选纤维素分解菌需要配制鉴别培养基 刚果红可以和纤维素结合形成红色复合物 纤维素分解菌将纤维素分解以后 红色复合物消失 形成透明圈 答案 1 单个细胞稀释涂布平板 无菌操作 或无 2 脱分化 再分化细胞分裂素 生长素菌技术 3 纤维素鉴别透明圈刚果红染色 考点二dna的粗提取与鉴定1 实验流程 续表 续表 续表 2 实验关键 1 取材不能用哺乳动物的血细胞 原因是其成熟红细胞无 细胞核 2 获取dna时要向鸡血细胞液中加入足量的蒸馏水 以 便使细胞膜和核膜破裂 把核内物质释放出来 3 实验中有6次搅拌 除最后一次搅拌外 前5次搅拌均要朝一个方向 并且在析出dna dna再溶解和提取dna中 各步骤搅拌都要轻缓 玻璃棒不要直插烧杯底部 防止dna分子断裂 4 两次加蒸馏水的目的 第一次加蒸馏水是为了使血细胞吸水膨胀破裂 注 植物 细胞是用洗涤剂溶解细胞膜 第二次加蒸馏水是为了稀释nacl溶液 析出dna 5 用纱布过滤3次的目的 过滤血细胞破裂液 提取细胞核物质 滤液 滤取0 14mol l 1nacl溶液中析出的dna 黏稠物 过滤溶有dna的2mol l 1nacl溶液 滤液 6 用nacl溶液4次的目的 加2mol l 1nacl溶液 溶解提取的细胞核物质 加蒸馏水 0 14mol l 1nacl溶液使dna析出 加2mol l 1nacl溶液 溶解滤取的dna黏稠物 用2mol l 1nacl溶液 溶解丝状物用于鉴定dna 7 dna易吸附在玻璃容器上 所以实验中最好使用塑料烧杯 试管 容器 以减少dna的损失 3 去除滤液中的杂质的其他方案 1 方案一 用嫩肉粉 蛋白酶 它能水解蛋白质 但对dna 没有影响 2 方案二 加热至60 75 大多数蛋白质不能忍受 60 75 的高温而变性 但dna不变性 高考探究 考向dna的粗提取与鉴定 典例 2014年湖北模拟节选 请回答下列有关细胞和分子 生物学技术的问题 1 dna粗提取的实验原理是 dna在不同浓度的nacl溶液中的溶解度不同 在 mol l的nacl溶液中的最低 鉴定dna所用的试剂是 沸水浴加热呈 色 实验中使用酒精的目的是 实验过程中两次用到蒸馏水 第一次目的是使成熟的鸡血红细胞涨破释放出dna 第二次目的是 2 pcr技术的中文全称是 在操作过程中需要添加引物 它的化学本质是 反应过程中控制不同温度的意义是不同的 90 以上时 双链dna解聚为单链 50 左右时 引物与两条单链dna结合 72 左右时延伸 taqdna聚合酶有最大活性 使dna新链沿着 方向延伸 解析 1 dna在不同浓度的nacl溶液中的溶解度不同 在0 14mol l的nacl溶液中的最低 dna遇二苯胺 沸水浴 会染成蓝色 因此 二苯胺可以作为鉴定dna的试剂 dna不溶于酒精溶液 但是细胞中的蛋白质等某些物质则可以溶于酒精溶液 利用酒精可以除去溶于酒精的蛋白质等物质获取较纯净的dna 实验过程中两次用到蒸馏水 第二次加蒸馏水的目的是稀释nacl溶液的浓度 使dna析出 2 pcr技术的中文全称是多聚酶链式反应 引物的本质是dna或rna 反应过程中控制不同温度的意义是不同的 90 以上时dna变性形成单链 50 左右时 单链dna与引物结合 叫复性 72 左右时延伸 dna聚合酶沿着磷酸到五碳糖 5 3 的方向合成互补链 答案 1 0 14 二苯胺 蓝 除去溶于酒精的蛋白质 稀释nacl溶液 2 多聚酶链式反应 dna或rna 变性 复性 5 端 向3 端 考点练透 2 下图为 dna的粗提取与鉴定 实验装置 1 在图 所示的实验步骤中加蒸馏水的目的是 通过图 所示的步骤取得滤液 再在溶液中加入2mol l的nacl溶液的目的是 图 所示实验步骤中加蒸馏水的目的是 2 鉴定dna的方法是 向溶有dna丝状物的试管中加入 试剂 混合均匀后 将试管置于沸水中加热5min 冷却后可观察到溶液呈 也可取少许dna丝状物置于载玻片上 滴一 溶液 片刻后用水冲洗 可见丝状物被染成 解析 1 实验中为了提取出细胞核物质 利用渗透作用原理 向鸡血细胞液中加入蒸馏水 加上玻璃棒的快速搅拌 使血细胞吸水胀裂 释放出其中的核物质 dna物质在不同浓度nacl溶液中的溶解度不同 在2mol lnacl溶液中溶解度最大而呈溶解状态 在0 14mol lnacl溶液中溶解度最小而析出 成为白色丝状物 所以向溶有dna的2mol lnacl中缓慢加入蒸馏水 使nacl溶液的浓度降低到0 14mol l时 dna物质即可析出 2 鉴定dna分子的试剂有甲基绿 二苯胺等 前者遇dna呈现绿色 后者遇dna在沸水浴条件下呈现蓝色 答案 1 使血细胞破裂 使滤液中dna溶于浓nacl溶液 降低盐溶液浓度 使dna析出 2 二苯胺蓝色甲基绿绿色 考点三 蛋白质的提取和分离 以血红蛋白的提取和分离 为例 pcr反应的过程及结果1 蛋白质的提取和分离 1 样品处理 红细胞的洗涤 目的是去除杂蛋白 分离时采用低速短时间离心 直至上清液不再呈现黄色 表明红细胞已洗涤干净 血红蛋白的释放 在蒸馏水和甲苯 溶解细胞膜 的作用下 红细胞破裂 释放出血红蛋白 2 粗分离 分离血红蛋白溶液 将搅拌好的混合溶液离心后 将试管中的液体用滤纸过滤 除去脂溶性沉淀层 于分液漏斗中静置片刻后 分出下层的红色透明液体 透析 取1ml的血红蛋白溶液装入透析袋中 将透析袋放入盛有300ml的物质的量浓度为20mmol l的磷酸缓冲液中 透析12h 去除样品中相对分子质量较小的杂质 3 纯化 利用凝胶色谱柱可对血红蛋白进行纯化 凝胶色 谱法分离蛋白质的原理 见下表 4 纯度鉴定 使用最多的是sds 聚丙烯酰胺凝胶电泳 可 测定蛋白质的相对分子质量 dna与血红蛋白的提取和分离过程的比较 2 pcr反应的过程及结果 1 过程 变性 当温度上升到90 以上时 双链dna解聚为单 链 复性 温度下降到50 左右 两种引物通过碱基互补 配对与两条单链dna结合 延伸 温度上升到72 左右 溶液中的四种脱氧核苷酸 a t g c 在dna聚合酶的作用下 根据碱基互补配对原则合成新的dna链 2 结果 pcr一般要经历三十多次循环 每次循环都包括变性 复性 延伸三步 两引物之间的固定长度的dna序列呈指数扩增 3 细胞内dna复制与pcr技术的比较 高考探究 考向蛋白质的提取和分离 pcr反应的过程及结果 典例 2015年江西一模 下面是某研究小组开展的 猪血浆某白蛋白的提取及分子量测定 研究 请协助完成有关问题 材料仪器 新鲜猪血 低速冷冻离心机 透析袋 电泳仪 等 化学试剂 ph为7 4的缓冲液 柠檬酸钠 奈氏试剂 与 盐水等 实验步骤 1 样品获取 向新鲜猪血中加入 静置一 段时间后取上层 2 盐析法粗提蛋白质 向血浆中加入一定体积的饱和 nh4 2so4溶液 使 nh4 2so4的浓度达到50 充分混合后静置 离心 取沉淀物 向沉淀物中加入适量生理盐水使之溶解 再向其中加入一定体积的饱和 nh4 2so4溶液 使 nh4 2so4的浓度达到33 充分混合后静置 离心 取沉淀物 重复步骤 2 3次 最后用生理盐水将沉淀溶解即得粗提品 盐析粗提 血浆某白蛋白 的主要原理是 重复步骤 的主要目的是 3 透析除盐 将粗提品装入透析袋 以ph为7 4的缓冲液做透析液 每隔4h更换一次透析液 每次更换前利用奈氏试 检测中 若观察到透析液 时 即可终止透析 4 凝胶色谱法分离 透析后的样品经凝胶柱洗脱 获得纯 净血浆某白蛋白样品 5 分子量测定 化学物质sds能使蛋白质变性 解聚成单条肽链 在聚丙烯酰胺凝胶电泳中加入一定量的sds 电泳迁移率完全取决于肽链的分子大小 上图为本实验中用sds 聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定血浆某白蛋白的结果 根据电泳结果 某同学得出 提取的血浆某白蛋白有两条肽链 的结论 这种说法可靠吗 理由是 解析 1 样品获取 向新鲜猪血中加入 适量的 柠檬酸钠以防止血液凝固 静置一段时间后取上层血浆 2 盐析法粗提蛋白质 分析实验步骤可知 盐析粗提 血浆某白蛋白 的主要原理是该血浆白蛋白在50 和33 的 nh4 2so4溶液中溶解度低 重复步骤 的主要目的是除去更多的杂蛋白 3 利用缓冲液做透析液的目的是维持ph的相对稳定 防止ph变化对蛋白质结构造成破坏 检测中 若观察到透析液不出现黄色或红棕色沉淀时 说明小分子血浆蛋白已去除干净 即可终止透析 5 这种说法不可靠 由图可知 只能得出提取的血浆某白蛋白含有两种大小不同的肽链 而不一定是只有两条 答案 1 适量的 柠檬酸钠血浆 2 该血浆白蛋白在50 和33 的 nh4 2so4溶液中溶解度低除去更多的杂蛋白 3 防止ph变化对蛋白质结构造成破坏 不出现黄色或红 棕色沉淀 5 不可靠 只能得出提取的血浆某白蛋白含有两种大小不同的肽链 不一定是两条 考点练透 3 rt pcr是将rna逆转录 rt 和cdna的聚合酶链式扩 增反应相结合的技术 具体过程如下图所示 1 过程 需要加入缓冲液 原料 和引物a等 2 过程 首先要将反应体系的温度升高到95 其目的是 该反应体系中所用的taq酶至少应能耐受 3 过程 拟对单链cdna进行n次循环的扩增 理论上至 少需要 个引物b 4 利用rt pcr技术获取的目的基因 填 能 或 不能 在物种之间交流 该技术还可用于对某些微量rna病毒的检测 可提高检测的灵敏度 原因是 5 rt pcr过程中主要借助对 的控制 影响酶的 活性 从而使得化学反应有序高效地进行 答案 1 rna提取物逆转录酶 2 让逆转录酶变性失活 使mrna cdna杂合双链解开 答对一点即可 95 4 能 增加了待测rna逆转录产生的dna的数量 或浓 度 便于检测 5 温度 3 2n 1 考点四植物有效成分的提取 1 植物有效成分提取的三种方法的比较 续表 1 水蒸气蒸馏法要适当延长蒸馏时间 温度不能太高 2 压榨法必须在常温条件下进行 否则会影响产物的产量和质量 压榨时原料必须要浸透 这样压榨时不会滑脱 出油率高 不堵塞筛眼 使用石灰水充分浸泡原料的目的是破坏细胞结构 分解果胶 防止橘皮压榨时滑脱 提高出油率 高考探究 考向植物有效成分的提取方法和过程 典例 2015年新课标卷 回答与胡萝卜素有关的问题 1 胡萝卜含有的胡萝卜素中 最主要的是 填 胡萝卜素 胡萝卜素 或 胡萝卜素 该胡萝卜素在人体内可以转变成两分子 后者缺乏会引起人在弱光下视物不清的病症 该疾病称为 胡萝卜素是 填 挥发性 或 非挥发性 物质 2 工业生产上 用养殖的盐藻作为原料提取胡萝卜素时 填 需要 或 不需要 将鲜活的盐藻干燥 3 现有乙醇和乙酸乙酯两种溶剂 应选用其中的 作为胡萝卜素的萃取剂 不选用另外一种的理由是 答案 1 胡萝卜素维生素a夜盲症非挥发性 2 需要 3 乙酸乙酯 萃取胡萝卜素的有机溶剂应不与水混溶 而 乙醇为水溶性有机溶剂 考点练透 4 下列是与芳香油提取相关的问题 请回答 1 玫瑰精油适合用水蒸气蒸馏法提取 其理由是玫瑰精油具有 的性质 蒸馏时收集的蒸馏液 填 是 或 不是 纯的玫瑰精油 原因是 2 当蒸馏瓶中的水和原料量一定时 蒸馏过程中 影响精油提取量的主要因素有蒸馏时间和 当原料量等其他条件一定时 提取量随蒸馏时间的变化趋势是 3 如果蒸馏过程中不进行冷却 则精油提取量会 原因是 4 用萃取法提取玫瑰精油时 采用的溶剂是 原理是 5 某植物花中精油的相对含量随花的不同生长发育时期的变化趋势如图所示 提取精油时采摘花的最合适时间为 d左右 6 从薄荷叶中提取薄荷油时 填 能 或 不能 采用从玫瑰花中提取玫瑰精油的方法 理由是 答案 1 易挥发 难溶于水 化学性质稳定 不是蒸馏 时玫瑰精油随水蒸气一起蒸馏出来 得到的是油水混合物 2 温度 一定时间内随蒸馏时间的延长而增加 一定时间 后蒸馏量不再增加 3 下降部分精油会随水蒸气蒸发而流失 4 酒精 或石油醚 乙醚 戊烷等 玫瑰精油易溶于有机 溶剂 5 a 6 能薄荷油与玫瑰精油化学性质相似 1 下图表示菊花的嫩枝和月季的花药的离体培养过程 请 据图回答下面的问题 1 对菊花来说 要选取生长旺盛的嫩枝来进行组织培养 其原因是 对月季来说 适宜花粉培养的时期是花粉应处于 期 为确定该花粉是否处于该时期 最常用的方法是 2 在培养嫩枝组织和花粉的培养基中都要加入一定的植 物激素 常用的植物激素有 3 某同学在培养过程中发现培养基上感染了几种细菌 若在以尿素为唯一氮源的培养基中加入 指示剂培养几种细菌后 指示剂变红就可以鉴定其中含有能够分解尿素的细菌 为了避免微生物对培养造成的影响 所以在进行接种时应注意 接种室要消毒 只要戴口罩 操作时便可说话 外植体可预先用体积分数为70 的酒精浸泡 取出用无菌水冲洗后 再用0 1 的氯化汞溶液消毒 并用无菌水冲洗干净 接种操作要在酒精灯火焰旁进行 接种完毕应立即盖好瓶盖 a c b d 4 月季的花药培养与菊花的嫩枝组织培养不同 从植物产生的途径来说 花粉植株产生的途径除了图中所示外 还可以通过 阶段发育而来 这两种发育途径的差别主要取决于 5 不同植物对各种条件的要求往往不同 进行菊花组织培养一般将温度控制在 并且对光照的控制为 解析 1 要选取生长旺盛的嫩枝来进行组织培养 因为生长旺盛的嫩枝生理状况良好 容易进行脱分化 在单核期 细胞核由中央移向细胞一侧的时期 花药离体培养成功率高 为确定该花粉是否处于该时期 最常用的方法是醋酸洋红法 2 植物组织培养常用的激素为细胞分裂素和生长素 3 在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养某种菌后 ph上升 指示剂变红 可以初步鉴定该细菌能够分解尿素 接种要注意 消毒 无菌 防止杂菌污染 故接种室要消毒 操作时不可说话 外植体接种时要严格消毒 接种完后要防止再次污染 盖好瓶盖 4 月季的花粉植株产生的途径还可以通过胚状 体阶段发育而来 与花药离体培养的差别主要取决于培养基中激素的种类及其浓度配比 5 进行菊花组织培养一般将温度控制在18 22 并且对光照的控制为每天12h光照 ph控制在5 8左右 答案 1 生长旺盛的嫩枝生理状况好 容易诱导脱分化和 再分化单核醋酸洋红法 2 细胞分裂素和生长素 3 酚红c 4 胚状体培养基中激素的种类及其浓度配比 5 18 22每天12h光照 2 某生物兴趣小组开展dna粗提取的相关探究活动 具体 步骤如下 材料处理 称取新鲜的花菜 辣椒和蒜黄各2份 每份 10g 剪碎后分成两组 一组置于20 另一组置于 20 条件下保存24h dna粗提取 第一步 将上述材料分别放入研钵中 各加入15ml研磨 液 充分研磨 用两层纱布过滤 取滤液备用 第二步 先向6只小烧杯中分别注入10ml滤液 再加入20ml体积分数为95 的冷酒精溶液 然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌 使絮状物缠绕在玻璃棒上 第三步 取6支试管 分别加入等量的2mol lnacl溶液 溶解上述絮状物 dna检测 在上述试管中各加入4ml二苯胺试剂 混合均匀后 置于沸水中加热5min 待试管冷却后比较溶液的颜色深浅 结果如下表 注 越多表示蓝色越深 分析上述实验过程 回答下列问题 1 该探究性实验课题名称是 2 第二步中 缓缓地 搅拌 这是为了减少 3 根据实验结果 得出结论并分析 结论1 与20 相比 相同实验材料在 20 条件下保 存 dna的提取量较多 结论2 针对结论1 请提出合理的解释 4 氯仿密度大于水 能使蛋白质变性沉淀 与水和dna均不相溶 且对dna影响极小 为了进一步提高dna纯度 依据氯仿的特性 在dna粗提取第三步的基础上继续操作的步骤是 然后用体积分数为95 的冷酒精溶液使dna析出 解析 1 从表格可以看出 该实验有两个自变量 材料和温度 所以该探究性实验课题名称为探究不同材料和不同温度对dna提取量的影响 低温抑制了相关酶的活性 dna降解速度慢 提取的dna较多 2 第二步中用玻璃棒搅拌的目的是获取dna絮状物 所以若速度快 易造成dna断裂 3 本实验的结论可从两个方面来考虑 相同材料在不同温度下的结论 不同材料在相同温度下的结论 4 氯仿能使蛋白质变性 而对dna影响极小 所以可将第三步获得的溶液与氯仿混合 又因为氯仿密度大于水 所以蛋白质沉淀位于溶液下部 dna位于上清液中 答案 1 探究不同材料和不同保存温度对dna提取量的 影响 2 dna断裂 3 等质量的不同实验材料 在相同的保存温度下 从蒜 黄提取的