实习十九兔毛细度测定.doc

实习十九 兔毛细度测定 一、目的 通过实习，了解实验室内测定兔毛细度的方法，掌握用显微镜和显微镜投影仪测定兔毛细度技术。 二、材料和用具 显微镜、显微镜投影仪、测微尺、楔形尺、剪刀、刀片、载玻片、盖玻片、玻璃棒、探针、滤纸、尖头镊子、计数器，四氯化碳、乙醚、石蜡油、甘油，长毛兔兔毛。三、内容与方法(一)显微镜法1毛样处理 取被测毛样充分掺和、根尖颠倒数次、置烧杯中、用乙醚或四氯化碳洗涤，洗净后取出挤大溶剂，再将毛样央在滤纸中吸去多余溶剂，至无脂肪斑点为止，待溶剂在挥发十分钟后即可供分析用。2制片 取两枚刀片，中间夹两层滤纸，使刀片间有1mm左右的间隙，一手持洗净的毛束稍用力使毛纤维平展，另一手捏紧两刀片，将兔毛切成lmm左右的毛段，用探针将毛段拨在载玻片上，滴甘油1滴，搅拌均匀，加盖片封固。操作过程中注意不要产生气泡，待液体封固剂稳定后即可镜检。3调整接目测微尺的绝对值 接目测微尺是一个带有10个等分刻度线或带有方格刻度的圆形玻璃片，可放在显微镜的镜筒内，它的绝对值依显微镜放大倍数而定。接物测微尺是一个带有刻度的玻璃量具，它的中间有一个将1mm分为100等分的刻度线，在这个刻度线上，每一小格即为1100mm亦即10um。操作时先将接目测微尺放在镜简内，将接物测微尺故在显微镜载物台上，在定放大倍数下调整焦距使刻度线清晰，然后移动接物测微尺使之与接目测微尺在一端重合，寻找另一端两个测微尺刻度上的重合点，计算重合范围内接目测微尺与接物测微尺各有几格，因接物测微尺刻度上重合点，计算重合范围内接目测微尺与接目测微尺上每一格已知为10um，便可用已知的长度去量取接目测微尺上每一格是多少微米了。求出接目测微尺每一个刻度的绝对值，即可将接物测微尺移去，换上短纤维标本片，并用它来测量兔毛细度，测量时不得改变显微镜的倍数。如接目尺上 4格等于接物尺上个格，则接目尺每格的刻度值为： 如在400倍放大时，接目测微尺上30一50刻度与接物尺19格刻度重合接目测微尺上每格的刻度值为：为了准确，上述方法在不同区段重复两次，求得平均数。 4测量兔毛细度方法 兔毛细度受多种因素影响，测量时应根据研究目的制作不同部位的短纤维标本片，测量时，对每标本片要按一定顺序，由上而下、由左向右逐根测量随时调节焦距使影像清楚，再读取刻度数，这样，既可测到较宽的纤维也可测到窄纤维，准确度要求05格。每个兔毛毛样测100根。(二)显微镜投影仪法12 同 (一)。3楔形尺 用显微镜投影仪测量毛纤维细度需用特制的楔形尺，这种楔形尺由白色卡片制成，上面印有楔形黑线与各细度的微米值，其组距为25um。4测量方法 将已制好的毛样玻片放于显微镜投影仪载物台上，慢慢移动玻片，使盖片的一倾投影于测量圈内，然后移动调节器，使纤维的阴影明显地投在测量圈尺上，随后调节楔形尺位置，使毛纤维的阴影刚好嵌在楔形尺上的两线中间，在纤维纵面与楔形尺两线宽度吻合之处，以铅笔做次数的划计，在测量到定根数后，将楔形尺上已定组距内的根数记入统计表格中。每个兔毛毛样测100根。五、注意事项1测量过程中，有边界不清不能同时看清的毛纤维，可先使一边清晰，然后再测量 另一边。2重叠的纤维和难看清的纤维不测。3毛纤维粗细不均匀者，应当测其平均粗细部分。4测量时，毛纤维的一边在楔形尺一条线的内侧，另一边与楔形尺另一条的外侧相嵌。5只能平行移动楔形尺，不能掀起。67要测定两个毛样，求其平均数。若两次的平均匀细度相差超过3%，则必须测定第三个备用毛样。 8统计材料的数字要精确到小数点后两位。 六、作业 1叙述显微镜法和投影仪法测定兔毛细度的方法。 2分别用上述两