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文档简介

基因时代 为生命科学提供源动力 改良Lowry氏法测定蛋白质含量 TheLowryMethodforProteinQuantitation 基因时代 为生命科学提供源动力 目的与要求 掌握改良Lowry氏法测定蛋白质含量的原理及方法 了解标准曲线在物质定量测定中的应用及绘图要点 基因时代 为生命科学提供源动力 实验原理 在碱性条件下蛋白质的肽键与Cu2 螯合 形成蛋白质 铜复合物 双缩脲反应BiuretReaction 蛋白质分子中带有酚基的酪氨酸极易使酚试剂中的磷钼酸 磷钨酸还原 生成钼蓝 钨蓝蓝色化合物 蓝色深浅与蛋白质含量成正比 利用蓝色深浅与蛋白质浓度成正比的关系可绘制标准曲线 测定样品中蛋白质含量 还原反应 基因时代 为生命科学提供源动力 操作步骤 基因时代 为生命科学提供源动力 混匀后置于37度水浴10分钟 冷却后各管加入试剂B0 1mL 室温放置10分钟 各管接着加入试剂C3mL 立即混匀 置37度水浴10分钟 冷却后 以0号管为空白 在分光光度计上以波长650nm比色读取光密度值 基因时代 为生命科学提供源动力 结果与计算 根据测定管光密度值查标准曲线 由标准曲线计算血清蛋白质含量 再按血清稀释倍数换算为g L 基因时代 为生命科学提供源动力 注意事项 各管加酚试剂时必须快速 并立即摇匀 不应出现混浊 移液管使用前要看清楚刻度和是否写着快 吹 如有则需要用洗耳球吹出剩余液体 减量法可有效减少
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