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迈克试剂标准操作程序（SOP） 迈克试剂标准操作程序(SOP)试剂项目： -谷氨酰基转移酶IFCC法检测试剂盒-Glutamyltransferase(-GT) Assay Reagent Kit by IFCC Method适用于： 日立系列自动生化分析仪 四川省迈克科技有限责任公司 Sichuan MAKER Science Technology CO.,Ltd 四川省迈克科技有限责任公司编制试剂项目： -谷氨酰基转移酶IFCC法检测试剂盒-Glutamyltransferase（-GT） Assay ReagentKit by IFCC Method适用于： 日立系列自动生化分析仪目 录1.临床意义1.1医学决定水平2.检测原理3.样品准备3.1样品3.2样品稳定性4试剂盒4.1试剂盒组成4.2试剂准备4.3试剂稳定性4.4 试剂盒订货指南5.操作步骤5.1检测参数设置5.2校准5.2.1校准物5.2.2校准物准备5.2.3校准物稳定性5.2.4校准间隔5.2.5校准物溯源性5.2.6校准物订货指南5.3质控5.3.1质控物 5.3.2可接受性判定5.3.3质控物订货指南6.交叉污染7方法学特性7.1线性范围7.2精密度7.3灵敏度7.4抗干扰能力7.5抗凝剂的影响8.方法的可溯源性9.参考值范围10安全性和注意事项11技术服务12主要参考文献试剂项目： -谷氨酰基转移酶IFCC法检测试剂盒-Glutamyltransferase（-GT） Assay ReagentKit by IFCC Method适用于： 日立系列自动生化分析仪1. 临床意义-谷氨酰转移酶分布于肾、肝、胰等实质性器官，肝脏中-GT主要局限于毛细胆管和肝细胞的微粒体中，可用于对占位性肝病，肝实质损伤（慢性肝炎和肝硬化）的诊断及观察酒精肝损害的过程。-GT活力检测见于：肝胆疾病（胆道梗阻、阻塞性黄疸、胆管炎、胆囊炎、传染性肝炎、脂肪肝、酒精性肝硬化）、胰腺疾病（急慢性胰腺炎、胰腺肿瘤）、脂肪肾、心肌梗死、前列腺肿瘤、肾病等。1.1医学决定水平 25 U/L 可以与患者过去和/或将来的检测值比较，作为自身对照。 62.5 U/L 高于此值，应考虑引起-GT增高的各种原因。如结果在此值与下一水平之间（62.5-187.5 U/L）而碱性磷酸酶正常时，表示曾饮酒或服药。 187.5U/L 高于此值多见于肝胆疾患。应考虑进一步的诊断及治疗措施。2. 检测原理-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺甘氨酰甘氨酸-谷氨酰甘氨酰甘氨酸5-氨基-2-硝基苯甲酸本法以溶解度较大的-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺为底物，甘氨酰甘氨酸为谷氨酰基的受体。在-GT的催化下，谷氨酰基转移到甘氨酰甘氨酸分子上，同时释放出黄色的5-氨基-2-硝基苯甲酸，引起4054l0nm处吸光度的增高。吸光度增高速率与-GT活性呈正比关系。3. 样品准备3.1样品本试剂盒用于体外检测血清或血浆中-谷氨酰转移酶活力。样品为空腹血清或血浆（1.8mgEDTA-Na2或0.1mg肝素可抗凝1.0ml血液）。样品应在低温条件下运输保存。3.1样品稳定性样品中-GT室温可稳定8小时，在28可稳定7天，冰冻保存可稳定2个月。4. 试 剂 盒4.1试剂组成：R1： 检测试剂1Tris缓冲液 100.0mmol/L甘氨酰甘氨酸 100.0mmol/LR2： 检测试剂2-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺 4.0mmol/L含非反应稳定剂和防腐剂4.2试剂准备：即用型液体双试剂,开瓶装载即可使用，用后应及时冷藏保存。4.3试剂稳定性：试剂密闭避光贮存可稳定12个月，开瓶上机稳定30天。4.4试剂盒订货指南货号产品编码规格包装瓶型AA08G7010101008717R1 60ml3 R2 45ml17170瓶型AA08G6010101008706R1 90ml2 R2 45ml17060瓶型AA08H9010101008702R1 50ml4 R2 50ml17020瓶型AA08A0010101008100R1 40ml2 R2 10ml2通用瓶型试剂项目： -谷氨酰基转移酶IFCC法检测试剂盒-Glutamyltransferase（-GT） Assay ReagentKit by IFCC Method适用于： 日立系列自动生化分析仪5.操作步骤5.1 标准检测参数设定： 5.1.1 日立7060分析仪检测参数Test-GT & Test Name-GTUnitU/L Data ModeOn BoardReport Name-GTControl Interval 1000 Instrument Factor (Y=aX+b)a b Expected Value Expected Value Age(M)(F) 100 Y 11 - 50 7 - 32 - 100 Y 11 - 50 7 - 32 11 - 50 7 - 32 Technical Limit 0 - 1000 - STDConc.Pos.SamplePre.Dil.Calib.Lot No.QualitativeNo (1) 0 W15 0 0999000001 000000(1) 0 (2) * #15 0 0 # 000002 000000(2) 0 (3) 010 0 0000000000(3) 0 (4) 010 0 0000000000(4) 0 (5) 010 0 0000000000(5) 0 (6) 010 0 0000000000(6) 0 Test-GTAssay Code Rate-A 10 Wavelength (2nd/Primary)505 / 405Assay Point21 - 27 - 0- 0 Diluent W S.Vol.(Normal)15 0 0 S.Vol.(Decrease) 8 0 0 S.Vol.(Increase)30 0 0 ABS. Limit 17500 IncreaseProzone Limit UpperReagentT1240 0 & T2 0 0 T3 60 0 & T4 0 0 Calibration TypeLinear 2 2 0 Auto Time OutBlank 0SD Limit 999.9Span 0Duplicate Limit 502 Point 720Sensitivity Limit 0Full 0S1 ABS Limit -1000 13000Compensated Limit 注：“&”表示用户自定义通道号； “*”输入校准物标示值； “#”表示用户自定义校准液位置号 试剂项目： -谷氨酰基转移酶IFCC法检测试剂盒-Glutamyltransferase（-GT） Assay ReagentKit by IFCC Method适用于： 日立系列自动生化分析仪5.1.2 日立7170分析仪检测参数5.1.2.1 7170屏幕界面1试剂项目： -谷氨酰基转移酶IFCC法检测试剂盒-Glutamyltransferase（-GT） Assay ReagentKit by IFCC Method适用于： 日立系列自动生化分析仪5.1.2.2 7170屏幕界面2试剂项目： -谷氨酰基转移酶IFCC法检测试剂盒-Glutamyltransferase（-GT） Assay ReagentKit by IFCC Method适用于： 日立系列自动生化分析仪5.1.2.3 7170屏幕界面3试剂项目： -谷氨酰基转移酶IFCC法检测试剂盒-Glutamyltransferase（-GT） Assay ReagentKit by IFCC Method适用于： 日立系列自动生化分析仪5.1.2.4 7170屏幕界面4注：“&”表示用户自定义通道号；“*”输入校准物标示值；“#”表示用户自定义校准液位置号试剂项目： -谷氨酰基转移酶IFCC法检测试剂盒-Glutamyltransferase（-GT） Assay ReagentKit by IFCC Method适用于： 日立系列自动生化分析仪5.1.3 日立7020分析仪检测参数5.1.3.1 7020屏幕界面仪器菜单界面项目名称NO.界面项目-GT1Test Name -GT 2Assay Code (Mthd)速率法A 3Assay Code (Test) 0 4Raction Time 10 5Assay Point 1 22 6Assay Point 2 28 7Assay Point 3 0 8Assay Point 4 0 9Wave Leng (SUB) 505 10Wave Leng (MAIN) 405 11Sample Volume 15.0 12R1 Volume 240 13R1 POS & 14R1 Bottle Size 大 15R2 Volume 16R2 POS 17R2 Bottle Size 18R3 Volume 60 19R3 POS & 20R3 Bottle Size 大 21Calib. Type 线性 22Calib. Type (Wght) 0 23Calib. Conc.1 0 24Calib. Pos. 1 99 25Calib. Conc.2 * 26Calib. Pos. 2 # 27Calib. Conc.3 28Calib. Pos. 3 29Calib. Conc.4 30Calib. Pos. 4 31Calib. Conc.5 32Calib. Pos. 5 33Calib. Conc.6 34Calib. Pos. 6 35S1ABS 36K Factor 37K2 Factor 38K3 Factor 试剂项目： -谷氨酰基转移酶IFCC法检测试剂盒-Glutamyltransferase（-GT） Assay ReagentKit by IFCC Method适用于： 日立系列自动生化分析仪 续上表39K4 Factor 40K5 Factor 41A Factor 42B Factor 43C Factor 44SD Limit 999.9 45Duplicate Limit 50 46Sens Limit 0 47SIABS Limit (L) -1000 48SIABS Limit (H) 13000 49ABS. Limit 17500 50ABS. Limit (D/I) 增加 51Prz. Limit 52Prz. Limit(U/D) 53Prz.(End Point) 54Expect Value (L) 7 55Expect Value (H) 50 56Instr.Fact (a) 57Instr.Fact (b) 58Key setting 注：“&”表示用户自定义通道号；“*”输入校准物标示值；“#”表示用户自定义校准液位置号试剂项目： -谷氨酰基转移酶IFCC法检测试剂盒-Glutamyltransferase（-GT） Assay ReagentKit by IFCC Method适用于： 日立系列自动生化分析仪5.2校准5.2.1校准物 使用迈克科技有限责任公司的多项液体校准血清（商品名为Muti-Calibration Serum，M-CS）进行两点校准。5.2.2校准物稳定性迈克科技有限责任公司的多项液体校准血清-15-20可稳定24个月，28密闭保存可稳定5天。5.2.3校准物准备 多项液体校准血清室温放置15分钟,混匀后即可使用,混匀时应避免气泡产生；用后及时冷藏保存。5.2.4校准间隔 迈克-谷氨酰基转移酶IFCC法检测试剂具有良好的开瓶稳定性,一批试剂间28贮存30天无瓶间差，我们推荐校准间隔为30天。当试剂批号更换、仪器维修或光源等配件更换后应重新进行校准。5.2.5校准物溯源性迈克多项液体校准血清来源于健康正常人血清，其中HIV、HCV、HBV传染性指标经国家食品和药品监督管理局（SDA）批准的方法检测，结果均为阴性，但不排除存在潜在感染的危险性，使用时应视病人样品同等对待。血清添加物为人源性-谷氨酰基转移酶，其标示值是利用迈克科技有限责任公司的-谷氨酰基转移酶IFCC法检测试剂和日本Kainos公司提供的酶参考材料（ERM）及-谷氨酰基转移酶JSCC法检测试剂，在全自动生化分析仪上检测，同时平行检测大量临床正常和异常样品，经统计学处理后确认的靶值。日本Kainos公司的酶参考材料（ERM）具有依据JSCC法作为推荐方法在日本JSCC指定的权威参考实验室在全自动生化分析仪上确定的-谷氨酰基转移酶靶值。ERM为稳定的液体，属纯人源性酶参考材料，其反应特性与人血清一致。5.2.6校准物订货指南品名货号产品编码规格包装瓶型M-CSBS02150102190020153ml5塑料滴瓶5.3质控5.3.1质控物 使用迈克科技有限责任公司生产的液体生化质控血清（商品名为：Auto-Norm serum ，ANS、Auto-Pathology serum ，APS）。迈克液体生化质控血清来源于健康正常人血清，其中HIV、HCV、HBV传染性指标经国家食品和药品监督管理局（SDA）批准的方法检测，结果均为阴性，但不排除存在潜在感染的危险性，使用时应视病人样品同等对待。血清添加物为人源性-谷氨酰基转移酶，反应特性接近临床新鲜血清，基质效应小。迈克液体生化质控血清采用活性物质稳定技术，确保-谷氨酰基转移酶的稳定性。血清不含剧毒物质（如NaN3、硫柳汞等），对环境不造成污染,且不含蛋白酶水解抑制剂，确保血清活性成份的反应特性。-谷氨酰基转移酶的范围值是依据迈克-谷氨酰基转移酶IFCC法检测试剂和多项液体校准血清，采用迈克试剂标准操作参数在全自动生化分析仪上对其进行检测,将检测结果进行统计学处理后确定。5.3.2可接受性判定质控血清的检测值应在给定质控范围或符合用户室内质控规则。5.3.3质控物订货指南品名货号产品编码规格包装瓶型ANSB003500102000030505ml10塑料滴瓶APSB004500102000040505ml10塑料滴瓶试剂项目： -谷氨酰基转移酶IFCC法检测试剂盒-Glutamyltransferase（-GT） Assay ReagentKit by IFCC Method适用于： 日立系列自动生化分析仪6.交叉污染本试剂具有良好的抗交叉污染能力。不对迈克其它试剂造成污染，且不受迈克其它试剂的污染。7.方法学特性7.1线性范围：0 1000 U/L。样品中的-GT超出线性范围，可采用减量操作，或用蒸馏水按比例稀释后检测。7.2精密度：对迈克液体生化质控血清1例、临床标本4例进行50次重复检测，检测结果如下。 批内精密度 批间精密度血清检测次数均值(U/L)标准差变异系数（CV%）血清检测次数均值(U/L)标准差变异系数（CV%）I5038.22.336.10I5037.93.308.70II50112.35.064.51II50111.78.547.64III50321.512.763.97III50322.821.076.52IV50533.614.882.79IV50540.530.595.65V50952.117.611.85V50957.334.353.587.3灵敏度：本试剂最低检测限为1.0U/L,计算是由零浓度的-谷氨酰基转移酶样品平行检测20次,取其均值加3个标准差而得来。7.4抗干扰能力：胆红素855mol/L，血红蛋白0.5g/L，维生素C6mmol/L,脂浊5%（以甘油三酯含量表示相当于10.0mmol/L）时对检测结果无影响。7.5抗凝剂的影响：常规抗凝剂EDTA-Na2、EDTA-K2、肝素、枸橼酸钠等不影响本法对-谷氨酰基转移酶的检测。8.方法学可溯性: 迈克-GT试剂（Y）与日本Kainos公司-谷氨酰基转移酶 JSCC法试剂比对：回归方程：r=0.99,Y=0.989X + 0.76, n=50检测范围：0730U/L9.参考值范围11 50 U/L 37（男性），7 32 U/L 37（女性）。建议各实验室建立自己的参考值范围。10.安全性和注意事项血清等样品可能含有乙肝等病毒,有被感染的危险性,采血时应采取防范措施；本试剂含有NaN3应避免与铅铜等金属接触；试剂反应后所产生的废液及使用后难降解的包装材料应集中收集后交当地环境废物处理站处理。11.技术服务有关产品技术咨询请与本公司技术开发部联系,电话:关产品质量投诉请与本公司质管部联系,电话:于新装机用户，本公司可提供技术支持，电话剂项目： -谷氨酰基转移酶IFCC法检测试剂盒-Glutamyltransferase（-GT） Assay ReagentKit by IFCC Method适用于： 日立系列自动生化分析仪12.主要参考文献12.1 Szasz,G.and Z.Klin.Chem，Klin.Biochem. 12（1972）22812.2 Persijn，J.P.and Van der Silk，W.J.Clin. Chem，Clin.Biochem.14（1976）42112.3 Tietz, N. W., Specimen Collection and Processing; Sources of Biological Variation, Textbook of Clinical Chemistq4 2nd Edition, W. B. Saunders, Philadelphia, PA (1994).12.4 National Committee for Clinical Laboratory Standards, Procedures for the Handling and Processing of Blood Specimens; Approved Guideline, NCCLS publication H18-A, Villanova, PA (1990)12.5 Tietz, N. W., Fundamentals of Clinical Chemistq4, 3rd Edition, W. B. Saunders, Philadelphia, PA (1987).12.6 National Committee for Clinical Laboratory Standards, How to Define, Determine, and Utilize Reference Intervals in the Clin