饲料六大指标检测.doc

饲料、粪便常规指标检测1.水分原理：样品在103度烘箱内，在大气压下烘干，直至恒重。遗失的质量为水分。在该温度下干燥，不仅饲料中的吸附水被蒸发，同时一部分胶体水分也被蒸发，另外还有少量其他易挥发物质挥发。步骤：1.洁净的称样皿（1032）度烘箱中烘30min, 干燥器中冷却30分钟后称重，准确至0.001g.(重复操作，直至2次质量之差小于0.0005g为恒重)。 2.分析天平称取5g左右式样到称样皿中（每个样品2个平行，还要2个对照）盖子无需盖严，留缝在103度烘箱中烘4h，取出盖好盖子，冷却30分钟称重。标准：GBT 6435-2006 饲料中水分和其他挥发性物质含量的测定2. 粗灰分原理：试样在550度灼烧后，所得残渣，用质量分数表示。残渣中主要是氧化物，盐类等矿物质，也包括混入饲料中的沙石，土等，故称粗灰分。步骤：1.将坩埚于马弗炉中灼烧（550，30min），干燥器中冷却至室温后称重，准确至0.001g。2. 称取5克试样放入坩埚（每个样品2个平行，还要2个对照），在电炉上低温炭化至无烟为止。3. 炭化后，将坩埚移入马弗炉中，与550下灼烧3h。4.观察是否有炭粒，如无炭粒，继续于马弗炉中灼烧1h，如果有炭粒或怀疑有炭粒，将坩埚冷却，用蒸馏水润湿，在103的干燥箱中仔细蒸发至干，再将坩埚至于马弗炉中灼烧1h，至于干燥器中冷却称重，准确至0.001g。注意事项：1.样品自然放在坩埚中，勿压，避免样品氧化不足。2.样品开始炭化时，应有坩埚盖，防止损失，并打开部分坩埚盖，便于气流流通。3.炭化时，温度应逐渐上升，防止火力过大而使部分样品颗粒被逸出的气体带走。4.灼烧温度不宜超过600度，否则会引起磷硫等盐的挥发。标准：GBT6438-2007 饲料中粗灰分的测定3. 粗脂肪原理：油重法：用乙醚等有机溶剂反复浸提饲料样品，使其中脂肪溶于乙醚，并收集于盛醚瓶中，然后将所有的浸提溶剂加以蒸发回收，直接称量盛醚瓶中的脂肪重，即可计算出饲料样品中的脂肪含量。步骤：1.索氏提取器干燥处理。抽提瓶（内有数粒沸石）（1032）度烘箱，烘干30分钟干燥器冷却30分钟称重重复操作至两次之差小于0.0008g为恒重。2.试样的称取与烘干。分析天平称试样1.3g滤纸包铅笔注明标号103度烘箱烘干2h干燥器冷却称重。（此步骤中，要带手套称重，且保证滤纸包长度可全部浸于石油醚中为准。）3.试样的反复抽提。滤纸包抽提管抽提瓶加石油醚60100毫升6075度水浴加热石油醚回流控制回流速度和时间。（抽提前，先将滤纸包浸泡在石油醚较长时间，可减少抽提时间；一般控制回流10次/h，共回流约50次，本实验中，滤纸包已在石油醚浸泡20h以上，回流（34）次/h，共回流2h；检查抽提管流出的石油醚挥发后不留下油迹为抽提终点。）4.抽提后的烘干称重。取出滤纸包干净表面皿晾干装入称样皿103度烘箱烘至恒重称重。注意事项：1.全部称重操作，样品包装时要带乳胶或尼龙手套。2.测定样品在浸提前必须粉碎烘干，以免在浸提过程中样品水分随乙醚溶解样品中糖类而引起误差。3.除样品需干燥外，索氏提取器也应干燥。4.实验所用提取试剂为石油醚，需要无水，无醇，无过氧化物，否则会使测定结果偏高，或者过氧化物会导致脂肪氧化，在烘干时有引起爆炸的危险。5.加热乙醚或石油醚严禁用明火直接加热。6.若反复加热会使脂类氧化而增重。4. 粗纤维原理：酸碱洗涤法：用固定量的酸和碱，在特定条件下消煮样品，经酸除去全部淀粉，糖，部分蛋白质，碱性矿物质和植物碱；经碱除去大部分蛋白，脂肪，部分半纤维素，木质素；再用醚，醇，丙酮除去单宁，色素，脂肪，腊脂等醚可溶物；经高温灼烧扣除矿物质的质量，所余量为粗纤维，一纤维素为主，有少量的半纤维素和木质素等。步骤：1.称滤袋重铅笔标注称0.6g试样滤袋封口平放样品架。2.（酸煮）样品架纤维分析仪消煮器（0.130.005）mol/L硫酸溶液19002000毫升密封按加热，搅拌按钮设定时间40分钟（温度显示达100度，按计时按钮，开始倒计时）。3.（水洗）40分钟后关加热，搅拌按钮，关开关打开废液阀倒掉废液废液排净，关闭废液阀打开容器盖倒入19002000毫升蒸馏水（90100）度打开搅拌开关盖好盖冲洗4分钟排净废液关闭废液阀。重复两次水洗，至呈中性。4.（碱煮）加（0.230.005）mol/L氢氧化钾19002000毫升密封按加热，搅拌按钮设定时间40分钟（温度显示达100度，按计时按钮，倒计时开始。）5.（水洗）跟酸煮水洗步骤一样。6.取出样品架干净陶瓷盘中用手将滤袋水分轻挤掉103度烘箱中烘3h冷却称重。7.滤袋坩埚（已知质量）电炉炭化至无烟高温电炉500度灰化2h冷却称重。注意事项：1.酸处理会使很大一部分纤维素被溶解，粗纤维只包含了纤维素及一部分半纤维素和米质素，被溶解的部分半纤维素和木质素倍计算为无氮浸出物。5. 粗蛋白原理：各种饲料的有机物质在催化剂（如硫酸铜，硫酸钾或硫酸钠，硒粉）的帮助下，用浓硫酸进行消化作用，使蛋白质和氨态氮（在一定处理条件下也包括硝态氮）都转变为氨，并被浓硫酸吸收变为硫酸铵；而非含氮物质，则以二氧化碳，水，二氧化硫的气体状态逸出。消化液在浓碱的作用下进行蒸馏，释放出的氨，随汽水顺着冷凝管流入硼酸吸收液中，并与其结合成硼酸铵，然后以甲基红-溴甲酚绿作混合指示剂，用盐酸标准滴定溶液滴定，求出氮的含量，再乘以一定的换算系数（通常用系数6.25计算），即得出试样中粗蛋白质的含量。步骤：一.半微量水蒸气蒸馏法。1.试样的消化：分析天平称取0.3g试样至消化管加1勺催化剂再加10毫升浓硫酸（可少过量）消化炉上消化至透明澄清（此时为硫酸铵）。2.氨的蒸馏。试样冷却，加水20毫升至100毫升的容量瓶中，冷却后稀释至刻度，摇匀，作为试样分解液。20g/L硼酸35毫升至锥形瓶中，指示剂甲基红+溴甲酚绿各一滴，使半微量装置的冷凝管末端侵入此溶液（硼酸吸收液）。清洗反应室3次加10毫升样本液蒸馏水冲洗进样入口加400g/L氢氧化钠10毫升冲洗，入口处加水密封，防止漏气打开通气夹蒸馏4分钟冷凝管末端离开吸收液面，蒸馏1分钟水洗冷凝管末端洗液流入锥形瓶中停止蒸馏（计时时刻为吸收液变为蓝色时。）注意：蒸汽发生器应加甲基红数滴，硫酸数滴，蒸馏过程中，此溶液保持橙红色，否则补加硫酸。3.滴定：用0.0049mol/L的盐酸标准滴定溶液滴定至终点，溶液由蓝绿色变为灰红色。4.在测定饲料试样中含氮量的同时，应做一次空白对照测定，即各种试剂的用量及操作步骤完全相同，但不加样品，可以校正因试剂准所发生的误差。二全量法既定氮分析仪法。1.试样的消化。分析天平称取0.3g式样消化管1勺催化剂加10毫升浓硫酸消化炉上消化至透明澄清（此时为硫酸铵）。2.氨的蒸馏。试样冷却蒸馏水洗消化管盖内侧呈蓝色。20g/L硼酸35毫升锥形瓶指示剂甲基红，溴甲酚绿各一滴蒸馏装置冷凝管末端要侵入此溶液（硼酸吸收液）。设定氢氧化钠加入量为（7*10）毫升，蒸馏时间5分钟将消化管，锥形瓶放入指定的位置拉下防护门，蒸馏结束，用水冲洗冷凝管米端洗液均流入锥形瓶内。3.滴定。用0.974mol/L的盐酸标准滴定溶液滴定，至溶液有蓝绿色变为浅粉色，记录数据。注意事项：一。半微量法。1.清洗仅应室，蒸馏过程要注意各处螺丝夹得开关。2.注入试样液和氢氧化钠后，要水洗，并水封，防止漏气。3.当吸收液变蓝绿时开始计时。4.注意电炉和仅应室的状态，控制适宜的反应条件。二。半自动定氮分析仪方法。1.蒸馏完毕应先取下接受瓶，再关电源，以免酸液倒流。2.一次蒸馏后必须彻底洗净碱液，以免再次使用时引起误差。3.含硝酸盐多的饲料，用凯氏定氮法测定粗蛋白时，很多硝酸盐还原而损失。4.无水硫酸钾，无水硫酸钠：提高浓硫酸沸点，提高消化效力。硫酸铜：催化作用，做蒸馏时碱性反应的指示剂。硒粉：催化效能较强，可大大缩短消化时间，用量不宜过多，时间不可过久，控制消化温度，否则引起氮素损坏。6、 钙的测定（只测叶总的4个样）原理：将试样有机物破坏，钙变成溶于水的离子，并与盐酸反应生成氯化钙，在溶液中加入草酸铵溶液，使钙成为草酸钙白色沉淀，然后用硫酸溶液溶解草酸钙，再用高锰酸钾标准滴定溶液滴定游离的草酸根离子，根据高锰酸钾标准滴定溶液的用量，可以计算出式样的含钙量。步骤：1.试样溶液制备。称取25克试样于坩埚中炭化55020度炭化3h。向盛有灰分坩埚中加(1+3)HCL 10毫升，并滴浓HNO3（23）滴，小心煮沸。用滤纸过滤于100毫升容量瓶中用热水洗涤56次用水定容即可。2.草酸钙沉淀。移取10毫升溶液烧杯中加水100毫升调PH值2.53.0（指示剂甲基红两滴，滴氨水，红变橙黄，滴盐酸呈红色）。电炉上煮沸，滴加10毫升草酸铵溶液，且不断搅拌煮沸5分钟静置过滤。3.沉淀洗涤。过滤沉淀用氨水溶液洗沉淀68次，至无草酸根离子为止。4.沉淀溶解与滴定。滤纸+沉淀烧杯中硫酸溶液10毫升，50毫升水加热至80度左右。用0.0493mol/L高锰酸钾标准滴定溶液滴定至终点，30秒不退色。5.空白试验。一张滤纸干净烧杯硫酸溶液10毫升，50毫升水加热至80度左右用0.0493mol/L高锰酸钾标准滴定溶液滴定至终点。注意事项：1.每种滤纸空白滴定消耗高锰酸钾标准滴定溶液的用量有差异，至少每盒滤纸做一次空白滴定。2.洗涤草酸钙时，必须沿滤纸边缘向下洗，使沉淀集中于滤纸中心，以免损失。3.每次洗涤过滤时，都必须等上次洗涤液完全滤净后再加，每次洗涤不得超过漏斗体积的2/3. 4.洗涤液氨浓度小，可边冲水边倒入废液池。7、 磷的测定（只测叶总的4个样）原理：将试样中有机物破坏，使磷元素游离出来，在酸性溶液中，用钒钼酸铵处理，生成黄色的络合物，在波长400nm下进行比色测定。此法测得结果为总磷量，其中包括动物难以吸收利用的植酸磷。步骤：1.试样的分解。称取25克试样于坩埚中电炉低温炭化至无烟高温炉55020度灰化3h冷却。向盛有灰分坩埚中加盐酸10毫升，浓硝酸溶液23滴，小心煮沸。用滤纸过滤于100毫升容量瓶中用热水洗涤56次用水定容，摇匀，为试样分解液。2.P标准曲线的绘制。准确移取磷标准溶液0,1,2，5,10,15毫升于50毫升容量瓶中，各加入钒钼酸铵显色试剂10毫升，用水稀释至刻度，摇匀，放置10分钟，以0毫升溶液为参比，用10mm比色池，在400nm波长下，用分光光度计测定各个溶液的吸光度