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第十八章 体液免疫球蛋白的测定Assay for humoral Ig第一部分 目的要求和教学内容一、目的要求： 掌握免疫球蛋白定量测定的方法参考值及应用评价。了解免疫球蛋白定量的医学意义。二、教学内容：1免疫球蛋白定量的常用检测方法和参考值2. 免疫球蛋白定量检测方法评价及应用。3. 免疫球蛋白定量临床意义1）血清Ig定量临床意义。2）尿微量Ig定量临床意义。3）脑脊液Ig定量临床意义。第二部分 测 试 题一、选择题：(一)单项选择题(A型题)1CSF中一般以IgG指数反映中枢NS鞘内合成IgG能力（）AIgG指数=CSF中IgG/血清中IgGBIgG指数=CSF中IgG/CSF中ALbCIgG指数=CSF中IgG/血清中IgGCSF中白蛋白/血清中白蛋白DI gG指数=血清中IgG/CSF中IgG血清中白蛋白/CSF中白蛋白2. 单项琼脂扩散试验可用于免疫球蛋白的测定，有关叙述错误的是：A应选择特异性强、效价高、亲和力高的抗体 制板时温度控制在5060 待测样品抗原如果含量高，应稀释后再检测 不同批次抗血清都可以使用相同的标准曲线同一批次抗血清可以使用相同的标准曲线3. 免疫球蛋白的测定可用于哪些疾病的检测：AIg全缺乏疾病 B选择性Ig缺乏症C单克隆Ig血症 D多克隆Ig血症 E以上所有疾病4 人类免疫球蛋白占血浆蛋白总量的：A 5B 10C 15D 20E 505 免疫浊度测定法出现测量误差的最大因素是：A 抗体过量B 钩状效应C 环境温度影响D 加入抗原、抗体的时间E 光源的强弱和波长的影响6 血清中缺乏IgG患者，易患下列哪种疾病：A 革兰阴性细菌败血症B 化脓性感染C 反复呼吸道感染D 巨球蛋白血症E 重链病7 类风湿性关节炎患者，Ig以哪型增高为主：A IgAB IgDC IgED IgGE IgM8 脑脊液中Ig 浓度依次是：A IgGIgMIgAB IgGIgAIgMC IgMIgAIgGD IgMIgGIgAE IgAIgMIgG9 血清中IgE 含量升高，常见于下列哪种情况：A 大量吸烟B 妊娠末期C SLED 中毒性骨髓疾病E 肾病综合症10 免疫电泳常采用的抗血清是：A IgG、IgM、IgA、IgD、IgCB IgG、IgM、IgA、k、C IgG、IgA、IgD、k、D IgG、IgM、IgD、k、E IgG、IgM、IgA、sIgA、IgC11 M 蛋白于相应抗体反应形成沉淀弧有何特点：A 较普通沉淀弧宽，向抗体槽凸出B 较普通沉淀弧窄，向抗体槽凹出C 较普通沉淀弧宽，向抗体槽凹出D 较普通沉淀弧窄，向抗体槽凸出E 与普通沉淀弧宽一样（二）、配伍题(问题14)A. IgGB. IgAC. IgMD. IgEE. SIgA1. 人体血液中含量最多和最主要的免疫球蛋白是：2. 能通过胎盘的免疫球蛋白是：3在外分泌液中含最多的免疫球蛋白是：4在初乳中含量最多的免疫球蛋白。二、填空题1免疫球蛋白根据重链的不同可分为（ ），（ ），（ ），（ ）和 （ ）五类。2免疫固定电泳的特点是：（ ）、（ ）、（ ）、（ ）。3Ig 中k/比率正常范围是（ ）三、名词解释1. 体液免疫(humoral immunity):2. M蛋白（monoclonal protein）:3. 本-周蛋白（bence-Jones）:4. 冷球蛋白：四、简答题1血清免疫球蛋白测定方法有那些？2免疫球蛋白IgG、IgA、IgM测定有何意义？3如何评估肾小球滤膜破坏程度？4如何判定血脑屏障受损程度？ 五、论述题 试述本周蛋白检测的意义？ 第三部分 参考答案与题解一、选择题：(一)单项选择题(A型题)1 C 2. D 3. C 4.D 5. 6. 7.E 8. 9. 10. 11.（二）配伍题1 2 3 4二、填空题1IgM IgG IgA IgE IgD 2周期短、敏感性高、分辨清晰、结果易于分析。31.22.4三、名词解释1体液免疫(humoral immunity): B细胞介导的特异性免疫应答。2M蛋白（monoclonal protein）: 单克隆免疫球蛋白，是B淋巴细胞或浆细胞单克隆异常增殖所产生的一种在氨基酸组成及顺序上十分均一的异常单克隆免疫球蛋白； 3. 本-周蛋白（bence-Jones）:尿中游离的免疫球蛋白轻连。4. 冷球蛋白：一组低温下发生沉淀，加温后又复溶的Ig。四、简答题1血清免疫球蛋白测定方法有那些？ 答：单向免疫扩散法：原理，优点：简单，条件要求低，但抗体需要高效价高特异性，灵敏度： mg/ml 免疫比浊法:原理，优点：检测结果准确，精密度高，耗时短，灵敏度高ug/ml2免疫球蛋白IgG、IgA、IgM测定有何意义？答：IgG、IgA、IgM均升高则慢性疾病， IgG升高则多为细菌感染导致，新生儿血清IgM升高则常为 宫内感染。单一Ig显著升高则多为免疫增殖病：多发性骨髓瘤，重链病、恶性淋巴瘤。Ig降低则体液免疫缺陷或联合免疫缺陷。3如何评估肾小球滤膜破坏程度？ 答：根据选择性尿蛋白指数-SPI评估肾小球滤膜破坏程度表明肾脏有高度选择性的排泌分子量小的蛋白质，SPI0.1表明肾脏有高度选择性的排泌分子量小的蛋白质，此时肾脏轻度病变。SPI0.2表明肾脏非选择性的排泌分子量较大的蛋白质，此时有膜性肾病，膜增值性肾炎和肾病综合症。尿中IgA显著升高出现在原发性肾小球肾炎和慢性肾小球肾炎，IgG升高出现在原发性肾小球肾炎和慢性肾小球肾炎， IgM升高出现在慢性肾炎，4如何判定血脑屏障受损程度？ 答检测白蛋白商值(Alb quotient)= (ALbCSFAlbS)1000反应血脑屏障受损程度。 9时提示无明显受损，9-15为轻度受损，15-33为中度受损，33-100为重度受损；100为完全破裂。五、论述题本周蛋白即尿中游离的免疫球蛋白轻链，其检测对轻链病的诊断是必不可少的项目，并对多发性骨髓瘤、原发性巨球蛋白血症、重链病等疾病的诊断、鉴别和预后判断均有一定帮助。本周蛋白在pH50 的条件下，加热至50-60出现沉淀；继续加热至90后又重新溶解。根据这种理化性质，又将其称为凝溶蛋白，故可根据这一特点，进行化学方法的检测。这种加热沉淀法简便易行。但敏感度低，也不能确定轻链的型别。也可使用抗k 和型轻链抗血清进行免疫电泳分析，为提高检出率，尿标本宜先用聚乙二醇通过半透膜浓缩。游离轻链往往与其中一型(k 或)的抗血清反应，在-区附近形成一条致密的弓形沉淀弧。有时轻链外还含有其他蛋白，要注意识别。如多克隆免疫球蛋白常同时与k 和两型抗轻链血清形成沉淀弧，而单克隆免疫球蛋白(M 蛋白)虽只与其中一型抗轻链血清反应，但也与某一型重链抗血清产生一位置相同的沉淀弧，通过观察分析多可作出正确判断。轻链病患者尿中可测得本周蛋白，但由于其分子量较小，易迅速自肾脏排出，故血中反而呈阴性，检测时应该注意。非分泌型骨髓瘤患者蛋白区带电泳中不能检出单克隆丙种球蛋白的M 区带，往往呈现低丙种球蛋白血症的特征