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文档简介

TRAP染色（sigma-aldrich.NO387）Test procedure：1. 37预热足够的去离子水。 2. Fixation solution（固定液）室温放置，细胞爬片浸没30秒，用去离子水彻底清洗，不要让爬片太干燥。3. 准备两个1.5ml EP管，各加0.5mL Fast garnet GBC Base solution（快速石榴石型碱溶液）和0.5mL Sodium Nitrite Solution（亚硝酸盐溶液） ,轻轻混匀30秒，室温静置2分钟。两者混合后为 步骤三混匀的溶液 4. 另标签一个50ml离心管为A（B），并按以下要求配置混合液： (个人意见：说明书的 B 不用做只是对照) ？ 5. 把步骤4中的配置的染色液倒入合适的染色缸中，水浴加热到37，再加玻片前一定要保证温度达到37。Note：个人意见：直接在35mm皿上放置可拆卸96微孔板染，然后避光水浴（锡箔纸包裹后放置于一次性手套）。 6. 把爬片放入染色缸中，37避光孵育1小时。 7. 孵育1小时后，用去离子水彻底清洗爬片 可选步骤：（个人意见：要是苏木精染得技术不好还是别染了，最后步骤可省了） 8. 在HematoxylinGill NO.3(苏木精溶液)复染2分钟。 9. 碱性自来水冲洗几分钟，直到出现蓝色的核。 10. 自然晾干，甘油明胶封片，显微镜观察。Another one染色步骤：1.取6孔板，弃液，加PBS1ml/well清洗，弃PBS2.4%多聚甲醛（37左右）1ml/well加入6孔板，置于孵箱25min取出，加1ml/well PBS 清洗3.1个1.5ml EP管，+fast garnet GBC base solution（氨偶氮卞） 0.5ml+sodium Nitrite solution(亚硝酸盐) 0.5ml二者轻轻混匀30秒，室温静置2min4. 37超纯水 45ml步骤3的液体 1mlNaphthol AS-BI phosphate solution（萘酚） 0.5mlAcetate solution （醋酸） 2mlTartrate solution（酒石酸盐，避光加入） 1ml依次加入25平方厘米培养瓶，混匀，至于孵箱5min左右，使混合液温度尽量达到375.取出配置好的染液，2ml/we
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