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文档简介
江苏省盐城市时杨中学2012-2013学年高二下学期生物基因工程-dna重组技术的基本工具导学案 人教版编制:沈洪霞 审核: 批准: 【学习目标】1、简述基因工程的概念含义。2、简述基因工程的原理。3、说出dna重组技术的基本工具及其作用、特点。【问题情境】1、什么叫基因工程?2、基因工程的基本工具有哪些?3、限制性核酸内切酶切割的是dna特定部位的2个核苷酸之间的氢键还是磷酸二酯键?4、最简单的质粒载体必须包括哪三个部分?【我的疑问】备 注 第1页共4页 【自主探究】一、基因工程的概念和原理1、基因工程是在 水平上操作、改变生物遗传性状的技术,因此又叫做 。2、基因工程的原理是: 。二、基因工程的工具1、限制性核酸内切酶“分子手术刀”(1)分布:微生物。(2)特点:一种限制酶只能识别一种特定的 ;并在特定部位的2个核苷酸之间的切开 键。例:ecori只能识别gaattc碱基序列,切割的是ga之间的键。(4)dna分子经限制酶切割产生的dna片段,末端通常有两种形式,即 和 。2、dna连接酶“分子缝合针”(1)分类:一类是从大肠杆菌中分离得到的,称为dna连接酶。dna连接酶只能将连接起来,不能将双链dna片段平口末端之间进行连接;另一类是从t4噬菌体分离出来的,称为t4dna连接酶。t4dna连接酶既可以“缝合”双链dna片段互补的,又可以“缝合”双链dna片段的,但连接 之间的效率比较低。(2)dna连接酶连接的是 键。3、载体“分子运输车”(1)载体的作用:将切割下来的 导入受体细胞。(2)作为载体必须具备以下条件:能够在宿主细胞中复制并稳定地保存;具有多个限制酶切点,以便与外源基因连接;具有某些标记基因,便于进行筛选,如对抗生素的抗性基因。(3)目前通常使用的载体是,它是一种相对分子质量较小、独立于拟核dna之外的环状dna分子。其他载体还有 和等。备 注第2页共4页 【课堂检测】例1、以下是两种限制酶切割后形成的dna片段,分析回答问题。 (1)其中和是由一种限制酶切割形成的 末端,两者要重组成一个dna分子,所用dna连接酶通常是 。(2)和是由另一种限制酶切割形成的末端,两者要形成重组dna片段,所用dna连接酶通常是 。 例2、治疗糖尿病用的胰岛素,在过去主要是从动物(如猪、牛)体获得的。自20世纪70年代基因工程发展起来以后,人们开始采用高新技术生产胰岛素,其操作过程如图所示:(1)图中的质粒存在于细菌细胞中,从其分子结构看,可确定它是一种 。(2)请根据碱基互补配对的原则判断,在连接酶的作用下,甲与乙能否拼接起来,并说明理由。 (3)细菌丙进行分裂后,其中被拼接的质粒也由一个变成两个,两个变成四个质粒的这种增加方式在遗传学上称为 。目的基因通过表达后,能使细菌产生胰岛素,这是因为基因具有控制合成的功能。【回标反馈】备 注 第3页共4页 【巩固练习】1、关于限制酶的说法中,正确的是 ( )a、限制酶是一种酶,只识别gaattc碱基序列b、ecori切割的是ga之间的氢键c、限制酶一般不切割自身的dna分子,只切割外源dnad、限制酶只存在于原核生物中2、dna连接酶催化的反应是 ( )a、dna复制时母链与子链之间形成氢键 b、黏性末端碱基之间形成氢键c、两个dna片段黏性末端之间的缝隙的连接 d、a、b、c都不正确3、作为基因的运输工具载体,必须具备的条件及理由是 ( )a、能够在宿主细胞中稳定地保存下来并大量复制,以便提供大量的目的基因b、具有多个限制酶切点,以便于目的基因的表达c、具有某些标记基因,以便为目的基因的表达提供条件d、能够在宿主细胞中复制并稳定保存,以便于进行筛选4、质粒是基因工程最常见的载体,它的主要特点是 ( )能自主复制不能自主复制结构很小是蛋白质是环状rna 是环状dna能“友好”地“借居”a、 b、 c、 d、5、在受体细胞中能检测出目的基因是因为 ( )a、目的基因上有标记 b、质粒具有某些标记基因c、重组质粒能够复制 d、以上都不正确6、关于质粒的叙述正确的是 ( )a、质粒是能够自我复制的环状dna分子 b、质粒是唯一的载体c、重组质粒是目的基因 d、质粒可在宿主外单独复制7、基因工程中可用作载体的是 ( )质粒噬菌体病毒动物细胞核a、 b、 c、 d、8、下列关于基因工程中所选用的质粒的说法,错误的是 ( )a、不能没有标记基因 b、是小型链状的dna分子c、能够自我复制 d、可与目的基因重组9、右图中的黏性未端属于同一限制酶切割而成的是 ( )a、 b、 c、 d、10、要使目的
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