补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识.doc

补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识（一）目的要求学习香豆素类化合物的提取分离及检识，通过实验要求：1掌握用溶剂法提取香豆素类化合物的操作技术。2通过补骨脂素和异补骨脂素的分离，熟悉干柱色谱的操作技术。3掌握香豆素类化合物的检识方法。（二）主要化学成分的结构及性质补骨脂 为豆科植物补骨脂Psoralea corylifolia L.的干燥成熟果实，全国各地多有栽培。含有多种呋喃香豆素类成分，主要含补骨脂内酯 （补骨脂素）、异补骨脂内酯 （异补骨脂素）和补骨脂次素等。其中补骨脂素和异补骨脂素为抗白癜风的主要有效成分，具有光敏性质。1.补骨脂素(psoralen) 又称补骨脂内酯，分子式C11H6O3，分子量186.16。无色针状结晶（乙醇），mp.189190，有挥发性。溶于甲醇、乙醇、苯、氯仿、丙酮；微溶于水、乙醚和石油醚。2.异补骨脂素(isopsoralen) 分子式 C11H6O3，分子量186.16。无色针状结晶，mp.137138，溶于甲醇、乙醇、丙酮、苯、氯仿，微溶于水、乙醚，难溶于冷石油醚。 补骨脂素 异补骨脂素3.补骨脂乙素(isobavachalcone) 又称补骨脂酮、异补骨脂查耳酮。分子式C20H20O4，分子量324.36。黄色片状结晶（甲醇-水），mp. 166167。4.补骨脂甲素(coryfolin) 又称补骨脂黄酮，分子式C20H20O4，分子量324.36。无色针状结晶，mp.191192。 补骨脂乙素 补骨脂甲素（三）实验原理本实验根据补骨脂素和异补骨脂素等在乙醇中溶解度大，利用乙醇从中药补骨脂中提取补骨脂素及异补骨脂素等，并用活性炭吸附脱色，再依据补骨脂素和异补骨脂素的极性差异，利用柱色谱予以分离。（四）实验内容1：把20g补骨脂研磨后用50%乙醇冷浸提取72h,24h,24h,每次用六倍量体积的乙醇。铺薄层硅胶板，为了下次筛分离条件，铺好15块板。2：用补骨脂素和异补骨脂素的标准品通过TLC筛选硅胶柱色谱的分离条件。根据文献，设计了石油醚：乙酸乙酯10：1，石油醚：乙酸乙酯8：1，石油醚：乙酸乙酯6：1，石油醚：乙酸乙酯4：1等几组流动相配比，经过对Rf值的比较，最终决定用石油醚：乙酸乙酯6：1作为硅胶柱色谱分离的分离系统。把醇提液减压浓缩至剩下20ml水左右。萃取：浓缩后的混旋液加蒸馏水至100ml，用乙酸乙酯萃取三次。3.柱色谱分离，采用湿法装柱干法上样。4.检识薄层色谱检识薄层板：硅胶G-CMC-Na板试 样：补骨脂素乙醇液异补骨脂素乙醇液对照品：补骨脂素对照品乙醇液异补骨脂素对照品乙醇液展开剂：石油醚-醋酸乙酯（61） 显 色：紫外灯下观察荧光（五）实验说明及注意事项1提取药材应是未炮制过的补骨脂种子,其补骨脂素和异补骨脂素等成分含量较高。2补骨脂素和异补骨脂素含内酯结构，具有内酯类成分的通性，可用碱提酸沉法提取，但因补骨脂种子中含有大量油脂和糖类成分，易与碱水发生皂化反应和形成胶状物，致使难以滤过，降低收得率，故选用50乙醇提取而不用碱溶酸沉法提取。3由补骨脂种子中提取所得的精制品，为补骨脂素和异补骨脂素的混合物结晶，两者含量近于11，但随药材品种、质量等不同