食用菌的组织分离技术.ppt

实验三原种的制作技术 一 实验目的 1 掌握几种原种培养基的配方及其制作 2 了解食用菌原种的制作原理 掌握制备过程 3 了解灭菌的基本原理 掌握蒸气灭菌锅的使用方法 二 实验材料 灭菌锅 超净工作台 培养室 菌种试管玉米粒 铝锅 石膏 碳酸钙 蔗糖 天平 水桶 大盆 牛皮纸 小线绳 玻璃瓶 橡皮筋 75 酒精消毒瓶 75 酒精消毒棉球瓶 接种针 火柴 记号笔 原种培养基的常用配方 1 玉米粒培养基配方 玉米粒98 石膏1 碳酸钙1 2 棉籽壳培养基配方 棉籽壳88 麸皮10 糖1 碳酸钙1 3 木屑培养基配方 木屑78 麸皮20 糖1 碳酸钙1 三实验内容与方法 1 配方 玉米粒98 石膏1 碳酸1 2 按制种需要量称取玉米粒 石膏粉和碳酸钙 3 将称好的玉米粒倒入盆内 用清水清洗几次 去掉杂质16 24h 至玉米粒充分吸足水分 但不过分膨胀和不开口为宜 4 将泡好的玉米粒放在锅内 加水浸过玉米粒 放在电炉上煮 检查 一直煮到种子内无白心为止 切不可将种皮煮破 5 将煮好的玉米粒捞出控干水 使玉米粒含水量达55 60 三实验内容与方法 6 将控干的玉米粒放在盆内 然后将称好的石膏粉和碳酸钙倒入盆中搅拌均匀 7 装瓶 将拌匀的培养料装入菌种瓶或菌种袋中 装料要均匀 装至瓶肩处或菌种袋的2 3处 8 装好瓶后 将瓶口包一层防潮纸 用线绳将瓶口扎好 准备灭菌 9 灭菌 方法同母种的灭菌方法 灭菌压强一般为0 12 0 14Mpa 灭菌时间为1 5 2 Oh 三实验内容与方法 10 接种 接种间消毒与母种相同 接种时一人手拿母种试管 在酒精灯火焰旁用接种钩 铲 将试管内斜面上菌丝体切成小块 另一人将原种瓶瓶口倾斜在酒精灯火焰旁 将瓶盖掀开一个小缝 这时拿母种试管的人迅速将切好的一小块母种移接到原种瓶内 瓶口用酒精灯烧一下 然后立即把原种瓶口盖严 扎好 一般一管母种接九瓶 袋 左右原种 11 把接种好的原种瓶送到所需温度的培养箱或培养室内培养 12 一接种后应经常检查有无杂菌污染 发现污染瓶 立即挑出 13 生长好的原种菌丝洁白 粗壮 纯净 可用来扩大繁殖栽培种 三 原种质量检查 无论玉米粒原种还是棉籽壳原种 接种后在25 左右培养20 40d 菌种即可长满瓶 品质优良的原种 菌丝洁白 纯净 有食用菌特有的香味 若出现黄 绿 黑等颜色的毛状物或菌瓶内有酸 臭味道 即是污染杂菌 不能使用 应将其灭菌后在远离培养场地处深埋 四 作业 1 如何获得优质的原种 2 制作原种过程中应注意哪些问题 实验四栽培种的制作技术 一 实验目的 通过实验 使同学们掌握栽培种的制作方法和接种技术 二 实验材料 超净工作台 培养室 土式常压灭菌锅 高压灭菌锅 棉籽壳 或玉米芯 木屑 麦麸 或玉米面 米糠 过磷酸钙 石膏 水桶 盘称 搪瓷量杯 聚丙烯塑料袋或菌种瓶 颈圈 棉花 牛皮纸 细线绳 接种勺 或大镊子 接种铲 小镊子 酒精灯 75 消毒酒精瓶 75 消毒酒精棉球瓶 火柴 记号笔 三 实验内容与方法 一 培养基的制作1 配方玉米芯78 麦麸或米糠13 玉米面7 过磷酸钙1 糖1 料 水 1 l3 1 I4 2 拌料根据制种需要按各种营养成分的配比称量各种原料 然后将玉米芯和麦麸玉米面先混合一起 过磷酸钙 蔗糖等混溶在拌料用的水中 搅拌均匀后 泼洒到玉米芯上再搅拌均匀 3 测培养料水分培养料拌好后 用手抓一把培料握在手中 用力捏紧 从手指缝中有水印但无水滴滴下 这时的含水量合适 为62 64 若含水量不足 可再加少量的水 充分搅拌均匀 再检测 直至含水量合适为止 三 实验内容与方法 4 装瓶将拌好的培养料装入玻璃瓶中 边装边压实 一直装到玻璃瓶容积的4 5左右 5 封瓶口将瓶口用防潮纸盖好 用绳扎好 擦净玻璃瓶外面所粘的培养料 二 灭菌 由于栽培种数量大 小型灭菌锅不合适 有条件的单位可以购置大型立式或卧式电热高压蒸汽灭菌锅 此锅容量较大 一次可以消毒17cm 33cm塑料袋90袋左右 灭菌时应按灭菌锅的使用说明进行操作 栽培种由于装量较多且较实 一般要求1 4 1 5Mpa 灭菌1 5 2 0h 三 接种和培养 1 接种接种间消毒与母种相同 菌种袋放入接种室或接种箱内 打开紫外灯消毒30rnin 裁培种的接种方法与原种接种相似 两人合作接种时 一人以无菌操作方法用接种铲或大镊子取一小块原种菌丝 另一人在酒精灯火焰旁打开栽培种袋口 袋口应倾斜在火焰旁 切勿直立 迅速将原种按到袋中 塞上棉塞或盖上无棉盖体的盖子即可 三 接种和培养 2 培养接种完毕 将栽培袋搬到适宜这种食用菌菌丝生长的温度 一般比最适生长温度低2 3 空气相对湿度为60 70 的培养室内培养 四 栽培种质量检查 栽培种在培养过程中 应经常检查 遇有污染袋及时检出处理掉 不得与好的菌种袋放在一起 经30 40d的培养后 菌丝可长满栽培袋 即可供栽培使用 若菌袋内长出原基 说明菌种已老化 若有黄 绿 黑等杂色斑点或连成片时 说明菌种已污染 不可使用 四 作业 1 制作栽培种的技术关键是什 2 综述母种 原种 栽培种在生产上的作用 实验五平菇的栽培方法 一 实验目的 通过平菇棉籽壳袋栽的实验 使同学们掌握平菇的栽培方法和技术 二 实验材料 新鲜无霉变的玉米芯 麦麸 石灰 聚