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文档简介
细菌染色法:染色:细菌细胞小而透明,为便于观察必须增加反差,因此要对细菌进行染色;染色还有助于检测细菌细胞的一些结构和生理特点,可以用于鉴别细菌种类。正染色染料与细胞结合而进行染色的过程;负染色细胞不染色而使背景染色的过程。背景着色,菌体不着色,多用于荚膜的观察。(一)简单染色制备涂片标本染色涂片干燥固定染色1min水洗、吸干镜检(二)抗酸染色法步骤: 涂片固定 酸性复红初染 3%醋酸酒精脱色 美蓝复染 镜检结果: 抗酸菌红色; 非抗酸菌蓝色。(三)革兰氏染色法结果: 阳性菌紫色 阴性菌红色由丹麦医生Hans Christian Gram于1884年创立。C.Gram,1884年创立,是最重要的染色法。革兰氏染色的原理:从上图可知, 甲、乙两种细菌经结晶紫初染后,分别染上了紫色,经碘液媒染,结晶紫与碘液形成了分子量较大的复合物,在乙醇脱色时,凡是染上的紫色容易被脱掉的细胞又成为无色菌体(如乙菌),反之则仍为紫色(如甲菌)。最后再用红色染料沙黄复染,结果甲菌仍然维持最初染上的紫色,而乙菌则被复染而成红色,前者称为革兰氏阳性细菌,简称G+菌,后者则称为革兰氏阴性细菌,简称G-菌。革兰氏染色是细菌分类鉴定的重要指标,通过革兰氏染色,可以将几乎所有细菌分成革兰氏阳性细菌和革兰氏阴性细菌两大类。这两大类细菌在细胞结构、成分、形态、生理、生化、遗传、免疫、生态和药物敏感性等方面都呈现出明显的差异,因此任何细菌只要先通过很简单的革兰氏染色,即可提供不少其他重要的生物学特性方面的信息。染料碱性染料(basic dye)带正电染料。其阳离子部分为发色基团,可与细胞中带负电的组分结合。如Crystal violet, Safranin, Methylene blue等。酸性染料(Acid dye)带负电染料。其阴离子部分为发色基团,可与细胞中带正电的组分结合。如Eosin, Congo red , Acid fuchsin 等。脂溶性染料如Sudan black。 多数染料都是中性有机盐
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