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文档简介

微生物学实验细菌数量的测定 1 细菌数量的测定 实验目的 1 学习微生物数量测定中常用的基本原理2 掌握几种测定细菌数量的方法3 学会使用血细胞计数板进行计数 2 细菌数量的测定 测定方法1显微镜直接计数 计数板计数 载玻片计数 2平板菌落计数3比浊法材料用具菌种 酵母菌仪器 显微镜 血细胞计数板 计数器 无菌吸管 滤纸 盖玻片 3 计数室 计数室 中间大方格 的长和宽各为1mm 深度为0 1mm 其体积为 mm3 合 mL 1mm 0 1 1 10 4 血细胞计数板 希里格式25 16 麦式16 25 载玻片 盖玻片 计数室 正面图 B侧面图 4 计数室 计数室分为25中格 双线边 每一中格又分为16小格 计数室是由 个小格组成 25 16 400 5 细菌数量的测定 操作步骤1菌液稀释2加样将计数板水平放置试验台上 盖上盖玻片于计数室上方 用吸管将菌液吹吸均匀 然后吸取少量菌液 从计数板一侧中间平台与盖玻片接触的边缘处加样 让菌液自行渗入并充满计数室 多余的菌液用滤纸吸去加样一气呵成 不可有气泡产生 不可使盖玻片悬浮 6 细菌数量的测定 3定位计数室现在低倍镜下找到计数板大方格的位置 转换高倍镜后 适当调暗光线至计数室线条清晰为止 7 4计数 A1 A2 A5 A3 A4 选取如图5个中方格 进行计数 当遇上细胞位于分界线上时 按如下规则计数 记上不记下 记左不计右 8 记上不记下 记左不计右 9 计数室细胞数量太多 则菌液需要稀释再计数 每个中方格细胞数量不超过50个为宜 10 细菌数量的测定 计算菌液浓度1ml培养液中酵母菌数量 个 ml 平均每个中格酵母细胞数 25 104 80小格内酵母细胞个数 80 400 104 稀释倍数 稀释倍数 11 细菌数量的测定 6血细胞计数板的清洁血细胞计数板使用后 用自来水冲洗 切勿用硬物洗刷 洗后自行晾干或用吹风机吹干 或用95 的乙醇 无水乙醇 丙酮等有机溶剂脱水使其干燥 干燥后放回计数板盒 注意安全
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