培养基及其制备方法.doc

培养基及其制备方法1、营养肉汤培养基 胨 10g 肉浸液 1000ml 氯化钠 5g 取胨与氯化钠，加入肉浸液内，微温溶解后，调节pH为弱碱性，煮沸，滤清，调节pH值使灭菌后为7.20.2，分装，115灭菌30分钟。 2、营养琼脂培养基 照上述营养肉汤培养基的处方及制法，加入1520g琼脂，调节pH值使灭菌后为7.20.2，分装，115灭菌30分钟。 3、虎红琼脂培养基胨 5g 虎红（四氯四碘荧光素） 0.0133g葡萄糖 10g （或0.133虎红溶液10ml） 磷酸二氢钾(KH2PO4) 1g 琼脂 1520g硫酸镁(MgSO4.7H2O) 0.5g 水 1000ml除葡萄糖、虎红外，取上述成分，混合，加热溶化后，滤过，加入葡萄糖、虎红，分装，115灭菌30分钟。4 、酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基(YPD)胨 10g 琼脂 1520g酵母浸出粉 5g 水 1000ml葡萄糖 20g 除葡萄糖外，取上述成分，混合，加热融化后，滤过，加入葡萄糖，分装，115 灭菌15分钟。5 、胆盐乳糖培养基(BL)胨 20g 牛胆盐 1.3g乳糖 5g （或去氧胆酸钠0.25g）氯化钠 5g 水 100ml磷酸氢二钾(K2HPO4) 4.0g磷酸二氢钾(KH2PO4) 1.3g 除乳糖、牛胆盐外，取上述成分,混合,加热使溶解,调节pH值使灭菌后为7.40.2,煮沸，滤清，加入乳糖、牛胆盐，分装，115灭菌30分钟。6 、曙红美亚甲蓝琼脂培养基(EMB)营养琼脂培养基 100ml 2曙红溶液 2ml20乳糖溶液 5ml 0.5亚甲蓝溶液 1.31.6ml取营养琼脂培养基，加热融化后，冷至60,按无菌操作加入灭菌的其它三种溶液,摇匀，倾注平皿。7 、麦康凯琼脂培养基(MaCC)胨 20g 1中性红溶液 2.5ml乳糖 10g 琼脂 1520g 牛胆盐 5g 水 1000ml氯化钠 5g 除乳糖、1中性红溶液、牛胆盐及琼脂外、取上述成分,混合，加热使溶解，调节pH值使灭菌后为7.20.2，加入琼脂，加热融化后，再加入其余各成分，摇匀，分装，115灭菌30分钟，冷至约60，倾注平皿。 8 、三糖铁琼脂培养基(TSI) 胨 20g 硫酸亚铁 0.2g 牛肉浸出粉 5g 硫代硫酸钠 0.2g 乳糖 10g 0.2酚红溶液 12.5ml 蔗糖 10g 琼脂 1215g 葡萄糖 1g 水 1000ml 氯化钠 5g 除三糖、0.2酚红溶液、琼脂外，取上述成分，混合，加热使溶解,调节pH值使灭菌后为7.30.1，加入琼脂，加热融化后，滤过，再加入其余成分，摇匀，分装,115灭菌30分钟，制成高底层(23cm)短斜面。 9 、四硫磺酸钠亮绿增菌液(TTB) 胨 5g 硫代硫酸钠 30g 牛胆盐 1g 水 1000ml 碳酸钙 10g 取上述成分，混合，微温使溶解，121灭菌20分钟。临用前，取上述培养基，每10ml中加入碘溶液(取碘6g与碘化钾5g，溶于20ml水中)0.2ml和0.1亮绿溶液0.1ml ，混匀。 10 、沙门氏、志贺氏菌属琼脂培养基(SS) 胨 5g 硫代硫酸钠 8.5g 牛肉浸出粉 5g1中性红溶液 2.5ml 乳糖 10g0.1亮绿溶液 0.33ml 牛胆盐 8.5g琼脂 20g 枸橼酚钠 8.5g 水 1000ml 枸橼酸铁铵 1g 除糖、指示剂、琼脂外，取上述成分混合，加热使溶解，调节pH值使灭菌后为7.2 0.1，滤过，加入琼脂，加热融化后，121灭菌20分钟，再加入其余成分，摇匀，冷至约60，倾注平皿。11、十六烷三甲基溴化铵琼脂培养基 胨 10g 牛肉浸出粉 3g 氯化钠 5g 琼脂 1520g 十六烷三甲基溴化铵 0.3g 水 1000ml 除琼脂外，取上述成分混合，微温使溶解，调节pH值使灭菌后为7.50.1，加入琼脂，加热熔化后，分装，121灭菌20分钟，冷至约60，倾注平皿。 12、亚碲酸盐肉汤培养基 临用前，取灭菌的营养肉汤培养基，每100ml中加入新配制的1亚碲酸钠（钾）溶液0.2ml，混匀，即得。 13、卵黄高盐琼脂培养基 胨 6g 10氯化钠卵黄液 100ml 牛肉浸出粉 1.8g 琼脂 23g 氯化钠 30g 水 650ml 除10氯化钠卵黄液外，取上述成分混合，微温使溶解,调节pH值使灭菌后为7.60.1。121灭菌20分钟，待冷至约60，以无菌操作加入10氯化钠卵黄液,充分摇匀,倾注平皿。10氯化钠卵黄液的制备 取新鲜鸡蛋一个，以无菌操作取出卵黄，放入10灭菌氯化钠溶液100ml中，充分振摇，即得。 14、甘露醇高盐琼脂培养基 胨 10g 1酚红溶液 2.5ml 牛肉浸出粉 1g 琼脂 1520g 甘露醇 10g 水 1000ml 氯化钠 75g 除甘露醇、1酚红溶液及琼脂外,取上述成分混合，微温使溶解，调节pH值使灭菌后为7.40.2，加入琼脂，加热融化后，滤过，分装，115灭菌30分钟，冷至约60,倾注平皿。 15、蛋白胨水培养基 胰蛋白胨 10g 水 1000ml 氯化钠 5g 取上述成分混合，加热融化，调节pH值使灭菌后为7.30.1，分装于小试管中,121灭菌20分钟。 16、磷酸盐葡萄糖胨水培养基 胨 7g 葡萄糖 5g 磷酸氢二钾(K2HPO4) 3.8g 水 1000ml 取上述成分混合，微温使溶解，调节pH值使灭菌后为7.30.1，分装于小试管中，121灭菌15分钟。 17、枸橼酸盐培养基 氯化钠 5g 枸橼酸钠（无水） 2g 硫酸镁(MgSO47H2O) 0.2g 溴麝香草酚蓝指示液 20ml 磷酸氢二钾(K2HPO4) 0.8g 琼脂 1520g 磷酸二氢铵(NH4H2PO4) 1g 水 1000ml 除溴麝香草酚蓝和琼脂外，取上述成分，混微温使溶解,调节pH值使灭菌后为6.90.1，加入琼脂，加热融化，加入指示剂混匀。分装于小试管中，121灭菌15分钟，置成斜面。 注：所用琼脂应不含游离糖，用前用水浸泡冲洗。 18、糖、醇发酵培养基 基础液 胨 10g 0.5酸性复红指示剂 10ml 糖、醇 0.5 （或溴麝香草酚蓝指示液6ml ） 氯化钠 5g 水 1000ml 取胨和氯化钠加入水中，微温使溶解，调节pH值使灭菌后为7.4,加入指示剂混匀,分装每瓶100ml，121灭菌15分钟。 配制葡萄糖发酵管时，于100ml基础液中加入0.5g葡萄糖,分装于含杜氏管(Durham)的小试管中。121灭菌15分钟,配制其它糖醇发酵管时,将各种糖醇分别配成10溶液,与基础液同时于121灭菌15分钟。以无菌操作将5ml糖醇溶液加入100ml基础液内,分装于灭菌小试管中。 注：糖醇溶液亦可采用薄膜过滤法除菌。 19、5乳糖发酵管 胨 0.2g 乳糖 5g 氯化钠 0.3g 溴麝香草酚蓝指示液 0.6ml 磷酸氢二钠 0.2g 水 1000ml 除乳糖和指示剂外，取上述成分，混合，微温使溶解，调节pH值使灭菌后为7.4,加入乳糖及指示剂，混匀，分装于含杜氏管的灭菌小试管中，115灭菌15分钟。 20、尿素琼脂培养基 胨 1g 葡萄糖 1g 氯化钠 5g 20尿素溶液 1000ml 磷酸二氢钾(KH2PO4) 2g 琼脂 20g 0.2酚红溶液 6ml 水 1000ml 除尿素和琼脂外，取上述成分，混合，调节pH值使灭菌后为7.20.1，加入琼脂，加热溶化并分装于锥形瓶，121灭菌20分钟。冷至5055,加入经薄膜过滤除菌的尿素溶液，混匀。尿素的最终浓度为2，分装于灭菌试管中，置成斜面。 21、氰化钾培养基 胨 3g 磷酸氢二钠(Na2HPO4) 5.64g 氯化钠 5g 氰化钾试液 磷酸二氢钾(KH2PO4) 0.225g 水 1000ml 除氰化钾试液外，取上述成分，混合,调节pH值使灭菌后为7.50.1，121灭菌20分钟，冷却后，每100ml培养基中加入氰化钾试液1.5ml,分装于12100mm灭菌试管内，每管4ml，立即用灭菌橡皮塞塞紧，置4保存。同时，以不加氰化钾试液的培养基作为对照培养基，分装于灭菌试管中。 22、赖氨酸脱羧酶试验培养基 胨 5g 1.6溴甲酚紫乙醇溶液 1ml 酵母浸出粉 3g L-赖氨酸(DL-赖氨酸) 0.5(1g)/100ml 葡萄糖 1g 水 1000ml 除赖氨酸外，取上述成分，混合，加热溶解后分装，每瓶100ml。加入L-赖氨酸0.5g（DL-赖氨酸1g）调节pH值使灭菌后为6.8,同时以不加赖氨酸培养基作为对照。分装于灭菌的小试管内，每管1ml并滴加一层液体石蜡，121灭菌10分钟。 23、绿脓菌素(pyocyanin)测定用培养基（PDP琼脂） 胨 20g 甘油 10ml 氯化镁（无水） 1.4g 琼脂 1820g 硫酸钾（无水） 10g 水 1000ml 取胨、氯化镁和硫酸钾加入水中，微温使深解。调节pH值使灭菌后为7.30.1，加入甘油及琼脂，加热溶解，121灭菌20分钟，置成斜面。 24、明胶培养基 胨 5g 明胶 120g 牛肉浸出粉 3g 水 1000ml 取上述成分加入水中，浸泡约20分钟，随时搅拌，加热使溶解，调节pH值使灭菌后为7.30.1，分装于小试管中，115灭菌20分钟。 25、硝酸盐胨水培养基 胨 10g 亚硝酸钠 0.5g 酵母浸出粉 3g 水 1000ml 硝酸钾 2g 取胨及酵母浸出粉加入水中，微温使溶解，调节pH值使灭菌后为7.30.1，加入硝酸钾和亚硝酸钠溶解，混匀。分装于含杜氏管的