北京市高考生物专题复习 专题28 克隆技术课件 新人教版.ppt

专题28克隆技术 考点1植物细胞工程1 2016江苏单科 9 2分 下列有关细胞工程的叙述 正确的是 a peg是促细胞融合剂 可直接诱导植物细胞融合b 用原生质体制备人工种子 要防止细胞破裂c 骨髓瘤细胞经免疫处理 可直接获得单克隆抗体d 核移植克隆的动物 其线粒体dna来自供卵母体 五年高考 答案d植物细胞融合前需先用酶解法去掉细胞壁 形成原生质体 再用peg促进原生质体融合 a错误 人工种子是以植物组织培养得到的胚状体 不定芽 顶芽和腋芽等为材料 经过人工薄膜包装得到的种子 不用原生质体为材料 b错误 骨髓瘤细胞需与经免疫过的b淋巴细胞融合 再经筛选培养才能获得单克隆抗体 c错误 动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核取出 移入已经去掉细胞核的卵母细胞中 核移植克隆动物的线粒体dna来自供卵母体 解题关键解答本题的关键是熟知题中所述的知识 植物细胞融合时需要先去掉细胞壁 原生质体与植物细胞的区别在于有无细胞壁 能产生抗体的细胞是浆细胞 而不是骨髓瘤细胞 2 2013重庆理综 5 6分 某兴趣小组拟用组织培养繁殖一种名贵花卉 其技术路线为 取材 消毒 愈伤组织培养 出芽 生根 移栽 下列有关叙述 错误的是 a 消毒的原则是既杀死材料表面的微生物 又减少消毒剂对细胞的伤害b 在愈伤组织培养中加入细胞融合的诱导剂 可获得染色体加倍的细胞c 出芽是细胞再分化的结果 受基因选择性表达的调控d 生根时 培养基通常应含 萘乙酸等生长素类调节剂 答案b本题主要考查植物组织培养的相关知识 在愈伤组织中 因植物细胞含有细胞壁 阻碍了细胞融合 所以此时加入细胞融合的诱导剂 不能获得染色体加倍的细胞 消毒的原则是既杀死材料表面的微生物 又减少消毒剂对细胞的伤害 愈伤组织出芽是细胞分化的结果 而细胞分化的实质是基因的选择性表达 生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂 脱分化和再分化的关键性激素 生根时 培养基通常含有 萘乙酸等生长素类调节剂 故b项错误 3 2013江苏单科 11 2分 某种极具观赏价值的兰科珍稀花卉很难获得成熟种子 为尽快推广种植 可应用多种技术获得大量优质苗 下列技术中不能选用的是 a 利用茎段扦插诱导生根技术快速育苗b 采用花粉粒组织培养获得单倍体苗c 采集幼芽嫁接到合适的其他种类植物体上d 采用幼叶 茎尖等部位的组织进行组织培养 答案b本题考查对获得大量优质苗的多种技术手段的分析 为了使优质苗的生物性状不发生性状分离 可采用茎段扦插诱导生根技术快速育苗 也可采用将幼芽嫁接到合适的其他种类植物体上的方法或用茎尖或幼叶等部位的组织进行植物组织培养获得大量优质苗 花粉粒是减数分裂的产物 利用花粉粒离体培养得到的是单倍体苗 其高度不育 且会发生性状分离 因此b项方案不能选用 答案 11分 1 限制性核酸内切 1分 选择 1分 2 t dna 1分 筛选获得t dna片段的植物细胞 2分 3 细胞分裂素浓度 1分 芽顶端合成的生长素向基部运输 促进根的分化 2分 4 投放棉铃虫 2分 农药 1分 解析本题考查基因工程与植物细胞工程的相关知识 1 同种限制酶切割质粒和含目的基因的dna 可获得相同的黏性末端 以构建基因表达载体 重组质粒含完整的卡那霉素抗性基因 故应使用含卡那霉素的选择培养基筛选含重组质粒的农杆菌 2 实验过程中将棉花细胞与农杆菌混合后共同培养 其目的是利用含重组质粒的农杆菌将t dna导入棉花细胞中 除去农杆菌后在含卡那霉素的培养基上培养 其目的是筛选出含有目的基因的棉花细胞 3 培养基中生长素用量与细胞分裂素用量比值高时 利于根的分化 抑制芽的形成 反之 有利于芽的分化 抑制根的形成 因芽顶端可合成生长素 故接种在无激素的培养基上的芽也能长根 4 可用投放棉铃虫的方法检测抗虫棉的抗虫效果 转基因抗虫棉的种植可减少农药使用量 从而减轻环境污染 5 2013课标 40 15分 0 4841 甲 乙是染色体数目相同的两种二倍体药用植物 甲含有效成分a 乙含有效成分b 某研究小组拟培育同时含有a和b的新型药用植物 回答下列问题 1 为了培育该新型药用植物 可取甲和乙的叶片 先用酶和酶去除细胞壁 获得具有活力的 再用化学诱导剂诱导二者融合 形成的融合细胞进一步培养形成组织 然后经过形成完整的杂种植株 这种培育技术称为 2 上述杂种植株属于多倍体 多倍体是指 假设甲与乙有性杂交的后代是不育的 而上述杂种植株是可育的 造成这种差异的原因是 3 这种杂种植株可通过制作人工种子的方法来大量繁殖 经植物组织培养得到的等材料用人工薄膜包装后可得到人工种子 答案 15分 1 纤维素 1分 果胶 1分 原生质体 2分 愈伤 2分 再分化 或分化 2分 植物体细胞杂交技术 1分 2 体细胞中含有三个或三个以上染色体组的个体 2分 其他合理答案也给分 在减数分裂过程中 前者染色体联会异常 而后者染色体联会正常 3分 其他合理答案也给分 3 胚状体 不定芽 顶芽 腋芽 1分 答对其中一个即给分 解析本题主要考查植物细胞工程的相关知识 1 植物体细胞杂交技术的流程是先用纤维素酶和果胶酶将植物细胞最外层的细胞壁去除 获得具有活力的原生质体 然后将甲 乙植物的原生质体用化学诱导剂诱导融合 形成融合细胞 再将融合细胞诱导脱分化 进一步培养形成愈伤组织 最后经过再分化形成完整的杂种植株 2 在植物体细胞杂交过程中 甲 乙两种植物的二倍体体细胞融合为四倍体细胞 四倍体细胞经组织培养形成四倍体植株 此植物体细胞由于含有三个或三个以上的染色体组 因此属于多倍体 此四倍体由于含有2个甲植物的染色体组和2个乙植物的染色体组 减数分裂时联会正常 可育 而甲 乙有性杂交的后代细胞中含1个甲植物的染色体组和1个乙植物的染色体组 减数分裂时联会紊乱 不可育 3 可将经植物组织培养得到的胚状体 不定芽 顶芽 腋芽等材料用人工薄膜包装后制成人工种子 这种杂种植株可通过制作人工种子的方法来大量繁殖 答案 10分 1 维持渗透压 2 液体悬浮培养 胚状体 3 b 4 经济 轮种 消费者 c 解析 1 混合液中加入甘露醇 可以维持一定的渗透压 保持去壁后的原生质体的正常形态 2 导入目的基因的原生质体经诱导形成愈伤组织后 采用液体悬浮培养获得分散的胚性细胞 胚性细胞可发育成胚状体 进而发育成植株个体 3 愈伤组织细胞继代培养次数过多由于外源植物激素平衡改变而不能分化成胚状体而失去全能性 也有可能发生变异 致使对外源激素敏感性改变 而失去全能性 愈伤组织分化形成胚状体不需要分散成单个细胞 4 构建农业生态工程基地需遵循生态和经济规律 对种植业和养殖业进行优化设计 如种植业中采用套种 间种和轮种等技术 可使农作物为消费者提供更多的食物 另外 为减少环境污染 农业生态工程要求尽量不施用农药 7 2014江苏单科 29 1 3 为了获得植物次生代谢产物 先用植物外植体获得愈伤组织 然后在液体培养基中悬浮培养 请回答下列问题 1 外植体经诱导后形成愈伤组织的过程称为 2 在愈伤组织悬浮培养时 细胞干重 蔗糖浓度和ph的变化如图所示 细胞干重在12d后下降的原因有 培养液中蔗糖的作用是 3 多倍体愈伤组织细胞产生的次生代谢产物量常高于二倍体 二倍体愈伤组织细胞经处理 会产生染色体加倍的细胞 为检测愈伤组织细胞染色体数目 压片前常用纤维素酶和酶解离愈伤组织 若愈伤组织细胞 2n 经诱导处理后 观察到染色体数为8n的细胞 合理的解释是 答案 1 脱分化 2 蔗糖浓度下降 ph降低提供能源调节渗透压 3 秋水仙素 低温 果胶经加倍到4n的细胞处于有丝分裂后期经加倍到8n的细胞处于有丝分裂中期 解析 1 外植体经脱分化可形成愈伤组织 2 分析坐标曲线图 可见培养液中的蔗糖浓度已降至较低 ph也由6降为4 因此使得细胞生命活动受阻 细胞干重减小 培养液中的蔗糖可为培养的细胞提供能源 又可调节培养液的渗透压 3 二倍体愈伤组织经秋水仙素 低温等人工诱导处理 可产生染色体加倍的细胞 植物细胞之间除纤维素外 还存在果胶层 因此可利用纤维素酶和果胶酶解离愈伤组织 愈伤组织细胞 2n 经人工诱导后 细胞中染色体数目加倍成4n 染色体数为4n的细胞进行有丝分裂 处于有丝分裂后期的细胞中含有8n条染色体 若加倍到4n的细胞 经诱导后继续加倍形成染色体数为8n的细胞 这样的细胞再进行有丝分裂 在中期时会看到染色体数为8n的细胞 评析本题主要考查植物组织培养 人工诱导多倍体及固定化技术等相关知识 试题难度中等 理解细胞脱分化 秋水仙素的生理作用等基础知识是解答本题的关键 8 2014广东理综 29 16分 铁皮石斛是我国名贵中药 生物碱是其有效成分之一 应用组织培养技术培养铁皮石斛拟原球茎 简称plbs 类似愈伤组织 生产生物碱的实验流程如下 新生营养芽plbsplbs实验结果在固体培养基上 plbs的重量 生物碱含量随增殖培养时间的变化如图所示 请回答下列问题 1 选用新生营养芽为外植体的原因是 诱导外植体形成plbs的过程称 2 与黑暗条件下相比 plbs在光照条件下生长的优势体现在 3 脱落酸 aba 能提高生物碱含量 但会抑制plbs的生长 若采用液体培养 推测添加适量的aba可提高生物碱产量 同学们拟开展探究实验验证该推测 在设计实验方案时探讨了以下问题 aba的浓度梯度设置和添加方式 设4个aba处理组 1个空白对照组 3次重复 因aba受热易分解 故一定浓度的无菌aba母液应在各组液体培养基后按比例加入 实验进程和取样 实验50天完成 每10天取样 将样品 plbs 称重 g 瓶 后再测定生物碱含量 如初始 第0天 数据已知 实验过程中还需测定的样品数为 依所测定数据确定适宜的aba浓度和培养时间 当某3个样品 重复样 的时 其对应的aba浓度为适宜浓度 对应的培养时间是适宜培养时间 答案 16分 1 细胞分化程度低 容易诱导形成plbs 2分 细胞的脱分化 2分 2 生长起始较快 2分 快速生长时间较长 2分 plbs产量较高 2分 3 灭菌 冷却 2分 75 1分 plbs重量和生物碱含量乘积的平均值最大 3分 解析本题主要考查植物组织培养相关知识 并以植物组织培养实验为背景考查实验探究能力 1 植物组织培养中外植体常选用茎尖 芽尖 原因是茎尖和芽尖分裂能力强 易诱导其脱分化 而且一般不含病毒 2 从图中比较光照和黑暗条件下plbs重量曲线可知 光照条件下plbs生长优势主要体现在开始生长时间 快速生长的时间及达到生长稳定时重量的大小等方面 3 因aba受热易分解 所以必须在培养基灭菌并冷却至常温时才能加入无菌aba 依题干信息可知 本实验有5组 每组3个样品 需分别在第0天 10天 20天 30天 40天 50天测定plbs重量和生物碱含量 而初始数据 第0天 已知 因此还需测定的样品数是5 3 5 75 根据实验探究目的 当3个样品 重复样 的plbs重量和生物碱含量乘积的平均值最大时 其对应的aba浓度为适宜浓度 对应的培养时间为适宜培养时间 9 2013天津理综 9 15分 花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病 野生黑芥具有黑腐病的抗性基因 用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化 并丧失再生能力 再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合 以获得抗黑腐病杂种植株 流程如下图 据图回答下列问题 1 过程 所需的酶是 2 过程 后 在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的存在 这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志 3 原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压 其作用是 原生质体经过再生 进而分裂和脱分化形成愈伤组织 4 若分析再生植株的染色体变异类型 应剪取再生植株和植株的根尖 通过 染色和制片等过程制成装片 然后在显微镜下观察比较染色体的形态和数目 5 采用特异性引物对花椰菜和黑芥基因组dna进行pcr扩增 得到两亲本的差异性条带 可用于杂种植株的鉴定 下图是用该引物对双亲及再生植株1 4进行pcr扩增的结果 据图判断 再生植株1 4中一定是杂种植株的有 6 对杂种植株进行接种实验 可筛选出具有高抗性的杂种植株 答案 15分 1 纤维素酶和果胶酶 2 叶绿体 3 保持原生质体完整性细胞壁 4 双亲 或花椰菜和黑芥 解离漂洗 5 1 2 4 6 黑腐病菌 解析本题考查植物细胞工程 染色体变异的实验鉴定以及高抗性的杂种植株的筛选等相关知识 1 去除细胞壁获得原生质体需要用纤维素酶和果胶酶处理 2 叶肉细胞含有叶绿体 因此通过peg诱导融合的杂种细胞应含有叶绿体 以此作为初步筛选杂种细胞的标志 3 原生质体失去了细胞壁的保护作用 因此原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇 使原生质体处于等渗溶液中 以维持原生质体正常形态 原生质体经过细胞壁再生 进而分裂和脱分化形成愈伤组织 4 要判断染色体变异的类型 应剪取再生植株 花椰菜和黑芥植株的根尖 通过解离 漂洗 染色 制片等过程制成装片 然后进行显微观察比较染色体的形态和数目 5 根据两亲本的差异性条带 可知再生植株1 2和4既有花椰菜的条带 又有黑芥的条带 因此再生植株1 2和4一定为杂种植株 6 要筛选出高抗性的杂种植株 应进行相应的病原体接种实验 即接种黑腐病菌 考点2动物细胞工程1 2015天津理综 6 6分 2015年2月3日 英国议会下院通过一项历史性法案 允许以医学手段培育 三亲婴儿 三亲婴儿的培育过程可选用如下技术路线 据图分析 下列叙述错误的是 a 该技术可避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代b 捐献者携带的红绿色盲基因不能遗传给三亲婴儿c 三亲婴儿的染色体全部来自母亲提供的细胞核d 三亲婴儿的培育还需要早期胚胎培养和胚胎移植等技术 答案c分析图示可知 母亲只提供细胞核 因而可避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代 a正确 红绿色盲基因属于核基因 而捐献者提供的是去核卵母细胞 其红绿色盲基因不能遗传给三亲婴儿 b正确 三亲婴儿的染色体一半来自母亲提供的细胞核 一半来自精子 c错误 体外受精形成的受精卵需培养形成早期胚胎 而后经胚胎移植进入受体子宫内 d正确 评析本题以三亲婴儿的培育过程为信息载体 考查了学生的理解能力和对知识的应用能力 试题难度中等 疑难突破真核生物的有性生殖过程 遗传物质大部分来母方 小部分来自父方 染色体一半来自母方 一半来自父方 2 2014北京理综 5 6分 在25 的实验条件下可顺利完成的是 a 光合色素的提取与分离b 用斐林 本尼迪特 试剂鉴定还原糖c 大鼠神经细胞的培养d 制备用于植物组织培养的固体培养基 答案a用斐林 本尼迪特 试剂鉴定还原糖时需50 65 水浴加热 b错误 大鼠神经细胞的培养 需要保持在大鼠的正常体温37 39 c错误 制备用于植物组织培养的固体培养基需高温灭菌 d错误 光合色素的提取与分离在室温下即可完成 a正确 3 2014浙江理综 3 6分 下列关于动物细胞培养的叙述 正确的是 a 连续细胞系的细胞大多具有二倍体核型b 某些癌细胞在合适条件下能逆转为正常细胞c 由多个祖细胞培养形成的细胞群为一个克隆d 未经克隆化培养的细胞系细胞具有相同的性状 答案b连续细胞系是发生转化了的细胞系 大多数具有异倍体核型 a错误 癌细胞在合适条件下可以发生不定向的基因突变而逆转为正常细胞 b正确 由一个单细胞培养形成的细胞群为一个克隆 c错误 未经克隆化培养的细胞系具有异质性 d错误 4 2013重庆理综 2 6分 题图是单克隆抗体制备流程的简明示意图 下列有关叙述 正确的是 a 是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应t淋巴细胞b 中使用胰蛋白酶有利于杂交瘤细胞的形成c 同时具有脾脏细胞和鼠骨髓瘤细胞的特性d 是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群 答案d本题主要考查单克隆抗体制备的相关知识 是从已免疫的小鼠脾脏中获得的浆细胞 中使用聚乙二醇或灭活的病毒等 有利于杂交瘤细胞的形成 同时具有浆细胞和骨髓瘤细胞的特性 是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群 故d项正确 5 2017课标全国 38 15分 编码蛋白甲的dna序列 序列甲 由a b c d e五个片段组成 编码蛋白乙和丙的序列由序列甲的部分片段组成 如图1所示 回答下列问题 1 现要通过基因工程的方法获得蛋白乙 若在启动子的下游直接接上编码蛋白乙的dna序列 ttcgcttct caggaagga 则所构建的表达载体转入宿主细胞后不能翻译出蛋白乙 原因是 2 某同学在用pcr技术获取dna片段b或d的过程中 在pcr反应体系中加入了dna聚合酶 引物等 还加入了序列甲作为 加入了作为合成dna的原料 3 现通过基因工程方法获得了甲 乙 丙三种蛋白 要鉴定这三种蛋白是否具有刺激t淋巴细胞增殖的作用 某同学做了如下实验 将一定量的含t淋巴细胞的培养液平均分成四组 其中三组分别加入等量的蛋白甲 乙 丙 另一组作为对照 培养并定期检测t淋巴细胞浓度 结果如图2 由图2可知 当细胞浓度达到a时 添加蛋白乙的培养液中t淋巴细胞浓度不再增加 此时若要使t淋巴细胞继续增殖 可采用的方法是 细胞培养过程中 培养箱中通常要维持一定的co2浓度 co2的作用是 仅根据图1 图2可知 上述甲 乙 丙三种蛋白中 若缺少 填 a b c d 或 e 片段所编码的肽段 则会降低其刺激t淋巴细胞增殖的效果 答案 1 编码乙的dna序列起始端无atg 转录出的mrna无起始密码子 2 模板dntp 3 进行细胞传代培养维持培养液的ph c 解析本题主要考查基因工程技术和动物细胞培养技术的原理 1 分析编码蛋白乙的dna序列可知 起始端无atg 转录出的mrna不含起始密码子 所以直接利用该dna片段构建的表达载体在宿主细胞中不能翻译出蛋白乙 2 进行pcr扩增时 需要在反应体系中加入热稳定dna聚合酶 引物 模板dna 原料dntp dctp datp dgtp dttp 等 3 因为动物细胞培养具有细胞贴壁和接触抑制的现象 当细胞浓度达到a时 若要使t淋巴细胞继续增殖 则需分瓶进行细胞传代培养 在培养箱中培养细胞时需提供一定的气体环境 其中co2的作用是维持培养液的ph 由图2可知 加入蛋白丙刺激t淋巴细胞增殖的效果明显比蛋白甲 乙低 结合图1中蛋白丙与蛋白甲 乙的dna序列可知 缺少c片段所编码的肽段 会降低蛋白刺激t淋巴细胞增殖的效果 知识拓展认识dntpdntp是脱氧核糖核苷三磷酸的缩写 是dctp datp dgtp dttp的统称 d 代表脱氧 n 代表变量a t c g中的一种 dntp可作为生物dna合成以及pcr过程的原料 6 2016课标全国 40 15分 下图表示通过核移植等技术获得某种克隆哺乳动物 二倍体 的流程 回答下列问题 1 图中a表示正常细胞核 染色体数为2n 则其性染色体的组成可为 过程 表示去除细胞核 该过程一般要在卵母细胞培养至适当时期再进行 去核时常采用的方法 代表的过程是 2 经过多次传代后 供体细胞中的稳定性会降低 因此 选材时必须关注传代次数 3 若获得的克隆动物与供体动物性状不完全相同 从遗传物质的角度分析其原因是 4 与克隆羊 多莉 利 培育成功一样 其他克隆动物的成功获得也证明了 答案 15分 1 xx或xy显微操作胚胎移植 2 遗传物质 3 卵母细胞的细胞质中的遗传物质会对克隆动物的性状产生影响 4 动物已分化体细胞的细胞核具有全能性 解析 1 因供体的性别不确定 故其细胞核内的性染色体组成为xx或xy 一般将卵母细胞培养到m 中期 用显微操作法将其细胞核去除 代表的过程是胚胎移植 2 传代培养10代以内的细胞可以保持正常的二倍体核型 超过10代以后 供体细胞中遗传物质的稳定性会降低 3 克隆动物细胞质中的遗传物质来自卵母细胞的细胞质 细胞质中的遗传物质对克隆动物的性状会产生影响 4 克隆动物的成功可以证明动物已分化的体细胞的细胞核具有全能性 以下为教师用书专用 7 2013浙江理综 6 6分 实验小鼠皮肤细胞培养 非克隆培养 的基本过程如图所示 下列叙述错误的是 实验小鼠皮肤组织皮肤细胞培养细胞1培养细胞2a 甲过程需要对实验小鼠进行消毒b 乙过程对皮肤组织可用胰蛋白酶消化c 丙过程得到的细胞大多具有异倍体核型d 丁过程得到的细胞具有异质性答案c本题主要考查了动物细胞培养的相关知识 取小鼠皮肤组织进行培养时需对实验小鼠进行消毒 通过胰蛋白酶消化皮肤组织可获得皮肤细胞 丙过程为最初的传代培养 得到的细胞大多具有正常二倍体核型 来源于多个细胞的非克隆培养所得到的细胞系具有异质性 该实验小鼠皮肤细胞属于非克隆培养 丁过程得到的细胞具有异质性 8 2015安徽理综 31 9分 科研人员采用转基因体细胞克隆技术获得转基因绵羊 以便通过乳腺生物反应器生产人凝血因子ix医用蛋白 其技术路线如图 1 由过程 获得的a为 2 在核移植之前 必须先去掉受体卵母细胞的核 目的是 受体应选用期卵母细胞 3 进行胚胎移植时 代孕母羊对移入子宫的重组胚胎基本上不发生 这为重组胚胎在代孕母羊体内的存活提供了可能 4 采用胎儿成纤维细胞进行转基因体细胞克隆 理论上可获得无限个转基因绵羊 这是因为 答案 1 含目的基因的表达载体 2 保证核遗传物质来自含目的基因的成纤维细胞m 3 免疫排斥反应 4 整合有目的基因的成纤维细胞可进行传代培养 解析 1 在基因工程中 构建基因表达载体后才能将目的基因导入受体细胞 2 核移植技术选用的成熟卵母细胞处于减数第二次分裂中期 m 中期 需去掉细胞核以保证得到的克隆动物的核遗传物质来自于含目的基因的成纤维细胞 3 胚胎移植时受体动物对移入的胚胎基本不发生免疫排斥反应 这为胚胎的存活提供了可能 4 由于整合有目的基因的胎儿成纤维细胞具有增殖能力 可进行传代培养 所以理论上可利用动物细胞培养技术和核移植技术 获得无限个转基因绵羊 9 2014课标 40 15分 0 4871 某研究者用抗原 a 分别免疫3只同种小鼠 x y和z 每只小鼠免疫5次 每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价 能检测出抗原抗体反应的血清最大稀释倍数 结果如下图所示 若要制备杂交瘤细胞 需取免疫后小鼠的b淋巴细胞 染色体数目40条 并将该细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞 染色体数目60条 按一定比例加入试管中 再加入聚乙二醇诱导细胞融合 经筛选培养及抗体检测 得到不断分泌抗a抗体的杂交瘤细胞 回答下列问题 1 制备融合所需的b淋巴细胞时 所用免疫小鼠的血清抗体效价需达到16000以上 则小鼠最少需要经过次免疫后才能有符合要求的 达到要求后的x y z这3只免疫小鼠中 最适合用于制备b淋巴细胞的是小鼠 理由是 2 细胞融合实验完成后 融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外 可能还有 体系中出现多种类型细胞的原因是 3 杂交瘤细胞中有个细胞核 染色体数目最多是条 4 未融合的b淋巴细胞经多次传代培养后都不能存活 原因是 答案 1 4yy小鼠的血清抗体效价最高 2 b淋巴细胞相互融合形成的细胞 骨髓瘤细胞相互融合形成的细胞细胞融合是随机的 且融合率达不到100 3 1100 4 不能无限增殖 解析 1 分析题图可知 经4次免疫后 小鼠y的血清抗体效价就可达到16000以上 由于4次免疫后的y小鼠的血清抗体效价最高 故最适合用于制备b淋巴细胞 2 细胞融合实验中 由于细胞融合是随机的 而且诱导融合率不可能达到100 所以会有未融合的b淋巴细胞和骨髓瘤细胞 融合的具有同种核的细胞和杂交瘤细胞三种类型 3 杂交瘤细胞同时具有b淋巴细胞和骨髓瘤细胞的核物质 但细胞核只有一个 由于杂交瘤细胞在分裂过程中染色体会丢失 故细胞核中染色体数目最多是40 60 100 条 4 b淋巴细胞已经分化 没有无限增殖的潜能 评析本题考查单克隆抗体制备的相关知识 难度较大 理解细胞融合的原理与操作过程是解题关键 答案c根据b淋巴细胞分泌特异性抗体和骨髓瘤细胞能无限增殖的特性 利用融合筛选出的杂交瘤细胞 来制备单克隆抗体 a正确 阿霉素可抑制dna和rna的合成 即抑制细胞中的dna复制和转录过程 b正确 据图可知 要先注射生物导弹 生物导弹可使非活化磷酸阿霉素 转化成活化的阿霉素 能更好地杀死肿瘤细胞 c错误 单克隆抗体能将阿霉素定向带到肿瘤细胞所在的位置 能减轻阿霉素对正常细胞的伤害 d正确 解题关键准确获取图中信息是解题关键 2 2017北京丰台期末 19 如图为植物体细胞杂交及组织培养过程示意图 下列说法不正确的是 a 过程 分别需要用胰蛋白酶和聚乙二醇进行处理b 高尔基体在过程 发挥了重要作用c 过程 需要更换培养基 才能进一步分化为植株d a b的基因型分别为rr yy 则杂种植株的基因型为rryy 答案a过程 分别需要用纤维素酶 果胶酶和聚乙二醇进行处理 高尔基体在过程 再生细胞壁中发挥了重要作用 过程 需要更换培养基 调整细胞分裂素和生长素的比例后 才能进一步分化为植株 植物体细胞杂交后形成的杂种植株的基因型即为杂交前植株基因型的组合 易错警示胰蛋白酶用于动物细胞培养过程中组织细胞的离散处理 3 2016北京海淀期末 30 下列与细胞工程技术相关的表述中 不正确的是 a 植物组织培养技术的理论基础是细胞的全能性b 植物体细胞杂交技术可以克服远缘杂交不亲和的障碍c 动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同d 动物细胞培养与植物组织培养所用的培养基成分基本相同 答案d动物细胞培养基特有的成分有葡萄糖 动物血清或血浆 抗生素等 植物组织培养所用培养基特有的成分有蔗糖 生长素和细胞分裂素 琼脂等 d错误 动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理都是细胞膜具有一定的流动性 c正确 4 2016北京丰台期末 49 下列属于克隆的过程是 将目的基因与载体结合并在受体细胞中进行扩增 由一个精原细胞经过减数分裂形成四个精子 通过植物组织培养将离体细胞培养成完整植株 固体培养基上的一个细菌繁殖形成一个菌落 由一个受精卵细胞形成一个多细胞个体a b c d 答案d克隆意为复制 中扩增重组dna属于分子水平的克隆 产生遗传信息相同的dna 属于植物个体的克隆 通过组织培养产生遗传物质相同的子代 属于微生物个体或细胞水平的克隆 单菌落中的细菌遗传物质均相同 为减数分裂产生精子的过程 基因可能发生分离和重组 精子中遗传物质和精原细胞不同 一个受精卵形成多细胞个体属于生长发育 d正确 5 2016北京西城期末 18 下图是科学家利用供体生物dna中的无限增殖调控基因 制备单克隆抗体的过程 下列相关叙述不正确的是 a 经限制酶处理后的目的基因与载体的黏性末端相同b 是经特定抗原免疫过的b淋巴细胞c 此种制备单克隆抗体的方法涉及转基因及动物细胞融合技术d 经检测和筛选后的 既能无限增殖又可分泌单克隆抗体 答案c据图分析 该过程包括转基因技术和动物细胞培养技术 不包括动物细胞融合 c错误 经同种限制酶处理后目的基因与载体露出相同的黏性末端 a正确 受体细胞 导入无限增殖调控基因可以制备单克隆抗体 说明该细胞能分泌抗体 为效应b细胞 b正确 由于 为导入了无限增殖调控基因的b淋巴细胞 因此其既能够产生特异性抗体 又能无限增殖 d正确 6 2016北京东城期末 28 用动物细胞工程技术获取单克隆抗体 下列实验步骤中不正确的是 a 将特定的抗原蛋白注入小鼠体内 获得能产生抗体的b淋巴细胞b 在融合前需要用纤维素酶分别处理b淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞c 用聚乙二醇 peg 作诱导剂 使能产生抗体的b淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合d 筛选杂交瘤细胞 并从中选出能产生所需抗体的细胞群 培养后提取单克隆抗体 答案b纤维素酶可用于植物体细胞杂交时去除细胞壁 b错误 7 2016北京丰台期末 50 对某种动物的肝肿瘤细胞进行动物细胞培养 下列说法不正确的是 a 在利用肝肿瘤组织块制备细胞悬液时 可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理b 细胞培养应在含5 co2的恒温培养箱中进行 co2的作用是抑制细胞呼吸c 为了防止细胞培养过程中细菌的污染 可向培养液中加入适量的抗生素d 在合成培养基中 通常需加入血清 血浆等天然成分 答案b动物细胞培养应在含5 co2的恒温培养箱中进行 co2的作用是维持培养液的ph b错误 8 2016北京东城期末 29 下列关于动物细胞培养的叙述 不正确的是 a 动物细胞培养依据的原理是细胞全能性b 传代培养时需要用胰蛋白酶处理贴壁生长的细胞c 用于培养的细胞大都取自胚胎或幼龄动物的器官或组织d 动物细胞培养时需定期更换培养液以清除代谢废物 答案a细胞的全能性是指已分化的细胞仍具有发育成完整个体的潜能 动物细胞培养是指从动物机体中取出相关组织 分散成单个细胞 然后放在适宜的培养基中 让这些细胞生长和增殖 故依据的原理是细胞增殖 a错误 b组2015 2017年高考模拟 综合题组时间 50分钟分值 70分一 选择题 每题6分 共48分 1 2017北京顺义期末 29 下列有关生物工程技术的叙述 正确的是 a dna连接酶的作用部位是dna分子中碱基之间的氢键b 去除植物细胞壁 将动物组织分散成单个细胞均需酶处理c 基因工程经常以抗菌素抗性基因作为目的基因d 植物细胞原生质体融合体现细胞膜有选择透过性 答案b去除植物细胞壁需要纤维素酶和果胶酶 将动物组织分散成单个细胞需要胰蛋白酶或胶原蛋白酶 深度解析dna连接酶的作用部位是两个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键 基因工程经常以抗菌素抗性基因作为标记基因 植物细胞原生质体融合体现了细胞膜具有流动性 2 2017北京东城期末 30 下图为培育甘蔗脱毒苗的两条途径 研究发现经 过程获得的幼苗脱毒效果更好 下列叙述不正确的是 a 带叶原基的芽与植物体其他组织中的病毒含量相同b 过程的作用是使组织中的病毒在图中处理温度下部分或全部失活c 过程 所用培养基中生长素和细胞分裂素的含量和比例不同d 上图中脱毒苗的培育过程体现了植物细胞的全能性 答案a根据题目分析可知 本题是采用植物组织培养技术 利用植物细胞的全能性 培育甘蔗脱毒苗 d正确 和 为再分化过程 诱导生芽和诱导生根的培养基中生长素和细胞分裂素的含量和比例不同 c正确 温度处理 可以使组织中的病毒部分或全部失活 b正确 带叶原基的芽与植物体其他组织中的病毒含量不同 a错误 易错警示植物组织培养中生长素和细胞分裂素的使用顺序和不同配比会影响组织分化的方向 3 2017北京顺义期末 28 下列现代生物技术实践中不需进行植物组织培养的是 a 通过单倍体育种培育矮秆抗病的水稻品种b 通过植物体细胞杂交方法培育白菜 甘蓝c 通过诱变育种的方法培育高产大豆d 通过转入bt基因的方法培育抗虫棉 答案c诱变育种是指利用物理因素或化学因素诱发生物发生基因突变 植物育种中一般作用于处理萌发的种子或幼苗 不需要再进行植物组织培养 解后反思要判断哪些生物技术实践需要植物组织培养 其实可以从植物组织培养的操作对象入手 一般是特定的植物细胞或离体的组织器官才需要在人工条件下实现其细胞的全能性 a b d三种技术中很明显必须进行植物组织培养才能最终培育成完整植株 4 2016北京海淀一模 5 在应用植物体细胞杂交技术获得白菜 甘蓝的操作步骤中 不正确的是 a 用盐酸和酒精的混合液解离以获得原生质体b 用聚乙二醇诱导白菜和甘蓝的原生质体融合c 用植物组织培养技术把杂种细胞培养成植株d 经筛选获得符合要求的白菜 甘蓝杂种植株 答案a在植物体细胞杂交过程中 需要用纤维素酶和果胶酶去壁以获得原生质体 用盐酸和酒精的混合液解离细胞会导致细胞死亡 可用于观察洋葱根尖有丝分裂实验 a错误 5 2016北京延庆一模 5 在培育 白菜 甘蓝 的常规操作过程中 不需要的是 a 在严格的无菌环境下进行操作b 用酶解法在高渗溶液中对细胞进行去壁处理c 借助标记基因筛选融合成功的原生质体d 适当调整 以利于愈伤组织再分化 答案c培育 白菜 甘蓝 需要运用植物体细胞杂交技术 c项所述操作不需要 用酶解法在高渗溶液中对细胞进行去壁处理可保证原生质体不会因为吸水涨破 组织培养过程中 调节细胞分裂素和生长素的比例可改变愈伤组织的分化方向 6 2015北京东城综合测试 29 下列关于现代生物技术的叙述中不正确的是 a 植物细胞去除细胞壁获得的原生质体仍然具有全能性b 动物细胞培养过程中需用胰蛋白酶处理获取单个细胞c 需使用特定的选择培养基筛选杂交瘤细胞d dna连接酶将dna分子碱基对之间的氢键连接起来 答案d植物细胞的细胞壁为细胞的非生命部分 对细胞全能性无影响 动物细胞培养前需用胰蛋白酶水解细胞间的蛋白质成分 使细胞离散开 避免出现接触抑制现象而影响细胞增殖 因瘤细胞与免疫后的b淋巴细胞经诱导融合处理后 得到不同种类的融合细胞和未融合细胞 故需用特定的选择培养基筛选杂交瘤细胞 dna连接酶作用的部位是不同脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键 7 2015北京石景山一模 5 下表是不同筛选的方法或结果 完全正确的一组是 答案ba选项应用不同浓度的nacl液处理相同品种杨树幼苗 净光合效率最大的为耐盐品种 基因工程中用作载体的质粒应含有某种抗生素抗性基因或其他的标记基因 应用抗原 抗体特异性杂交的特点 筛选产生特定抗体的杂交瘤细胞 8 2015北京东城综合测试 27 将特定药物与单克隆抗体相结合制成的 生物导弹 能够用于杀死人类的某些癌细胞 其过程如下图所示 下列相关叙述不正确的是 a 过程的原理和植物原生质体融合的原理基本相同b 经 形成的杂交瘤细胞能无限增殖并产生单一抗体c 过程需要筛选并克隆单个杂交瘤细胞d 抗体的靶向作用使 过程具有高度特异性 答案b 过程的原理和植物原生质体融合的原理均为细胞膜的流动性 经过 形成的杂交瘤细胞能无限增殖 因不同的脾细胞 脾中含淋巴细胞 分泌的抗体不一定相同 形成的杂交瘤细胞种类较多 分泌的也不是单一的抗体 过程需要筛选并克隆单个杂交瘤细胞 生物导弹是抗癌药物与单抗连接 抗体具有与抗原特异性结合的特点 使 过程具有高度特异性 9 2017北京朝阳二模 31 金黄色葡萄球菌可引起皮肤伤口感染 败血症等疾病 有研究发现机体自身可产生免疫活性物质il 33抵御金黄色葡萄球菌感染 科研人员对il 33作用机制进行了研究 12分 1 皮肤感染金黄色葡萄球菌后 皮肤角质形成细胞分泌il 33抵御感染属于免疫 2 科研人员用金黄色葡萄球菌感染小鼠 观察小鼠背部皮肤溃烂情况和皮肤角质形成细胞中il 33的表达情况 结果如图1 二 非选择题 共22分 由图可知 感染后第天皮肤溃烂面积最大 皮肤溃烂面积变化与il 33表达量变化趋势 3 已有研究证实 角质形成细胞通过表达reg3a抵御病菌 为了检测reg3a的免疫功能 科研人员将等量的金黄色葡萄球菌分别与不同浓度的reg3a混合 采用法 统计3小时后金黄色葡萄球菌活菌的数量 结果如图2 结果表明随着浓度的增加 reg3a抑菌效果 4 科研人员为了研究reg3a和il 33的关系 利用技术培养角质形成细胞并检测细胞中reg3a及il 33表达量 结果如图3 图3 综合上述结果 推测小鼠机体抵御金黄色葡萄球菌感染的调控机制如图4 请填写相关内容 答案 1 非特异性 2 3一致 3 稀释涂布平板逐渐增强 4 动物细胞培养 il 33 reg3a 促进 抑制 解析 1 非特异性免疫是人类在长期的进化过程中建立起来的天然的防御屏障 是生来就有的 不针对特定的病原体 它包括两道防线 第一道防线是指皮肤黏膜的阻挡作用 黏膜上的纤毛的清扫作用以及皮肤分泌物的杀菌作用 第二道防线是指吞噬