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迈克试剂标准操作程序（SOP）迈克试剂标准操作程序(SOP) 试剂项目： 肌酐肌氨酸氧化酶法检测试剂盒Creatinine(Crea) Assay Reagent Kit by SAO Method 适用于： 日立7060型全自动生化分析仪四川省迈克科技有限责任公司 Sichuan MAKER Science Technology CO.,Ltd 四川省迈克科技有限责任公司编制试剂项目： 肌酐肌氨酸氧化酶法检测试剂盒Creatinine（Crea） Assay Reagent Kit by SAO Method适用于： 日立系列自动生化分析仪目 录1.临床意义1.1医学决定水平2.检测原理3.样品准备3.1样品3.2样品稳定性4试剂盒4.1试剂盒组成4.2试剂准备4.3试剂稳定性4.4 试剂盒订货指南5.操作步骤5.1检测参数设置5.2校准5.2.1校准物5.2.2校准物准备5.2.3校准物稳定性5.2.4校准间隔5.2.5校准物溯源性5.2.6校准物订货指南5.3质控5.3.1质控物 5.3.2可接受性判定5.3.3质控物订货指南6.交叉污染7方法学特性7.1线性范围7.2精密度7.3灵敏度7.4抗干扰能力7.5抗凝剂的影响8.方法的可溯源性9.参考值范围10安全性和注意事项11技术服务12主要参考文献试剂项目： 肌酐肌氨酸氧化酶法检测试剂盒Creatinine（Crea） Assay Reagent Kit by SAO Method适用于： 日立系列自动生化分析仪1临床意义血清肌酐含量可以在一定程度上准确反映肾小球滤过功能的损害程度。血清肌酐检测主要见于：急性肾小球肾炎、慢性肾小球肾炎（失代偿期）、急性或慢性肾功能不全、肢端肥大症、巨人症、肌肉萎缩性疾病。1.1医学决定水平 38 mol/L 对于婴幼儿，必须考虑有肾功能不全，应作进一步的肾功能检查。117mol/L 等于或高于此值应进一步作肌酐清除试验等其他肾功能检查。388mol/L 高于此值说明患者有严重的肾功能损害，必须采取适当的治疗措施。2检测原理肌酐H2O肌酸肌酸H20O2肌氨酸尿酸肌氨酸H20O2甘氨酸HCHOH2O2 2H2O24-AAEMSE醌亚胺4H20 血清样本与R1试剂混合后用活性剂澄清脂血浊度，并测定样本空白；用工具酶去除内源肌酸；抗坏血酸氧化酶消除维生素C干扰。加入R2试剂启动反应：灭活R1试剂中的过氧化氢酶，通过优化显色系统（Trinders底物）和优化活性剂去除胆红素的干扰，足量的高纯度工具酶保证反应彻底进行及反应曲线稳定。3样品准备3.1样品本试剂盒用于体外检测血清或血浆、尿液中肌酐(Crea)含量。样品为空腹血清或血浆（0.1mg肝素可抗凝1.0ml血液）、尿液。样品应在低温条件下运输保存。3.2样品稳定性血清或血浆样品中肌酐(Crea)室温可稳定8小时，在28可稳定2天，冰冻保存可稳定1个月。尿液样品中肌酐(Crea)室温可稳定2小时，在28可稳定4天。4. 试剂盒4.1试剂组成：R1：检测试剂1Goods 100mmol/L 肌酸酶 200KU/L抗坏血酸氧化酶 10KU/L肌氨酸氧化酶 50KU/L过氧化氢酶 200 KU/LEMSE 0.8 mmol/LR2：检测试剂2肌酐酶 600KU/L过氧化物酶 200 KU/L 4-氨基氨替比林 5.0mmol/LCal.：肌酐校准液 300.0mol/L4.2试剂准备：即用型液体双试剂,开瓶装载即可使用，用后应及时冷藏保存。4.3试剂稳定性：试剂密闭避光贮存可稳定12个月，开瓶上机稳定30天。4.4试剂盒订货指南货号产品编码规格包装瓶型AB03G7010102003717R1 60ml3 R2 60ml17170瓶型AB03G6010102003706R1 90ml2 R2 60ml17060瓶型AB03H9010102003702R1 50ml3 R2 50ml17020瓶型AB03B0010102003120R1 45ml2 R2 15ml2通用瓶型试剂项目： 肌酐肌氨酸氧化酶法检测试剂盒Creatinine（Crea） Assay Reagent Kit by SAO Method适用于： 日立系列自动生化分析仪5.操作步骤5.1 标准检测参数设定： 5.1.1 日立7060分析仪检测参数TestCrea & Test NameCreaUnitmol/L Data ModeOn BoardReport NameCreaControl Interval 1000 Instrument Factor (Y=aX+b)a b Expected Value Expected Value Age(M)(F) 100 Y36.0-97.017.7-80.0-999999-999999 100 Y36.0-97.017.7-80.036.0-97.017.7-80.0Technical Limit 0.0-8840.0 0.0-8840.0STDConc.Pos.SamplePre.Dil.Calib.Lot No.QualitativeNo (1) 0.0 W 5 0 0999000001 000000(1) 0 (2)300.0 # 5 0 0 # 000002 000000(2) 0 (3) 010 0 0000000000(3) 0 (4) 010 0 0000000000(4) 0 (5) 010 0 0000000000(5) 0 (6) 010 0 0000000000(6) 0 TestCreaAssay Code2Point End 10 Wavelength (2nd/Primary)700/546Assay Point 16 - 31- 0- 0Diluent W S.Vol.(Normal) 5 0 0 2 5 198S.Vol.(Decrease) 3 0 0 2 3 198S.Vol.(Increase) 10 0 0 4 5 196ABS. Limit 25000 IncreaseProzone Limit UpperReagentT1225 0 & T2 0 0 T3 75 0 & T4 0 0 Calibration TypeLinear 2 2 0 Auto Time OutBlank 0SD Limit 999.9Span 0Duplicate Limit 1502 Point 720Sensitivity Limit 0Full 0S1 ABS Limit -1000 2000Compensated Limit 注：“&”表示用户自定义通道号； “#”表示用户自定义校准液位置号试剂项目： 肌酐肌氨酸氧化酶法检测试剂盒Creatinine（Crea） Assay Reagent Kit by SAO Method适用于： 日立系列自动生化分析仪5.1.2 日立7170分析仪检测参数5.1.2.1 7170屏幕界面1试剂项目： 肌酐肌氨酸氧化酶法检测试剂盒Creatinine（Crea） Assay Reagent Kit by SAO Method适用于： 日立系列自动生化分析仪5.1.2.2 7170屏幕界面2试剂项目： 肌酐肌氨酸氧化酶法检测试剂盒Creatinine（Crea） Assay Reagent Kit by SAO Method适用于： 日立系列自动生化分析仪5.1.2.3 7170屏幕界面3试剂项目： 肌酐肌氨酸氧化酶法检测试剂盒Creatinine（Crea） Assay Reagent Kit by SAO Method适用于： 日立系列自动生化分析仪5.1.2.4 7170屏幕界面4注：“&”表示用户自定义通道号；“#”表示用户自定义校准液位置号试剂项目： 肌酐肌氨酸氧化酶法检测试剂盒Creatinine（Crea） Assay Reagent Kit by SAO Method适用于： 日立系列自动生化分析仪5.1.3 日立7020分析仪检测参数5.1.3.1 7020屏幕界面仪器菜单界面项目名称NO.界面项目Crea1Test Name Crea 2Assay Code (Mthd)2Point End 3Assay Code (Test) 0 4Raction Time 10 5Assay Point 1 17 6Assay Point 2 34 7Assay Point 3 0 8Assay Point 4 0 9Wave Leng (SUB) 700 10Wave Leng (MAIN) 546 11Sample Volume 5.0 12R1 Volume 225 13R1 POS & 14R1 Bottle Size 大 15R2 Volume 16R2 POS 17R2 Bottle Size 18R3 Volume 75 19R3 POS & 20R3 Bottle Size 大 21Calib. Type 线性 22Calib. Type (Wght) 0 23Calib. Conc.1 0.0 24Calib. Pos. 1 99 25Calib. Conc.2300.0 26Calib. Pos. 2 # 27Calib. Conc.3 28Calib. Pos. 3 29Calib. Conc.4 30Calib. Pos. 4 31Calib. Conc.5 32Calib. Pos. 5 33Calib. Conc.6 34Calib. Pos. 6 35S1ABS 36K Factor 37K2 Factor 38K3 Factor 试剂项目： 肌酐肌氨酸氧化酶法检测试剂盒Creatinine（Crea） Assay Reagent Kit by SAO Method适用于： 日立系列自动生化分析仪 续上表39K4 Factor 40K5 Factor 41A Factor 42B Factor 43C Factor 44SD Limit 999.9 45Duplicate Limit 150 46Sens Limit 0 47SIABS Limit (L)-1000 48SIABS Limit (H) 2000 49ABS. Limit 25000 50ABS. Limit (D/I) 增加 51Prz. Limit 52Prz. Limit(U/D) 53Prz.(End Point) 54Expect Value (L) 17.7 55Expect Value (H) 97.0 56Instr.Fact (a) 57Instr.Fact (b) 58Key setting 注：“&”表示用户自定义通道号； “#”表示用户自定义校准液位置号试剂项目： 肌酐肌氨酸氧化酶法检测试剂盒Creatinine（Crea） Assay Reagent Kit by SAO Method适用于： 日立系列自动生化分析仪5.2校准5.2.1校准物 使用迈克科技有限责任公司的肌酐校准液（商品名为Creatinine Calibration Liquid，Crea-CL）进行两点校准或使用迈克科技公司的多项液体校准血清（商品名为Muti-Calibration Serum，M-CS）进行两点校准。5.2.2校准物的稳定性迈克科技有限责任公司的肌酐校准液，在28密闭保存可稳定12个月；迈克科技有限责任公司生产的多项液体校准血清-15-20可稳定24个月，28密闭保存可稳定5天。5.2.3校准物准备 肌酐校准液和多项液体校准血清置室温放置15分钟,混匀后即可使用,混匀时应避免气泡产生；用后及时冷藏保存。5.2.4校准间隔 迈克肌酐肌氨酸氧化酶法检测试剂具有良好的开瓶稳定性,一批试剂间28贮存30天无瓶间差，我们推荐校准间隔为30天。当试剂批号更换、仪器维修或光源等配件更换后应重新进行校准。5.2.5校准物溯源性迈克肌酐校准物是采用Fluka公司提供的纯度为99.9%的肌酐原料，用万分之一电子天平准确称量，并用对肌酐有稳定作用的生物缓冲液或经稳定化处理的人血清（来源同迈克液体质控血清）准确定容而成。肌酐的标示值是利用迈克科技有限责任公司肌酐（Crea）肌氨酸氧化酶法检测试剂和日本Kainos公司肌酐校准品及肌酐肌氨酸氧化酶法检测试剂在全自动生化分析仪上相比对所确定。日本Kainos公司肌酐校准品具有依据高效液相色谱作为比对方法在JSCC指定的参考实验室的全自动生化分析仪上所确定的靶值。5.2.6校准物订货指南品名货号产品编码规格包装瓶型Crea-CLBS05150102190050153ml5塑料滴瓶M-CSBS02150102190020153ml5塑料滴瓶5.3 质控5.3.1 质控物 使用迈克科技有限责任公司生产的液体生化质控血清（商品名为：Auto-Norm serum ，ANS、Auto-Pathology serum ，APS）。迈克液体生化质控血清来源于健康正常人血清，其中HIV、HCV、HBV传染性指标经国家食品和药品监督管理局（SDA）批准的方法检测，结果均为阴性，但不排除存在潜在感染的危险性，使用时应视病人样品同等对待。血清添加物为高纯度肌酐，反应特性接近临床新鲜血清，基质效应小。迈克液体生化质控血清采用活性物质稳定技术，确保酶、胆红素等物质的稳定性。血清不含剧毒物质（如NaN3、硫柳汞等），对环境不造成污染,且不含蛋白酶水解抑制剂，确保血清活性成份的反应特性。肌酐的范围值是依据迈克肌酐肌氨酸氧化酶法检测试剂和多项液体校准血清，采用迈克试剂标准操作参数在全自动生化分析仪上对其进行检测,将检测结果进行统计学处理后确定。5.3.2可接受性判定质控血清的检测值应在给定质控范围或符合用户室内质控规则。5.3.3质控物订货指南品名货号产品编码规格包装瓶型ANSB003500102000030505ml10塑料滴瓶APSB004500102000040505ml10塑料滴瓶6.交叉污染本试剂具有良好的抗交叉污染能力。不对迈克其它试剂造成污染，且不受迈克其它试剂的污染。试剂项目： 肌酐肌氨酸氧化酶法检测试剂盒Creatinine（Crea） Assay Reagent Kit by SAO Method适用于： 日立系列自动生化分析仪7. 方法学特性7.1线性范围：0.08840.0mol/L。样品中的Crea超出线性范围，可采用减量操作，或用蒸馏水按比例稀释后检测。7.2精密度：对迈克液体生化质控血清1例、临床标本4例进行50次重复检测，检测结果如下。 批内精密度 批间精密度血清检测次数均 值（mol/L）标准差变异系数（CV%）血清检测次数均 值（mol/L）标准差变异系数（CV%）I5088.91.581.77I5088.52.042.30II50180.32.211.22II50183.63.431.86III50299.52.670.89III50293.74.021.36IV50587.93.820.64IV50584.76.671.14V501243.87.860.63V501233.710.240.837.3灵敏度：本试剂最低检测限为1.0mol/L,计算是由零浓度的肌酐样品平行检测20次,取其均值加3个标准差而得来。7.4抗干扰能力：胆红素600mol/L，维生素C36mmol/L,脂浊7.5%（以甘油三酯含量表示相当于15.0mmol/L）时对检测结果无影响。7.5抗凝剂的影响：常规抗凝剂肝素不影响本法对肌酐的检测，但枸橼酸钠、EDTA-Na2、EDTA-K2、草酸盐、NaF类抗凝剂要影响本法对肌酐检测，应避免使用。8.方法学可溯性: 迈克Crea试剂（Y）与日本Kainos公司（X）Crea肌氨酸氧化酶法试剂比对：回归方程：r=0.99,Y=1.016X + 0.028, n=50检测范围：08000mol/L日9.参考值范围血清/血浆： 男性: 36.0 97.0mol/L 尿液：首次晨尿: 1530 15320mol/L 女性: 17.7 80.0mol/L 24小时尿: 6.6 15.0 mol/d建议各实验室建立自己的参考值范围。10.安全性和注意事项血清样品应避免溶血，严重溶血样品会导致检测结果假性升高；血清等样品可能含有乙肝等病毒,有被感染的危险性,采血时应采取防范措施；本试剂含有NaN3应避免与铅铜等金属接触；试剂反应后所产生的废液及使用后难降解的包装材料应集中收集后交当地环境废物处理站处理。11.技术服务有关产品技术咨询请与本公司技术开发部联系,电话:关产品质量投诉请与本公司质管部联系,电话:于新装机用户，本公司可提供技术支持，电话剂项目： 肌酐肌氨酸氧化酶法检测试剂盒Creatinine（Crea） Assay Reagent Kit by SAO Method适用于： 日立系列自动生化分析仪12. 主要参考文献12.1 斋藤正行，等. 临床化学分析. 东京化学同仁，53，196812.2 安原正善，等. 临床检验仪器试剂，8（5），1183，198512.3 National Committee for Clinical Laboratory Standards, Procedures for theHandling and Processing of Blood Specimens; Approved Guideline, NCCLS publication H18-A, Villanova, PA (1990).12.4 National Committee for Clinical Laboratory Standards, How to Define, Determine, and Utilize Reference Intervals in the Clinical Laboratory; Approved Guideline, NCCLS publication C28-A, Villanova, PA (1994).12.5 Tietz, N. W., Fundamentals of C