肿瘤细胞免疫治疗和ACTL治疗技术介绍.doc

医院肿瘤体细胞免疫治疗1、 背景：据世界卫生组织国际癌症研究中心报告，由于人口老龄化、地球环境恶化、吸烟等不良因素影响，导致全球癌症人数猛增。目前，每年新增癌症患者约1000万人，其中530万为男性，470万为女性。与1990年相比，全球癌症患者的发病率增长了19，死亡率增长了18。我国居民医生罹患癌症概率22%，因癌症死亡率13%。每年新发肿瘤病例312万例，死亡病例达到270万例。每分钟有6人被诊断为恶性肿瘤，每7人中会有1人因癌症死亡。抗恶性肿瘤的传统治疗手段包括：手术、化疗及放疗，但疗效仍不尽人意。主要表现为治疗的有效率低，毒副作用明显。因而，十分有必要寻找更加安全有效的癌症治疗方法。随着肿瘤生物学、分子生物学和免疫学的发展，免疫治疗是目前最有希望取得突破的治疗手段，并已成为继传统肿瘤治疗方法（手术、化疗、放疗）后的第4种肿瘤治疗模式。特别是抗肿瘤的树突状细胞（Dendritic cells, DC）治疗，尤其是2010年4月29日美国FDA正式批准第一个细胞治疗药物Provenge上市销售，该产品使用肿瘤患者自体DC细胞，使用抗原蛋白刺激DC的方法制造主动性细胞免疫治疗产品，用于抗前列腺癌的DC 治疗，标志着DC细胞自体治疗开始进入了肿瘤治疗的主流，是细胞治疗技术及产品发展的一个重要的里程碑。由于体细胞治疗的先进性，该技术已经被国家卫生部列为第三类医疗技术。国内正在开展此类技术的医疗机构超过800家。肿瘤的细胞免疫治疗已经成为未来发展的重点方向之一。由于医疗改革的变化，医院对于药品比例的要求越来越严格，提升诊疗费用可以降低药品占医院收入的比例，可以让医院更加灵活的选择药品进行治疗。2、 市场潜力全国每年300万新增肿瘤患者，每年肿瘤患者保有量450万以上。几乎所有患者都会就诊。每年全国死亡患者超过170万，而新发患者经过治疗也存在复发风险。目前的放化疗方式可以辅助手术治疗解决一部分肿瘤治疗问题，但是仍然存在复发情况。多种肿瘤治疗方法联合治疗将给肿瘤患者带来福音。广东中山肿瘤医院每个月的细胞免疫患者数量达到800人，每个月为医院创造收益达到数千万。潜力巨大。3、 国内肿瘤细胞免疫诊疗现状自从20世纪90年代LAK细胞治疗开始，肿瘤细胞免疫治疗经历了一个长时间的技术演化期。最初的LAK细胞由于其理念的先进性受到了国内大量医疗机构和医学专家的追捧，但经过一段时间的应用证实，LAK细胞治疗并不能比单纯IL-2治疗拥有更好的有效性。细胞免疫就此降温，而起疗效不理想的印象却被大量医生所了解。随着科学发展，NK、CIK等非特异性、非靶向肿瘤细胞免疫治疗技术在国内外兴起。但其非特异性的性质造成疗效仍然不理想和免疫反应等副作用。但由于其商业利益的存在和对患者生活质量的改善等优势，至今，仍有很多医院仍然应用。全国和国家发改委现行最普遍的价格标准就是按照CIK治疗进行设定的。多靶点细胞免疫治疗技术正在逐渐获得行业认可。目前临床使用最多的是重组腺相关病毒转导的抗原致敏树突状细胞激活细胞毒性细胞的多靶点T细胞治疗技术（ACTLTM）。该技术已经在中山肿瘤医院、天津肿瘤医院、南方医科大学附属南方医院等大型医院进行过临床应用和临床试验，初步验证了其有效性和安全性。国际肿瘤细胞免疫治疗发展目前国际上对于细胞免疫治疗肿瘤的临床操作方法各异。在美国是以药品形式进行申报。目前已经批准的是Provenge公司的DC产品。日本主要以企业和医院合作的模式进行肿瘤细胞免疫治疗。ACTL技术曾经成功应用于斯坦曼教授的胰腺癌治疗并取得了良好的成果。很多临床研究正在进行中，主要集中在肿瘤多抗原刺激T细胞产生的靶向杀伤作用、通过基因技术改善T细胞受体（TCR）等方面。肿瘤特异性细胞免疫治疗技术主要有以下四种，主要也是围绕着肿瘤的核心杀伤细胞，T细胞展开的。4、 医院发展肿瘤细胞免疫治疗的必要性从社会效益上讲，选择开展细胞免疫肿瘤治疗可以给医院提供更多的治疗手段，使患者得到更好治疗，同时进一步提升医院的学术地位和影响力。从经济利益上讲，开展细胞免疫肿瘤治疗可以吸引更多患者，可以获得更多的治疗收益。将来可以利用生物实验室进行肿瘤筛查等服务，为医院创造更多收入。在细胞免疫治疗的开展同时，医院也可以获得细胞免疫治疗的一部分收入。从学术利益上讲，细胞免疫治疗肿瘤还属于前沿科学。作为转化医学，可以为医院在前沿学科带来更多学术课题。依托医院的规模化效应，通过大量患者的诊治，可以在海外学术专刊发表文章，带来更多学术成果，提升医院学术地位。5、 公司产品NK、CIK、LAK细胞属于非靶向治疗技术，效应细胞数量不易评估，目前疗效评价不理想，技术落后。自DC发现后，产生大量DC细胞治疗产品。抗原转导方式包括：DC细胞直接增殖、肿瘤裂解液刺激、短肽转导、腺病毒转导、逆转录病毒转导、重组腺相关病毒转导（rAAV）、长肽转导等。由于抗原递呈受抗原大小、抗原的抗原性、单核细胞吞噬和外排情况、抗原负载产品的安全特性等的影响，选择高效抗原转导能力的rAAV因其凸显的抗原转导能力强、安全、靶向性强等优势逐渐被行业认可。1. ACTLTM技术由rAAV转导的抗原致敏树突状细胞激活的T淋巴细胞治疗技术已经治疗了大量的肿瘤患者。患者耐受良好、肿瘤转移灶和肿瘤负载均明显下降。目前已经在广东和湖北获得了医保报销，使更多患者得到了有效治疗。ACTLTM技术原理如下图：（通过负载了肿瘤特异抗原的重组腺相关病毒感染分离的人体单个核细胞，体外培养产生树突状细胞；树突状细胞通过抗原递呈过程形成具有肿瘤抗原表达的活化的细胞毒性T细胞从而溶解肿瘤细胞）。ACTLTM制备流程图如下：rAAV可规模化负载的肿瘤抗原如下：a) 腺癌：ACTLCEA； ACTLHer-2/neu(c-erb b2)b) 鳞癌：ACTLCYFRA21-1: K19 或 CK19c) 乳腺癌：ACTLBA46; ACTL-Bcg1d) 肝癌：ACTLAFPe) 宫颈癌：ACTLE6-E7：HPV-16；-18f) 鼻咽癌：ACTLLMP-1g) 前列腺腺癌：ACTLPSA； ACTLPSMA； ACTLPAP；h) 多发性骨髓瘤：ACTLHM1.24i) 乳腺癌肿瘤-睾丸抗原(CT)SPANX: ACTL-SPANX: 黑色素瘤、肝癌、肠癌以及神经系统恶性肿瘤等。j) 精子蛋白17(SP17)：ACTL-SP17; 骨髓瘤以及卵巢癌、宫颈癌和子宫内膜癌等生殖系统肿瘤等。6、 公司的技术优势现有市场上有近500家医院开展了相关细胞免疫治疗技术。由于技术落后，很多医疗机构的治疗技术并不能达到最佳效果。我公司结合了传统技术和国际领先的细胞治疗技术，结合GMP规范化的细胞制备技术，提供高质量的体细胞制备产品。公司相关技术优势如下：1. 强大的国际化研发团队：公司拥有强大的研发团队，主要科学家均具有非常丰富的海外研究背景。同时拥有国外专家顾问团队。2. 优秀的细胞负载技术：由于多数肿瘤患者在接受细胞治疗时均进行了多项治疗，因此，直接通过手术获得患者肿瘤抗原比较困难。公司拥有多种肿瘤特异抗原，采取现金的rAAV负载和长肽负载多肿瘤抗原进行肿瘤免疫治疗，肿瘤治疗针对性强。DC细胞的抗原表达率高于国内应用的一般技术。在全国甚至国际上具有领先优势。ACTL技术还获得了多项中国和美国专利，中国专利其中6项已授权，另有2项近期也即将授权。专利号专利名称授权国家US 6,153,436 AMETHOD OF GENE DELIVERY USING WILD TYPE ADENO-ASSOCIATED VIRAL (AAV) VECTORS WITH INSERTIONS美国US 6,495,361 B1METHOD OF PRODUCING INFECTIOUS PAPILLOMAVIRUS IN PLACENTAL CELLS美国US 6,506,600 B2SECRETING PRODUCTS FROM SKIN BY ADENO-ASSOCIATED VIRUS (AAV) GENE TRANSFER美国US 6,884,605 B2COMPOSITIONS, METHODS AND PRODUCTS COMPRISING HUMAN PAPILLOMAVIRUS FOR DETECTING ANDTREATING A CANCER美国EP1206563B1GENETICALLY ALTERED DENDRITIC CELLS TRANSDUCED WITH ADENO-ASSOCIATED VIRUS(AAV),METHODS OF PRODUCING SAID CELLS AND USES THEREOF欧洲200880012949.6一种重组腺相关病毒载体及其构建方法与应用中国201110125660.9一种Her-2/neu重组腺相关病毒载体及其构建方法与应用中国201110125697.1一种BA46重组腺相关病毒载体及其构建方法与应用中国201110125665.1一种LMP-1重组腺相关病毒载体及其构建方法与应用中国201110125683.X一种AFP重组腺相关病毒载体及其构建方法与应用中国201110125603.0一种PSA重组腺相关病毒载体及其构建方法与应用中国201110125643.5一种CEA重组腺相关病毒载体及其构建方法与应用中国201110125632.7一种PSMA重组腺相关病毒载体及其构建方法与应用中国3. 先进的GMP管理规范：公司十分关注产品质量，按照国家体细胞治疗规范，严格遵照GMP要求进行质量管理。制定了大量标准管理流程。举例如下：4. ACTL技术临床安全性研究：重组腺相关病毒（rAAV）感染树突状细胞（DC）激活的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对中国癌症患者的临床安全性研究Lijun Di Yulin Zhu Jun Jia Jing Yu Gonghong Song Jie Zhang Li Che Huabing Yang Yan Han Bo Ma Chunrong Zhang Yanhua Yuan Miaoning You Fengling Wan Xiaoli Wang Xinna Zhou Jun RenReceived: 14 October 2011 / Accepted: 6 December 2011 / Published online: 19 July 2012Federacion de Sociedades Espanolas de Oncologa (FESEO) 2012摘要目的 本研究的目的在于探索使用携带癌胚抗原（CEA）cDNA的重组腺相关病毒（rAAV）感染树突状细胞（DC）从而激活的细胞毒性T淋巴细胞（CTL）用于治疗恶性肿瘤患者的安全性。结论 这些初步的数据显示rAAV-DC免疫治疗是耐受的，对于癌症患者没有严重不良反应。5. 丰富的临床应用经验：rAAV转导的ACTL技术已经在全国多家知名医院进行了临床应用，拥有丰富的临床经验。ACTL技术已经获得了广东省的物价批准并获得了广东和湖北省的医保报销。为了追求更多询证医学证据，公司还联合广东中山肿瘤医院、天津肿瘤医院等多家细胞免疫治疗权威医院进行多项大规模临床研究，正在申报国家科研立项。以下是临床肿瘤治疗结果介绍：15