薄层要求.docx

3.4.1 修订的历史情况及原因。 xvP8VW 3.5.5小蜜丸中超过0.5 g 者应改为大蜜丸。 Z btYp 3.6鉴别 pWKC! 对原有标准应逐一进行考察，并按顺序一一说明新增项目和修订项目。删除的项目应逐一说明理由，并将进行过摸索但无法列入正文的方法和操作一并说明。?hC,49 3.6.1显微鉴别 按顺序写明标准中的所鉴别的药味归属。注明增修订情况。 ;2y4 3.6.2薄层色谱鉴别 Ga31NE (1)鉴别应具有专属性。 AQGl%k_ (2)复方制剂不宜采用化学试验方法，如生物碱沉淀反应，利伯曼反应等。 tfdb9# &? (3)光谱满足不了专属性的要求时，应尽可能选择色谱鉴别。 PU-L,K (4)特征性有效成分仅以保留时间作色谱鉴别，则缺乏专属性，若无法得到对照品，可采用色谱组合如 HPLC 和 TLC 或在一个项目中采用不同的测定组合，如 HPLC/UV 二极管阵列， HPLC/MS，GC/MS 等。 Ry40:;MYN (5)色谱鉴别须做方法学验证。 |Es,$ (6)应说明薄层色谱鉴别的归属。 cj?vXV 说明供试品、对照品、对照药材、阴性溶液的具体制备方法。操作注意事项等。如采用特殊显色剂应写明配制方法。显色需要在一定时间内观察的要规定观察时间。 #LR.1zZ (7) 说明前处理条件选择、展开条件选择以及测定指标选择等的理由。 W#6e )d (8)试验要求： DMYH 薄层板 列出使用的高效预制薄层板和预制薄层板的商品名、规格和型号等；自制薄层板应注明固定相种类、黏合剂或其他改性剂种类，薄层板规格、涂布厚度等。 o)GesgxFa5 点样 注明供试品溶液和对照品（对照药材）溶液的点样量。除特殊情况外，采用专用毛细管、注射器，手动或配合相应的半自动、自动点样器，接触法或喷雾法点样，将样品溶液以圆点状或条带状点于薄层板上。点样基线距底边1015mm；高效板基线距底边810mm；左右边距1215mm；圆点状点样，原点直径不得大于3mm，点间距离810mm；条带状点样，条带宽48mm，条带间距离不少于5mm。普通板点样量为26l，高效板点样量为14l。同时注明点样方式（接触或喷雾）。 ?jbah# 展开方式 双槽展开缸应密闭；根据品种的特点，说明是否采用适当方式预饱和或预平衡及控制温度、湿度等，以保证分离效果。薄层板浸入展开剂的深度一般为5mm。除特殊需要外，一般上行展开，高效预制薄层板展开距离58cm；预制薄层板展开8cm；自制板展开815cm。 注明展开方式、展距。 )%b 5uZ 显色与检视说明采用以下何种方法检视：iJeo df直接在可见光下检视，或采用适宜显色剂显色（喷雾或浸渍）后在可见光下检视。 N 6Z0 在 365nm紫外灯下检视荧光色谱，或采用适宜显色剂喷雾后检视荧光色谱。在 254nm紫外灯下检视荧光淬灭色谱。 !Eb|AHa 3.6.3化学反应鉴别 UCkV ;/. 尽量不用，如确实需要，必须有专属性，应说明该反应为方中什么药及什么成分的鉴别，阴性有无干扰，并写明化学反应机理。 Gel) 3.7.1按现行版中国药典一部通则补充相应新增和修订的检查项目，如膏药软化点测定，酒剂乙醇量，橡胶膏黏附力等。 = &?&pVF 3.7.2因品种具体情况另行规定的检查，要说明原因和列出具体数据及限度确定依据。 4JF.O6 3.7.3通则中检查项下规定多种方法的应注意方法选择的正确性，并写明方法选择的理由。 ?6nB=B)/ 3.8浸出物或提取物 L-rV+?i6f 写明制定浸出物的理由和实测数据及限度确定依据。ZI qXkD含糖等辅料多的剂型对浸出物的测定有一定影响，一般不建议使用乙醇（甲醇）浸出物，可根据所含成分选用合适的溶剂。 tjB)-=j 3.9含量测定 MC 5rOA 应说明测定方法和测定指标的选择依据及目前国内外的研究情况。如测定熊果酸，因薄层扫描法无法将熊果酸和齐墩果酸斑点区分开来，而液相色谱可区分，因而选择 HPLC法。丹参中丹酚酸B现代研究证明为活血化瘀的主要成分，因而增加丹酚酸B指标成分的含量测定等。对于药效成分明确的中成药，要求测定其有效成分的含量，其测定方法应具有专属性，如测定方法无法做到专属性而采用了某一种非专属性的方法，则应用其他的分析方法来达到总体的专属性。比如，可附加一种专属的鉴别试验或色谱指纹图谱。对于药效成分未知的中成药，应有指标成分的含量测定，其指标成分选择的合理性应进行论证。Ct,oDU对于测定的指标性成分尽量不要选择经过化学转换的水解产物。特别是不要使用分解或降解产物做指标，如 5-羟甲基糠醛等。 _(EsIqc(F 薄层色谱法用于含量测定必须使用商品用薄层板（高效或普通）。 ia; osqW 3.9.1仪器、药品与试剂 xhho (1)仪器的名称、检测器的种类。 CKe72OC (2)对照品要提供来源和纯度实验图（纯度实验应按要求满足进样量，记录色谱峰面积，调节参数保证杂质峰积分，在主峰保留时间3倍后停止测定） #hs&)6S f (3)色谱柱：液相柱写明填料的种类、粒度，色谱柱的长度。不可仅写商品柱的名称，气相柱写明填充柱固定相的种类，涂布浓度、柱长度或毛细管柱的种类、长度、内径、膜厚度。 47*2QLzj 3.9.2液相色谱条件 /RhM6N (1)实验条件的选择 /J!hKKk 最大吸收波长的选择 附对照品光谱扫描图，并注明所用溶剂的种类。 tN.BI1nB 流动相选择 将试用过的流动相简要注明，并附图。梯度洗脱中梯度的改变应详细写明是缓慢升还是直接升至规定浓度，分离度要符合要求，分离度达不到要求的色谱应将杂峰分离情况注明。必要时可采用二极管阵列检测和质谱检测，进行峰纯度检查。 Dp=%Ft 色谱条件应确保待测成分峰与相邻的其他峰能满足分离度的要求。 %/s+-js: (2)前处理条件的选择 # .OCoc 提取方法的选择 要求列表提供具体数据 。 $f6wmI;x 采用成型固相萃取柱应注明品牌必要时增加系统适用性试验。 8R=SC 3.9.3气相色谱条件 , aQ 气相色谱法用于含挥发性成分的含量测定，测定方法有内标法、外标法，中药含量测定首选外标法。检测器有火焰离子化检测器（FID）、热导检测器（TCD）、质谱检测器（MS）等。(1)建立方法时可选择填充柱或毛细管柱，一般中药测定宜选用毛细管柱；选用毛细管柱时应考察确定毛细管柱种类、柱长、内径、膜厚度等，应注明分流进样还是不分流进样，说明选择的依据；选用填充柱应考察确定固定相种类及涂布浓度。(2)选择进样口温度、柱温（若为程序升温应确定初始温度、程序升温速度、达到温度、保持时间等）、检测器温度、分流比、理论板数等有关参数。(3)采用内标法时，应选定适宜的内标物质及校正因子的测定方法，内标物质的峰应能与样品中的被测成分及杂质峰达到较好的分离。(4)采用外标法定量时，为保证进样误差符合规定，宜采用自动进样，提高进样重复性。(5)选定供试品取量、提取及纯化方法（采用超声处理时，应规定超声功率、频率，必要时注明超声温度），稀释体积、进样体积等；选定对照品溶液配制用溶媒、配制浓度、配制方法等。3.9.4方法学验证 参照中国药典2010年版一部附录。TboIABp:H 3.9.5样品测定 g*nh8 (1)列出具体数据并提供限度制定依据。 :t36NM (2)转移率采用实际投料用药材进行计算。并考察制剂工艺中不同环节对转移率的影响，说明所定指标的合理性。 cy6lsJ? (3)制剂中如果含有有效剂量与中毒剂量相对接近的成分，应规定含量上下限，凡制定含量上下限的品种，应注意充分考察药材的波动情况。 sfvz!mo (4)中西合方制剂处方中的化学药品必须建立含量测定。 91 D;NN 3.10规格 Fjc4 C 3.10.1规格应进行规范，不合理的规格要删除，新增规格应明确出处。 9q #) 3.10.2注意补充丸剂百粒重、糖衣片要补充片芯重量，薄膜衣片（丸）要规定片（丸）重，单剂量包装丸剂要规定装量等。 +x7b9sHJ 五、生物安全性检查1.标准体例参照中国药典2010年版格式，含量测定项前编排生物安全性检查，按顺序可分别列有以下项目：异常毒性、热原或细菌内毒素、降压物质、无菌、微生物限度、过敏反应、溶血与凝聚、不溶性微粒。1. 各检测项目制订的具体要求2.1异常毒性主要针对在制剂或原料生产过程中存在着不确定或难以控制的因素而可能导致药品存在安全隐患，如中药注射剂、某些生物制品、多组分制剂等。该项拟制重点是：稀释溶剂、供试液浓度、给药途径和给药速度。2.2热原主要针对各种注射剂的成品检测（大输液、小针剂），特别是抗生素类、生化药品类。作为医院制剂，由于存在不确定因素较多，生产不连续，建议多采用热原检查法，保障制剂安全性。本法不适用于放射性药物、肿瘤抑制剂等细胞毒性药物制剂，以及一些对体温有影响的药物。该项拟制重点是：提供热原检查方法学资料。该项拟制重点是：稀释溶剂、供试液浓度和给药速度。2.3细菌内毒素主要针对制剂环境和人员等有充分保障，而不存在检测干扰因素的各种注射剂的成品检测（大输液、小针剂）及难于用热原检测法控制的品种。应严格进行细菌内毒素检查方法学验证，该项表述重点：采用的方法，内毒素限值，检查用浓度或鲎试剂灵敏度。2.4无菌（1）适用范围除中国药典2010年版二部化学药制剂通则项下要求进行无菌检查的制剂外，用于手术、烧伤及创伤的局部给药或冲洗类制剂应符合无菌检查法的要求。（2）方法学要求应按中国药典2010年版二部附录H进行方法学验证。（3）注意事项 验证试验应设阳性对照组和阴性对照组。 常用的检查方法有：薄膜过滤法和直接接种法。方法中应明确稀释剂、冲洗剂和冲洗量。2.4 微生物限度（1）适用范围除注射剂、冲洗剂、植入剂、部分眼科制剂及用于烧伤、创伤等需进行无菌检查的品种外，其它制剂均应进行微生物限度检查，检查方法纳入质量标准正文。（2）方法学要求应按中国药典2010年版二部附录J进行进行方法学验证。（3）注意事项 验证试验至少应进行3次独立的平行试验，并获得一致结果。 细菌、霉菌及酵母菌计数方法验证应设试验组、菌液组、供试品对照组和稀释剂对照组。 控制菌检查验证试验应依各品种项下微生物限度标准中规定检查的控制菌选择相应验证的菌株，同时进行阳性对照试验、阴性对照试验和阴性菌对照试验。 当供试品有抑菌活性时，应采用适当方法处理以消除供试液的抑菌活性，再依法检查。常用的方法有：培养基稀释法、离心沉淀法