批内重复性试验.doc

（二）方法学评价实验：批内重复性试验摘要目的：掌握重复性试验的原理、方法和操作，并熟悉和掌握分光光度计的使用方 法，并测定、计算双缩脲法的SD和CV。方法：重复性方法。标准管法测物质含量的方法。 结果：学会了重复性试验的操作，标准蛋白管的均值是0.070，测定的双缩脲法 的SD的值是1.74，CV的值是4.43。结论：能够按照正确的方法操作重复性实验，并测定出双缩脲法血清总蛋白量的 SD和CV。英文翻译Abstract Master the principle , operation, and calculation of within batch repeatability，and Familiar with and master the use of the Spectrophotometer,Determine and calculate the standard deviation(SD) and coefficient of variation (CV) of biuret methodMethods Repetitive method,Standard tube method to measure the material content.Result Learn the knowledge of the test of within batch repeatability， and calculate the standard deviation(SD) is,1.74,and coefficient of variation (CV) is 4.43.Conclusion We can use the correct way to ma ster the repeatability of test operation,and we determined and calculate the standard deviation(SD) and coefficient of variation (CV) .关键词： 重复性 变异系数 样本标准差前 言 批内重复性试验是指相同条件下，用 同样方法、同一试剂和标准品、同 一仪器、同一实验室由同一人，在尽可能短的时间对同一份样品做20次以上重复测定，以获得批内精密度的试验方法，其结果能够反映各次测定结果相互接近的程度，可用于客观评估某种分析方法随机误差的大小. 1.材料和方法 1.1材料 60g/L蛋白标准液、待测样品、 双缩脲试剂、可见光分光光度计、试管、 烧杯、比色杯、吸耳球、移液管 1.2 方法（操作过程） 1.2.1 取出双缩脲试剂放置于桌上，取出24支试管，分别标记空白管1支， 标准管3支，重复测定管20支，需要24管共72ml的双缩脲试剂。加入物（ml）试剂空白管标准管3测定管20蒸馏水0.0660g/L蛋白标准液0.06待测样品0.06双缩脲试剂3331.2.2 涡旋混匀后，37保温10分钟，波长540nm比色，蒸馏水调零，测定各 管吸光度。1.2.3 计算待测样品蛋白含量，计算标准差S和变异系数CV值。2、 结果 用公式SD=(Si2) , Si2= (Xi- x) 2/ n-1,和CV%= (SD x)100标准管吸光值样品吸光值样品吸光值均值样本蛋白含量0.0720.094 0.092 40.09 标准管均值SD均数CV0.0690.085 36.26 0.070 1.74 39.35 4.43 0.0700.088 37.54 0.102 43.51 标准管SD0.093 39.67 0.0015 0.096 40.95 0.092 39.24 标准管CV0.095 40.52 2.17 0.086 36.68 0.089 37.96 0.095 40.52 0.093 39.67 0.089 37.96 0.093 39.67 0.091 38.82 0.096 40.95 0.087 37.11 0.096 40.95 0.092 39.24 0.093 39.67 3、讨论3.1 实验结果讨论3.1.1结果有点偏高，可能是试剂问题，和加样枪的枪头已经老化，导致封密性不强，实验误差大.3.1.2.因为部分同学为省时间都没有润洗比色杯，造成所测得的波长值偏大。 3.2实验心得：1. 做重复实验检测的样品一定要稳定性强，它的基体组成成分应尽可能相似于实际检测的病人标本。2. 假如采用冰冻保存的样品一定要注意内含分析物的稳定，要严格控制冻融、混匀的操作。3. 要严格控制每次取溶冻干品时使用的溶液的质量、开瓶的小心谨慎、加液的准确性、使冻干块浸润并复溶的时间、以及混匀的操作手法等等。 4.以后在实际工作中，实验时按照厂商操作规程要求做好仪器校准，并且一定要和实验样品一起做质量控制，进行质量控制说明操作运行是否正常，是实验数据可否用来评估检测系统不精密度的依据，质量控制结果不好，实验必须重做。 5.收集实验数据后，要计算均值和标准差，变异系数，并且从允许误差表中查阅评价的该项目允许误差范围。 4、方法学评价 重复性实验册是要求同一操作人员，在同一实验室内，使用同一仪器，并在短期内，对相同试样所作多个单次测试结果，在95概率水平两个独立测试结果的最大差值。 它必须满足相同的测量环境、相同的测量仪器及在相同的条件下使用、相同的位置和在短时间内的重复，要求的严格，且实验中容易受到技术人员的素质、仪器的性能以及对各种影响量的监控，在临床上运用还是比较广泛的。5、临床意义 重复性实验可以用于方法学评价、方法间的比较、仪器性能评估、试剂质量验证和检测系统的稳定性。参考文献 1 刘新光，临床检验生物化学实验指导M.第一版.高等教育出版社，2006