常用细菌生化反应试验PPT课件.ppt

常用细菌生化反应试验 1 糖醇类代谢试验 糖发酵试验甲基红试验V P试验葡萄糖氧化 发酵试验 O F试验 七叶苷水解试验 半乳糖苷渗透酶试验 2 糖发酵试验 原理多糖 单糖 丙酮酸 酸性产物 或产酸产气 pH 指示剂呈酸性变色 若产气者有气泡出现 培养基 糖发酵管 半固体发酵管 微量发酵管试剂 酚红 溴甲酚紫等结果 培养基呈酸性变色应用 观察细菌对糖度的分解情况 常用于肠道杆菌的鉴定 3 糖发酵试验结果判断 4 甲基红试验 原理 细菌分解糖 产生丙酮酸 进一步生成大量混合酸 使培养基pH维持在4 4以下 加入甲基红后 使甲基红呈现红色反应 此为甲基红试验阳性 培养基 葡萄糖蛋白胨水试剂 甲基红试剂结果 加入试剂后 培养基呈现红色 培养基不变色 应用 是肠道杆菌常用的生化反应试验 主要用于区别大肠肝菌和产气肠杆菌 5 伏 普试验 V P试验 原理 细菌发酵葡萄糖 产生丙酮酸 丙酮酸脱羧生成乙酰甲基甲醇 在碱性环境中乙酰甲基甲醇被氧化为二乙酰 二乙酰与蛋白胨中的精氨酸所含的胍基结合 生成红色化合物 培养基 葡萄糖蛋白胨水结果 加入试剂后 培养基呈现红色 培养基不变色 应用 是肠道杆菌常用的生化反应试验 主要用于区别大肠肝菌和产气肠杆菌 6 葡萄糖 丙酮酸 大量混合酸 pH降至4 4以下 甲基红试剂 培养基变红 甲基红试验 7 葡萄糖 丙酮酸 乙酰甲基甲醇 二乙酰 V P试剂 培养基变红 V P试验 脱酸 8 葡萄糖发酵形成丙酮酸后的不同代谢途径 葡萄糖 丙酮酸 大量混合酸 pH降至4 4以下 甲基红试剂 培养基变红 乙酰甲基甲醇 二乙酰 V P试剂 培养基变红 脱酸 9 蛋白质类代谢试验 靛基质试验硫化氢试验苯丙氨酸脱氨试验尿素酶试验 10 靛基质试验 原理 细菌产生色氨酸酶 可分解蛋白胨中的色氨酸 生成靛基质 吲哚 靛基质与试剂对二甲基氨基苯甲醛作用 生成玫瑰靛基质 培养基 蛋白胨水试剂 靛基质试剂 含对二甲基氨基苯甲醛 结果 加入试剂后 培养基出现红色液面 培养基液面为黄色 应用 用于肠道杆菌的鉴定 11 靛基质试验原理 色氨酸酶 色氨酸 靛基质 吲哚 玫瑰靛基质 玫瑰吲哚 对二甲基氨基苯甲醛 12 硫化氢试验 原理 细菌分解蛋白质中的含硫氨基酸 生成硫化氢 硫化氢与培养基中的铁盐或铅盐结合生成黑色络合物 培养基 含硫酸亚铁或醋酸铅的培养基结果 培养基变黑为阳性 不变黑为阴性应用 常用于肠道杆菌的鉴定 13 2020 1 27 14 苯丙氨酸脱氨实验 原理 细菌的具有的苯丙氨酸脱氨酶 可使培养基中的苯丙氨酸脱氨 形成苯丙酮酸 后者与三氯化铁作用 形成绿色化合物 培养基 苯丙氨酸琼脂试剂 10 三氯化铁结果 加入试剂后培养基呈现绿色为阳性应用 多用于肠道杆菌的鉴定 15 苯丙氨酸脱氨试验原理 苯丙氨酸 苯丙氨酸脱氨酶 苯丙酮酸 10 三氯化铁 绿色化合物 16 尿素酶试验 原理 产生脲酶的细菌 能水解尿素生成氨和CO2 氨使培养基呈碱性变色 培养基 尿素培养基试剂 酚红指示剂结果 培养基变红 培养基不变色 应用 肠杆菌科属间鉴定 17 尿素酶试验原理 尿素 尿素酶 氨 CO2 培养基pH升高 酚红呈碱性变色 18 枸橼酸盐利用试验 原理 某些细菌能力利用培养基中的枸橼酸盐作为唯一的碳源 也能利用其中的铵盐作为唯一碳源 细菌生长过程中分解枸橼酸盐产生碳酸盐和分解铵盐生成的氨 使培养基变碱 是指示剂呈碱性反应 培养基 枸盐酸盐培养基试剂 溴麝香草酚蓝 pH6 0以下呈黄色 pH7 6以上呈蓝色 结果 培养基变蓝 培养基不变色 应用 肠杆菌科属间鉴别 19 枸橼酸盐利用试验原理 枸橼酸盐 铵盐 碳酸盐 氨 培养基pH下降 溴麝香草酚蓝呈碱性变色 培养基变蓝 培养基 20 糖发酵试验 21 甲基红试验 22 靛基质试验 23 血清学试验 血清学鉴定 用已知抗体鉴定未知的细菌或标本中的抗原血清学诊断 用已知抗原检测血清中的特异性抗体 24 血清学鉴定 试剂 诊断血清 含抗体检测对象 特异性抗原方法 直接凝集试验 玻片法 荚膜肿胀试验 伤寒杆菌诊断血清 含抗伤寒杆菌抗体