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文档简介
配制2升MS+琼脂0.6%+蔗糖3%的固体培养基,阐述母液配制,培养基配制的全过程(1) 母液配制:1确定制备的培养基为MS+琼脂0.6%+蔗糖3%为大量元素培养基,应注意溶解和添加顺序,防止沉淀。2确定各母液的浓缩倍数,大量母液一般为浓缩10倍有机母液浓缩100倍,即所需配制的大量母液为200ml微量元素20ml,铁盐20ml,有机元素20ml。3根据公式:药品称取量(mg)=配方用量x浓缩倍数x母液体积计算出各药品的用量,即琼脂12g、蔗糖60g4用普通天平(1/100)称量药品,称号后的药品要分别放置。5将药品分别放入烧杯中,分别溶解,经充分溶解后再混匀。6将混合后的溶液移入容量瓶中,进行定容。7混合均匀后,将母液转入试剂瓶。8在试剂瓶上贴上标签,注明母液名称,浓缩和配制日期。9放入冰箱中低温(24度)保存。(2) 培养基的配制:1根据配方计算所需的各母液,琼脂及蔗糖的量分别为大量:200ml 微量20ml 铁盐20ml 有机20ml 琼脂12g 蔗糖60g。2在容器内装相当于1/3左右的纯水,加入称好的琼脂粉,并将其加热溶解再次加入大量元素、微量元素、铁盐、有机物母液,最后加入称量的蔗糖并搅拌均匀。3加水定容至2L,再搅拌均匀。4调整培养基的pH5将配制好的培养基尽快分装。6将分装后的培养基进行封口7用高压灭菌锅进行灭菌。现在需要你配制2升MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L+琼脂0.6%+蔗糖3%的固体培养基,已知大量元素母液10倍,微量元素母液100倍,铁盐50倍,有机物母液50倍,6-BA母液1mg/ml,NAA母液0.1mg/ml,请你阐述培养基的配制及灭菌的全部过程。1根据配方计算所需的各母液,琼脂及蔗糖的量分别:为大量元素母液200ml,微量元素20ml,有机物40ml,6-BA4ml,NAA2ml,琼脂12g,60g.2在容器内装相当于1/3左右的纯水,在依次加入称好的琼脂粉,并将其加热溶解再次加入大量元素、微量元素、铁盐、有机物母液,6-BA,NAA,蔗糖。3加水定容至2L,再搅拌均匀。4调整培养基的pH5将配制好的培养基尽快分装。6将分装后的培养基进行封口7用高压灭菌锅进行灭菌。灭菌的全过程,以手提式高压湿热灭菌锅为例1检查水位,以免空烧或烧干2装锅封盖,装锅时培养基不要过分倾斜,以免培养基粘到瓶口或流出3通电加热,开通电源进行加热4排冷空气:将其调至0.05Mp,排净空气5升温保压,升温保压时,调至0.1Mp,保持1520min6断电降压,断电后,排气降压时应缓
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