桔梗和伤风止咳糖浆（愈创木酚磺酸钾）对小鼠支气管黏液分泌的影响.doc

桔梗和伤风止咳糖浆（愈创木酚磺酸钾）对小鼠支气管黏液分泌的影响04级14班第6组：陈荔艳、张文巨、刘艳秋、哈纳提指导教师：徐冬、梁天文（中山大学中山医学院实验生理科学教研室 广州 510080）摘要：目的：观察并比较桔梗和伤风止咳糖浆（愈创木酚磺酸钾）对小鼠支气管黏液分泌的影响，从而推断两种祛痰药物的药用价值的高低。方法：气管酚红法。结果:t检验表明，两种药物均能使小鼠的支气管粘液分泌量显著增多，而且桔梗水煎液比伤风止咳糖浆的效果更好。结论：在祛痰的疗效方面，桔梗的药用价值比伤风止咳糖浆的高。关键词：桔梗 伤风止咳糖浆 支气管黏液分泌量 OD值 分泌指数1、 实验目的：观察并比较桔梗和伤风止咳糖浆（愈创木酚磺酸钾）对小鼠支气管黏液分泌的影响（用生理盐水做阴性对照），从而推断两种祛痰药物的药用价值的高低。2、 实验背景：祛痰药物的作用原理是增加呼吸道分泌，使痰液稀释且黏稠度降低，再借助咳嗽排出。祛痰药有两种，其中一种是恶心性祛痰药，常用的有氯化铵、桔梗、远志、愈创木酚甘油醚等。空腹服用效果明显，适用于急性呼吸道炎症时，痰液黏稠不易咳出的病人。祛痰作用取决于多种因素：痰液的粘稠度、呼吸肌作用的强弱程度、胸壁有无炎症等等。3、 实验原理：指示剂酚红自小鼠腹腔注射并经腹腔吸收后，可部分地由支气管黏液腺分泌入气道，有祛痰作用的药物在使支气管分泌液增加的同时，其由呼吸道粘膜排出的酚红也随之增多。因而可从药物对气管内酚红排泌量的影响来观察其祛痰效果。酚红在碱性溶液中呈红色，将气管放入定量的生理盐水中，加碳酸氢钠使其显色，用比色法（分光光度计）测出酚红的排泌量。从而推断祛痰药物的药用价值的高低。4、 实验材料：4.1实验器材：手术剪、小鼠灌胃器、眼科镊子、注射器、小试管、试管架、蛙板、723型分光光度计、离心机、图钉、7号针头、滤纸。4.2实验药品：1g/ml桔梗水煎液、0. 025g/ml伤风止咳糖浆（愈创木酚磺酸钾）、0.5酚红溶液、5碳酸氢钠溶液、生理盐水。4.3实验动物：小鼠40只5、实验步骤：5.1第一次实验（预实验）：小鼠5只，禁食不禁水812h，每只小鼠按0.2ml/10g（体重）灌胃给伤风止咳糖浆30min后，由腹腔注射酚红溶液（0.5ml/只），30min后颈椎脱臼处死小鼠，剥去气管周围组织，剪下自甲状软骨至气管分支处的一段气管，放进盛有3ml生理盐水的试管中，再加入0.1ml碳酸氢钠溶液，离心后，取上清液，用723型分光光度计（波长546nm）测OD值。编号重量（g）灌胃剂量（ml）OD值1250.500.020*2200.400.0073220.440.0074220.440.0105120.240.008*气管分离时表面粘有血液，对OD值有影响。5.2第二次实验（正式实验）：小鼠20只，桔梗组10只，糖浆组5只，生理盐水组5只。方法同预实验。结果如下：桔梗组：编号重量（g）灌胃剂量（ml）OD值1210.420.0182200.400.0153200.400.0174190.380.0175210.420.0136200.400.0187260.520.0218280.560.0119260.520.01610220.440.014糖浆组：编号重量（g）灌胃剂量（ml）OD值1210.420.0162190.380.0113180.360.0124160.320.0085160.320.012生理盐水组：编号重量（g）灌胃剂量（ml）OD值1170.340.010*2200.400.0033200.400.0064220.440.015*5120.240.005*气管分离时表面粘有血液，对OD值有影响。5.3第三次实验（正式实验）：小鼠15只，糖浆组10只，生理盐水组5只。方法同预实验。结果如下：糖浆组：编号重量（g）灌胃剂量（ml）OD值1160.320.0082180.360.0013160.320.0124180.360.0105210.420.040*6190.380.0107200.400.021*8180.369220.440.00510180.360.003*为气管分离时表面粘有血液，对OD值有影响。为注射酚红后酚红从针孔流出。生理盐水组：编号重量（g）灌胃剂量（ml）OD值1200.400.028*2160.320.0063170.344220.440.0015220.440.005*为气管分离时表面粘有血液，对OD值有影响。6、实验结果：6.1实验分组数据:编号桔梗组OD值糖浆组OD值生理盐水组OD值10.0180.0160.00620.0150.0110.00130.0170.0120.00640.0180.0080.00350.0170.0120.00660.0130.010.00570.0210.011080.0110.005090.0160.0070100.0140.0106.2实验数据图表:6.3桔梗组与糖浆组分别对生理盐水组进行t检验：t-检验: 双样本等方差假设t-检验: 双样本等方差假设桔梗组生理盐水组糖浆组生理盐水组平均0.0160.0045平均0.01020.0045方差8.22222E-064.3E-06方差9.28889E-060.0000043观测值106观测值106合并方差6.82143E-06合并方差7.50714E-06假设平均差0假设平均差0df14df14t Stat8.526598359t Stat4.028590733P(T=t) 单尾3.23522E-07P(T=t) 单尾0.000622167t 单尾临界1.761310115t 单尾临界1.761310115P(T=t) 双尾6.47043E-07P(T=t) 双尾0.001244334t 双尾临界2.144786681t 双尾临界2.144786681因为P0.01，所以两个实验组对对照组均有统计学意义。6.4实验结果处理(计算分泌指数):分泌指数=实验组OD值/对照组OD值编号桔梗OD桔梗组分泌指数糖浆OD糖浆组分泌指数10.01840.0163.55555555620.0153.3333333330.0112.44444444430.0173.7777777780.0122.66666666740.01840.0081.77777777850.0173.7777777780.0122.66666666760.0132.8888888890.012.22222222270.0214.6666666670.0112.44444444480.0112.4444444440.0051.11111111190.0163.5555555560.0071.555555556100.0143.1111111110.012.2222222226.5桔梗组与糖浆组的分泌指数进行t检验比较t-检验: 双样本等方差假设桔梗分泌指数糖浆分泌指数平均3.5555555562.266667方差0.4060356650.458711观测值1010合并方差0.432373114假设平均差0df18t Stat4.38299668P(T=t) 单尾0.000179353t 单尾临界1.734063592P(T=t) 双尾0.000358706t 双尾临界2.100922037P0.01，所以两个组的数据比较具有统计学意义。从均值做比较得知，桔梗组的分泌指数要比糖浆组的高。7、实验讨论：7.1灌胃、注射、处死的时间必须准确，小鼠支气管黏液分泌量以及对腹腔注射入酚红的吸收量会受时间的长短影响。腹腔注射酚红后注射器针头应旋出，避免酚红从针孔漏出，造成试剂损失，影响实验结果。气管放入生理盐水，加入5碳酸氢钠溶液后，应先放置15min后再离心。用分光光度计测OD值时，先将比色杯用蒸馏水清洗干净，后用上清液润洗。7.2气管段的取出是本实验的关键步骤，气管周围组织未分离干净，或气管外粘有血迹，或气管取出长度的差异，都会对实验结果造成影响。实验中出现气管周围粘有血液，对OD值造成了不同程度的影响，使生理盐水组（阴性对照）的数据不完整，但未影响最终结果。7.3本实验两种药物的剂量参照药品说明书以及文献资料，均为该药品的参考剂量。虽两种药物的浓度不同，但本实验结果仍然有临床指导意义。7.4由于各只小鼠之间存在个体差异，对药物吸收的程度不同，故同一组小鼠（尤其是糖浆组）所测得的OD值有较大的偏差。但做统计学分析时允许个体差异的存在，因此本实验结果具有统计学意义。8、实验结论：桔梗水煎液和伤风止咳糖浆均能使小鼠的支气管粘液分泌量显著增多且桔梗水煎液的分泌指数较高，从而可以推断在祛痰的疗效方面，桔梗的药用价值比伤风止咳糖浆高。谨在此对基础医学实验教学中心以及动物实验中心表示感谢！感谢本实验指导徐冬老师、梁天文老师以及对实验提供热心帮助的罗汉川老师表示衷心的感谢！参考文献：1章元沛.方瑞英.徐建华主编药理学实验人民卫生出版社.1985.94一95.2颜光美主编:药理学高等教育出版社3陈克敏主编：实验生理科学教程科学出版社4复方愈创木酚磺酸钾口服溶液说明书，广州星群（药业）股份有限公司5中国药典S1990Effect of the balloonflower and the Compound Guaiacol Potassium Sulfonale Oral Solution(the guaiacol sulfonic acid potassium) to bronchus secretion of the small ratAbstract: Purpose: Observe and compare the influence that the balloonflower and the Compound Guaiacol Potassium Sulfonale Oral Solution (the guaiacol sulfonic acid potassium) to bronchus secretion of the small rat, thus infer their use in dispelling the sputum and compare which of them is more effective. Method: the trachea phenol red method. Effect: the t test express that both of them can make the bronchus secretion of the small rat increase, and the decocted solution of the balloonflower is even better than the syrup. C