中压色谱仪操作规程.doc

BCHI中压液相色谱仪操作规程1. 仪器介绍1.1 仪器组成 中压液相色谱仪由两台C-605 BCHI泵、C-615 BCHI泵管理器、C-660自动接收器、C-635紫外检测器、不同规格中压柱组成。1.2 仪器主要技术参数1.2.1 C-605 BCHI泵 流速范围：2.5250ml/min；最大压力50bar 1.2.2 C-635紫外检测器波长范围：190740nm；波长精度：2nm；测量范围：02AU；噪音：在240nm为110-5AUD2. 操作步骤2. 1开机2.1.1将中压柱按照正确的连接顺序连接(注意上下不要接反，并确保各处连接时的气密性).2.1.2选好管子型号后，通过自动接收器背部的四个螺丝调整接收臂的高度,应确保自动接收臂与接收管之间的距离至少为1cm,以免接收管破损. 2.1.3打开泵、检测器及自动接收器电源开关.显示软件版本,几秒钟后进入主菜单,出现上次操作的各参数值.2. 2流动相的配制流动相的配置可以预先进行配制，也可以通过泵调节两个管道内溶剂的比例来进行，如为等度洗脱则只需在%B按比例直接设定即可，如为梯度洗脱可参见（附3）2. 3相关参数设定2.3.1泵的相关参数设定设定参数时,旋转屏幕右侧的选择按钮使菜单上下滚动以便选择,此时如果被选项屏幕左侧的状态栏背景为黑色,则该项数值为可设定状态,即可通过按下选择按钮使该项数值处于待设定状态,然后可通过旋转该按钮使数值增加或减少,再次按下该按钮进行确认即可;如果被选项状态栏处于上下两条黑线之间则表明该项数值此状态下不可改变.各项参数在菜单中所处的位置参见（附3）2.3.2自动接收器的参数设定各按钮使用方法同上，各项参数在菜单中所处的位置参见（附2）2.3.3检测器的操作开机自检完后在Signal菜单中填入所选波长、时间常数t，打开灯的开关ON，时间常数t一般设为1秒为佳，然后在Lamp菜单选择好氘灯或卤灯即可运行。紫外检测器面板上的和 键一般调光标， 和键一般调参数。把光标调于区域然后按和键可循环调出另外10个菜单，当把光标用和 键调于其他区域时原先光标所在位置处的调整即已确定。 若运行中更改波长需使用菜单，每行依次填入时间和波长，共有十一行，即一次运行中最多允许有十次波长改变。运行中在流速为零时可扫描接收到的吸收峰，操作步骤如下：1.停止流速；2.打开菜单；3.填入扫描波长范围；4.开启或关闭过滤器，在380nm以下时不可用过滤器，如果波长扫描范围跨越380nm，应分两次扫描；填入扫描速度，一般为3Hz；5.按AUTO-ZERO键清零；6.调光标至go区域按和键开始扫描。2. 4 在确保自动接收臂运行路线上无障碍物时,即可按下泵的 START键，开始进流动相。2. 5待液体从接收臂的管路中流出时，按下收集器的START键开始收集.收集过程中,如需暂停,按下TOP键进入PAUSE (暂停)状态,此时应注意,仍有部分流份会从废液口流出,应注意收集.2. 7 收集完毕后,两次按下收集器的START键停止收集，此时泵受其控制也会停止。2. 8此时即可关闭检测器的电源。2 9将柱子上下两端的进液管与出液管通过双接头直接连接起来,用甲醇或其他溶剂进行冲洗,设置足够长的Delay 时间，以确保管道内无残留.2. 10 此时即可关闭泵及自动接收器的电源并清洁台面。3日常维护及注意事项3. 1系统的日常维护：使用完毕后，应及时拆柱并清洗干净，放入指定的存放地点；台面应保持清洁干净；每次收集完毕后应用流动相冲洗管道，在使用前也应弄清管道中的溶剂组成，用流动相冲洗管道换成即将应用的溶剂系统（不相混溶的系统之间应注意过渡）。当检测器噪音大、灵敏度低时需清洗流动池，清洗时用下列溶剂之一：二十四烷基磺酸钠、1MHCl、1MNaOH、乙醇或丙酮，通过注射器清洗流动池约5分钟，然后用水洗并用氮气冲干，必要时拆下来清洗。3. 2注意事项：装柱时应注意各个连接部位间连接是否紧密，以保证其气密性，这样才会有好的分离效果；开始是由于压力不稳，流速不会很稳定，设定好每份的收集时间后应注意观察，以免流分溢出管外；流动相的体积应充足，以免空气被打入柱子中，造成干柱;设定好各个参数应立即保存，否则收集器会按照上次设定的参数运行。3 3错误处理：发生错误式系统会给出警报，按下选择按钮可使警报声停止，此时需仔细阅读屏幕上的警示内容，再次按下选择开关，可取消该错误，如该错误被取消掉，可继续工作。否则会给出错误代码，