祁丹 降钙素原和白介素-6在新生儿细菌感染疾病中的应用价值.doc

本 科 毕 业 论 文（设 计） 题 目：降钙素原和白介素-6在新生儿细菌感染疾病中 的应用价值 姓 名： 祁丹 学 号： 010214400139 系 别： 检 验 医 学 院 年 级： 2012级 专 业： 检 验 指导教师： 况兴林 实习单位： 重庆市万州三峡中心医院 二一六 年 八 月1成都医学院检验自学考试毕业论文（设计）目 录中文摘要英文摘要 前言11材料与方法1 1.1研究对象1 1.2检测方法、仪器和试剂1 13 统计学处理12结果23讨论24结论45 参考文献56 致谢及诚信声明 61降钙素原和白介素-6在新生儿细菌感染疾病中的应用价值摘 要目的:探讨降钙素原（PCT）和白介素-6（IL-6）在新生儿细菌感染（NBI）中的应用价值。方法:采用电化学发光法对出生72h后56细菌感染患儿和64例非感染者进行PCT和IL-6水平检测，并对两指标的灵敏度和特异度进行了分析。结果:细菌感染组PCT和IL-6的阳性率为100.0%和89.3%,非感染组阳性率为4.7%和0%，两组比较有统计学意义(P0.05)；PCT和IL-6对NBI的灵敏度分别为100.0%（56/56）和89.3%(50/56)，特异度分别为95.3%和100.0%。PCT和IL-6对非感染组的灵敏度分别为4.7%(3/64)和0%(0/64)，特异度分别为95.3%和100.0%。结论: PCT和IL-6对诊断BNI都具有较高的灵敏度和特异度，可作为鉴别BNI与其他感染疾病的有效指标，且与疾病感染的严重程度相关，两者联合检测有助于提高NBI的早期确诊率，指导临床及时、合理地应用抗生素。关键词降钙素原；白介素-6；新生儿细菌感染；电化学发光法；The application value of PCT, IL-6 in the diagnosis of Neonatal Bacterial InfectionAbstract Objective: To discuss the value of PCT and IL-6 in the clinical diagnosis of neonatal bacterial infection (NBI).Methods: There were two groups, 56 patients with NBI (Group A),64 with non-infection group (Group B).We adopted ECLIA to detect the quantity of PCT and IL-6. We also analyzed the sensitivity, specificity and differences of these two methods. Results: The positive rates of PCT and IL-6 in bacterial infection group were statistically significant difference from non-infection group (P0.05).The respectively positive rates of PCT in Group A,B were 100.0%,4.7% ; the IL-6 respectively were89.3 %、0%. The sensitivities of PCT and IL-6 in NBI patients respectively were 100.0% (56/56) and 89.3% (50/56) and the specificities were 95.3% and 100.0%. The sensitivities of PCT and IL-6 non-infection group respectively were 4.7% (3/64) and 0% (0/64) and the Specificities were 95.3% and 100.0% .Conclusion: Our study results suggest that the sensitivity of and the specificity of PCT and IL-6 in the diagnosis of NBI is high and it is closely related with the development of NBI. We also prove that the combined testing of PCT and IL-6 helps to improve the early diagnosis rate, and it is beneficial supplement for current markers.KeywordsProcalcitonin；IL-6； neonatal bacterial infection,；ECLIA；II前 言在新生儿期，发生细菌性感染是很常见，也是引起新生儿死亡的主要原因1。但其临床表现常缺乏特异性，且病原体的检出需要一定的时间，易影响感染性疾病的诊断和治疗，造成严重的不良后果。目前各大医院采用的相关实验室指标：如血细胞计数、C-反应蛋白、血清淀粉样蛋白A、降钙素原（procalcitonin,PCT）以及白介素-6（interleukin-6，IL-6）等是辅助诊断新生儿细菌感染（neonatal bacterial infection,NBI）的重要指标2。其中PCT和白介素-6与细菌的感染密切相关，特别是全身性感染时升高更为明显。本文对56例NBI患儿和64例非感染者血清中的PCT和IL-6进行了回顾性分析，以探讨这两者在NBI诊断中的临床应用价值。现报告如下：1 材料与方法1.1 研究对象 NBI组：NBI确诊患者56例，其中男38例，女18例，年龄22O天，均经过血清学和病原体分离培养确诊；非细菌感染组：非感染患儿64例，其中男42例，女22例，年龄220天；两组均收集于重庆市万州三峡中心医院2015年1月2015年12月住院部。有研究显示，新生儿出生1830h和非感染的早产儿体内PCT均增高；在分娩后48h内，PCT均处于动态变化当中，且与感染与否无关；此后，婴儿体内PCT水平趋于恒定3-4。故选择出生72h后的新生儿为研究对象。1.2 检测方法、试剂和仪器1.2.1 PCT定量测定 采用双抗体夹心二步法，检测仪器为罗氏公司生产的Roche Cobas E601全自动电化学发光分析仪，使用配套的Roche PCT电化学发光试剂盒、校准品和质控品统。操作：录用条形码上机自动检测；检测过程中同时检测质控品，质控品在控为有效。原理：待测样本与生物素化的单克隆PCT抗体以及钌复合物标记的单克隆PCT抗体一起孵育，形成抗原抗体夹心复合物。添加包被链霉亲和素的磁珠微粒进行孵育，复合体与磁珠通过生物素和链霉素的作用结合。将反应液吸入测量池中，通过电磁作用将磁珠吸附在电极表面。未与磁珠结合的物质通过ProCell被去除。给电极加以一定的电压，使复合体化学发光，并通过光电倍增器测量发光强度。Elecsys软件自动通过定标曲线计算得到测量结果。方法学检测线性范围为0.02100ug/l。结果判读：标本浓度值0.5ug/ml为阳性，0.5ug/ml为阴性。1.2.2 IL-6定量测定 采用双抗体夹心法，, 罗氏公司生产的Roche Cobas E601全自动电化学发光分析仪，使用配套的Roche IL-6电化学发光试剂盒、校准品和质控品统。操作：录用条形码上机自动检测；检测过程中同时检测质控品，质控品在控为有效。结果判读：IL-6浓度值100pg/ml为阳性。1.3 统计学处理 定量资料近似正态分布的采用方差分析进行差异比较，非正态分布的采用秩和检验；定性资料以阳性率对其进行描述，组间差异比较采用2检验，不满足2检验条件的采用非参数法。所有分析采用SPSS17.00软件进行处理，以P0.05具有统计学意义。2 结果 120例新生儿中，确诊为NBI的患儿56例，非感染者64例。实验室检测指标中，细菌感染患儿与非感染者相比，PCT和IL-6水平显著增高，差异有统计学意义（P0.05）。PCT和IL-6用中位数（M）表示。表2-1 NBI患儿与非感染患儿PCT和IL-6检测情况（M）指标 NBI患儿（n=56） 非感染患儿（n=64） P值PCT（ng/ml） 2.79(0.6696.91) 0.16(0.030.52) P0.001IL-6（pg/ml） 166.7(42.371037) 18.53(4.6252.8) P0.001 NBI组PCT和IL-6的含量显著地高于非感染组，有显著的统计学差异（P0.5ng/ml) 4.7(3/64) 100.0(56/56)*IL-6(100pg/ml) 0(0/64) 89.3(50/56)*注：PCT和IL-6:*与非感染组比较,P0.001.PCT和IL-6对NBI的诊断价值（%）：NBI组:PCT的灵敏度为100.0%,特异度为95.3%；IL-6的灵敏度为89.3%,特异度为100.0%。非感染组:PCT的灵敏度4.7%,特异度95.3%；IL-6的灵敏度0%,特异度100%。PCT的阳性预测值（PPV）为94.9%,阴性预测值（NPV）为100%；IL-6的阳性预测值（PPV）为100.0%,阴性预测值（NPV）为91.4%。见表2-2。表2-3 PCT和IL-6两项指标对NBI的诊断价值（%） 非感染组 NBI组 项目 灵敏度 灵敏度 特异度 PPV NPVPCT 4.7(3/64) 100(56/56) 95.3(61/64) 94.9 100IL-6 0(0/64) 89.3(50/56) 100(64/64) 100 91.43 讨 论如何合理使用抗生素已经成为全球医疗界的话题。如果有一个指标能及时正确地反映抗生素的治疗是否有效，就能帮助医生快速找到适合每个患者的药物，以及剂量和疗程，迅速控制病情，并且还能缩短治疗天数，节省病人和医院的开支，降低抗生素耐药发生。PCT正是这样一个指标，它的浓度随着细菌感染的病情变化而变化，并且不受其他治疗药物（如糖皮质激素）的影响，因此近年来越来越多的重症监护病房开始监测重症全身感染病人的PCT水平。在新生儿期，细菌感染是引起婴儿死亡的主要原因。虽然呼吸暂停和心动过缓是两个重要的临床诊断指标，但在部分非感染患儿当中，也具有类似的敏感性；而且病原体的检出需要一定的时间，易影响感染性疾病的诊断和治疗，造成严重的不良后果，并且迄今为止，尚未发现理想的感染性标记物具有足够的敏感性和特异性来指导儿科医生使用抗生素。PCT在诊断NBI时的应用价值一直存在争议,这主要是由于在新生儿出生后3d内其生理性变异很大5-6。因此，为了避免干扰，本研究选择了出生 72h后新生儿为研究对象。其中56例NBI患者和64例非感染患者血清进了PCT和IL-6的检测，对此进行回顾性分析以探讨两者对NBI的诊断价值。从实验结果分析中可以看出，NBI患儿PCT和IL-6的阳性率显著高于非感染组 (P0.05)，说明 PCT和IL-6可作为新生儿细菌感染诊断的敏感指标，这与文献报道相符7-8。从检测的阳性率比较可以看出，PCT和IL-6的阳性率均比较高(分别为100.0%和89.3%)，是很佳的联合检测指标。见表2-2。其中降钙素原与抗生素使用的关系见表3-1。（注：下图表PCT结果参考由罗氏公司生产的Roche Cobas E601全自动电化学发光分析仪配套的Roche PCT电化学发光试剂盒所提供）表3-1 降钙素原与使用抗生素的关系PCT水平(ng/ml)细菌感染临床应用与建议应在抗感染开始后第3天、第5天、第7天复测PCTPCT0.5极可能如果PCT水平低于0.25ng/ml,建议停止使用抗生素如果PCT峰值水平很高,则当PCT水平下降超过峰值水平的80-90%时停止使用抗生素0.25PCT0.5很可能如果PCT一直维持在高水平,考虑治疗失败,应调整抗生素 0.1PCT0.25有可能对于下呼吸道感染的患者,以下情况应结合临床考虑使用抗生素：1、呼吸或血流动力学不稳定，存在严惩的合并症，入住ICU。PCT0.1可能性不高2、虽然PCT2的患者，或慢性阻塞性肺气肿（COPD）GOLD和的患者。血清降钙素原(PCT) 是一种无激素活性的降钙素前体，正常生理状态下只由甲状腺C细胞合成，在血浆内含量很少，当严重细菌感染、全身炎性反应和败血症时，PCT可由甲状腺以外组织大量产生，如肝脏中的巨噬细胞、单核细胞、肺和肠道组织的淋巴细胞和神经内分泌细胞。但PCT在真菌、寄生虫感染患者中也存在一定的阳性,因而,NBI对细菌感染的诊断特异性欠佳。同时采用电化学发光法检测PCT的敏感性很高。本实验结果分析显示：PCT在NBI患者和非感染患者中的检测阳性率分别为100.0%和4.7%，进一步证实了这一观点。见表2-2。IL-6是一种功能广泛的多效性细胞因子，机体受炎症刺激后由T细胞、B细胞、单核巨噬细胞及内皮细胞等分泌，如在发生内外伤、外科手术、应激反应、感染以及其他情况的急性炎症反应过程中会快速产生9。本实验结果分析显示,采用电化学发光法检测IL-6对诊断NBI具有较高灵敏度(89.3%)和较高的检测阳性率(89.3%)，从表2-2和表2-3可见。从本文研究结果来看，联合检测PCT、IL-6可能具有重要的指导意义。并且PCT与CRP相比，PCT出现更早、更快，但比IL-6出现晚，峰值更宽，消退更慢。事实上，联合检测PCT后，对NBI的诊断敏感性都有所增加。对于新生儿而言，尤其是早产儿，往往是细菌感染的高发人群，因此联合PCT后，敏感性的增高对及时治疗感染患儿具有重要意义。PCT联合IL-6检测后，NPV也进一步增高，因此有利于及时停止经验性治疗所使用的抗生素，这对于新生儿而言具有非常重要的意义，因为有研究显示随着抗生素使用时间的延长，坏死性小肠结肠炎的风险也大大增加。另一方面，与IL-6和CRP相比，联合PCT检测特异性和PPV有所降低，因此，对于为了降低耐药菌的出现而停止使用抗生素的行为，本研究并无指导意义。但对于新生儿高危人群和那些为了追求高敏感性而非特异性，且紧急情况的疾病而言，可能仍有一定的价值。综上所述， PCT和IL-6在NBI与非感染者的特异性、灵敏度和检测阳性率均有统计学意义(P0.001),表明PCT和IL-6在辅助诊断NBI中有较高的价值，鉴于PCT和IL-6在BNI的诊断中均有着较高的灵敏度和特异度，因此选择联合检测有助于NBI的早期诊断和指导临床及时、合理地应用抗生素。(注：PCT与IL-6仅仅是一个生物学指标，不能单纯依赖PCT与IL-6的检测结果进行临床诊断,所有的临床诊断及治疗策略的制订仍都必须结合患者的临床症状综合判断。)结 论用电化学发光法检测PCT和IL-6在BNI中有较高的灵敏度和特异度，对鉴别新生儿细菌与非细菌感染有较高临床价值。PCT的灵敏度很高且与新生儿细菌感染程度和疾病预后相关, 电化学发光法检测IL-6对诊断NBI具有很高的特异性和灵敏度，两者联合检测有助于提高NBI早期确诊率，以及病情的严重程度，在指导临床及时、合理地应用抗生素中有很大的应用价值。参 考 文 献1陈巧红,葛勤,陈珊珊.降钙素原协同C-反应蛋白和白介素-6检测对新生儿细菌感染的诊断价值J.中国医药导报,2012,9(13):94.2 Laborada G,Rego M,Jain A,et al.Diagnostie value of cytokines and Creactive protein in the first hours neonatal sepsis J . Am J Perinatol , 2003, 20(8): 491-501.3 冯震,邓历.降钙素原在感染性疾病中的临床应用J.中外医学研究,2010,8(20):185.4 董晖,杨颖.血清降钙素原水平检测在感染性疾病诊断中的价值J.医学综述,2010,16(11)：1741-1742.5 Turner D,Hammerman C,Rudensky B,et al.Procalcitonin in preterm in