产酯酵母论文：筛选诱变选育发酵优化复合培养.doc

产酯酵母论文：筛选诱变选育发酵优化复合培养【提示】本文仅提供摘要、关键词、篇名、目录等题录内容。为中国学术资源库知识代理，不涉版权。作者如有疑义，请联系版权单位或学校。【摘要】中国是世界上最古老的酿酒发祥地之一,它有着悠久的历史和深厚的酒文化。中国酒品种繁多,生产工艺独特,质量优异,深受国内外市场的欢迎。在白酒的发酵过程中适当地添加产酯酵母,对于提高各种香型白酒的质量是行之有效的技术措施之一。本课题先从优质白酒曲中筛选出较好的产酯酵母菌株,并对其进行紫外诱变选育,然后对诱变得到的菌株的发酵特性进行了研究。结果如下：本文首先从中温优质酒曲中筛选出11株生香酵母,并对其形态及生理生化特性进行了初步分析,近而确定其种属。通过发酵产酯实验,筛选出产酯较高的菌株。在11株产酯酵母中,产酯最高的菌株是S8,其发酵液总酯含量达到1.78g/L对生香酵母S8菌液经紫外线照射处理后进行平板培养,挑选出直径较大的菌落接种到试管培养,用杜氏发酵管通过产二氧化碳体积进行初筛,再进行发酵总酯复筛获得一株优良菌株Y16,其发酵产总酯量可达3.21g/L原始S8的发酵产总酯量为1.78g/L,诱变后产酯总量提高了75.28%左右,产酯酵母紫外处理的最佳时间为2min。再对该产酯最高的酵母菌株Y16进行发酵条件的优化。以产酯酵母的生理条件为因素,通过单因素实验确定了该酵母菌株最佳产酯培养基的pH为5、酒精添加量为2%,而且静止定期通气培养比振荡培养产酯要高。再选取温度、糖度、发酵时间三因素作响应面分析得出：当培养基中黄豆芽汁浓度为100g/L、温度28、发酵时间为6d时,发酵液中总酯可高达4.033g/L。这些研究的结果对进一步探索产酯酵母的生理生化性能具有一定的借鉴意义。浓香型白酒的主题香味成分是己酸乙酯,但产酯酵母所产酯类大多是乙酸乙酯。通过研究产酯酵母与白酒窖泥中筛选出己酸菌的复合培养得出以下结论：己酸菌能产生大量己酸与酵母所产乙醇在产酯酵母酯化酶的作用下转化成己酸乙酯。而且产酯酵母与己酸菌的接种量的比例为1：2时,效果最为明显,总酯为4.815g/L,己酸乙酯为1.720g/L。其己酸乙酯的产量最高。此结论对浓香型白酒的生产具有一定的研究意义。【关键词】产酯酵母；筛选；诱变选育；发酵优化；复合培养；【篇名】产酯类酵母菌的选育【目录】产酯类酵母菌的选育摘要5-7ABSTRACT7-9第一章 文献综述13-231.1 中国酿酒微生物的起源与发展13-151.1.1 酒曲的起源13-141.1.2 酒曲的分类体系和应用14-151.2 生香酵母的国内外研究现状分析15-201.2.1 生香酵母概述15-171.2.2 生香酵母产生的主要芳香气味物质171.2.3 生香酵母培养的基本条件17-181.2.4 生香酵母发酵液中总酯的检测方法18-191.2.5 生香酵母在白酒中的应用19-201.2.6 生香酵母在葡萄酒生产中的应用研究201.2.7 生香酵母在醋生产中的应用201.2.8 生香酵母在黄酒生产中的应用201.2.9 生香酵母在果汁饮料和香精、香料生产中的应用201.3 产酯酵母配合己酸菌在白酒中的应用20-211.4 酿酒微生物的菌种保藏技术21-221.5 本论文的研究意义与目的22-23第二章 酒曲中生香酵母的分离及生理生化鉴定23-342.1 实验材料与仪器23-252.1.1 研究材料232.1.2 主要实验设备23-242.1.3 主要试剂242.1.4 实验培养基24-252.1.4.1 富集培养基242.1.4.2 筛选培养基242.1.4.3 鉴定培养基24-252.1.4.4 发酵产酯培养基252.2 实验方法25-282.2.1 生香酵母的分离方法252.2.1.1 生香酵母的初筛252.2.1.2 酵母菌的分离复筛252.2.2 酵母菌的鉴定25-262.2.2.1 形态学鉴定25-262.2.2.2 生理学初步鉴定262.2.3 产酯试验262.2.4 发酵26-272.2.5 总酯测定方法27-282.2.5.1 皂化中和滴定法272.2.5.2 气相色谱法(HPLC)27-282.3 结果与讨论28-332.3.1 酵母菌的分离与纯化282.3.2 酵母菌的鉴定28-322.3.2.1 酵母菌菌落形态和显微形态观察28-312.3.2.2 酵母菌生理生化特性结果312.3.2.3 酵母菌发酵情况31-322.3.3 总酯测定结果32-332.4 本章小结33-34第三章 紫外诱变选育高产酯酵母34-413.1 材料与仪器343.1.1 材料与试剂343.1.2 主要仪器343.2 实验方法34-363.2.1 最佳紫外诱变时间的确定34-353.2.2 分离诱变菌株353.2.3 杜氏发酵管初筛353.2.4 产酯酵母复筛353.2.5 总酯测定方法35-363.3 结果与分析36-393.3.1 紫外致死率曲线的制作363.3.2 生香酵母发酵液的产气与总酯关系的探讨36-373.3.3 杜氏管发酵初筛情况37-383.3.4 突变株复筛产酯分析38-393.4 本章小结39-41第四章 生香酵母培养条件的优化41-514.1 实验材料与仪器41-424.1.1 实验材料414.1.2 主要仪器414.1.3 培养基41-424.2 实验方法42-434.2.1 空气对产酯酵母产酯能力的影响424.2.2 各单因素对产酯酵母产酯能力的影响42-434.2.2.1 pH对产酯酵母产酯能力的影响424.2.2.2 豆芽汁浓度对产酯酵母产酯能力的影响424.2.2.3 发酵时间对产酯酵母产酯能力的影响424.2.2.4 酒精度对产酯酵母产酯能力的影响42-434.2.2.5 温度对产酯酵母产酯能力的影响434.2.3 因素水平响应面实验434.2.4 总酯的测定434.3 结果与讨论43-504.3.1 最佳培养方式的确定434.3.2 各单因素对产酯酵母产酯能力的影响43-464.3.2.1 pH对产酯酵母产酯能力的影响43-444.3.2.2 豆芽汁浓度对产酯酵母产酯能力的影响44-454.3.2.3 发酵时间对产酯酵母产酯能力的影响454.3.2.4 酒精度对产酯酵母产酯能力的影响45-464.3.2.5 温度对产酯酵母产酯能力的影响464.3.3 响应面因素和水平的确定及其结果46-504.3.3.1 响应面设计方案及结果46-474.3.3.2 响应面模型的建立与显著性检验47-484.3.3.3 响应面分析图和验证性试验48-504.4 本章小结50-51第五章 生香酵母配合己酸菌的产酯的应用研究51-605.1 材料与试剂51-525.1.1 材料与主要仪器设备515.1.2 主要试剂51-525.1.3 培养基525.2 实验方法52-545.2.1 己酸菌的分离纯化52-535.2.1.1 己酸菌的初筛52-535.2.1.2 己酸菌的纯化535.2.2 己酸菌的培养535.2.3 硫酸铜快速测定法535.2.4 产酯酵母和己酸菌复合培养53-545.2.4.1 种子液的制备535.2.4.2 复合发酵培养53-545.2.5 气相色谱法测