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实验二 药物的抗惊厥作用【实验目的】学习动物惊厥模型的制备方法及抗惊厥药的研究方法。观察抗癫痫药物苯巴比妥钠对动物电惊厥的保护作用和地西泮对士的宁惊厥的保护作用。【实验原理】惊厥系物理、化学或其他刺激所引发的全身骨骼肌不自主的强烈收缩(阵挛型和强直型)。常见的惊厥模型制备有物理方法和化学方法。常用的抗惊厥药包括苯二氮类、巴比妥类和硫酸镁。【实验材料】(一)实验动物:小白鼠,雌雄不限,体重18-22g;(二)药品与仪器苯巴比妥钠溶液,地西泮溶液,士的宁溶液,YSL-9A生理药理电子刺激仪,0.25ml注射器,1ml注射器。一、苯巴比妥钠抗电惊厥作用(一)实验方法调机:将YSL-9A生理药理电子刺激仪开机,选择第八配置,具体参数:电流“4mA”,电压100V。动物筛选:将输出导线前两个鳄鱼夹用生理盐水浸湿,一只夹住小鼠耳跟部,另一只夹住小鼠下唇,放开小鼠,按“输出”按钮,选择发生前肢屈曲、后肢伸直的强直性惊厥的小鼠为合格小鼠,记录下动物惊厥阈值(电压)。如动物未出现惊厥,则再次刺激,如仍未出现惊厥,弃之不用。共需筛选合格小鼠二只备用。实验步骤:将合格小鼠,称重并标记。第一只小鼠腹腔注射生理盐水0.1ml/10g,第二只小鼠腹腔注射5mg/ml的苯巴比妥钠溶液0.1ml/10g,30min后,各只动物以原惊厥阈值给予刺激,记录各动物对电刺激的反应。(二)实验结果:将实验结果填于表中。表:苯巴比妥钠抗电惊厥作用组别剂量(mg/kg)致惊厥阈值(电压)再次通电后的反应生理盐水/苯巴比妥钠(三)注意事项1、电压以能引起动物惊厥为准,不宜过大,以免引起动物死亡。2、通电时两鳄鱼夹不能相互接触,以免短路。3、动物惊厥可以分为5个时期:潜伏期、僵直屈曲期、后肢伸直期、阵挛期、恢复期。(四)讨论:阐述苯巴比妥钠为什么能够抗小鼠电惊厥?(五)结论二、地西泮抗士的宁惊厥作用(一)实验方法取小鼠两只,称重并标记,分为两组,分别腹腔注射生理盐水和地西泮溶液0.1ml/10g。30分钟后依次给每只小鼠皮下注射0.2士的宁0.015ml/10g。观察并记录动物的反应。 (二)实验结果:将实验结果填于表中。表:地西泮对抗士的宁致小鼠惊厥的作用组别剂量(ml)给士的宁后的反应生理盐水/地西泮(三)注意事项1、剂量要准确,时间掌握好。2、皮下注射剂量要准确,注射后要避免药液漏出。3、给药后应保持室内安静,避免刺激实验动物。(四)讨论如果将地西泮用于抗电惊厥而苯巴比妥钠用于抗士的宁惊厥会产生怎样的结果?(五)结论了解: 药物的抗惊厥作用惊厥的定义、病因、症状、分类、治疗用药、造模方法等。1、惊厥系物理、化学或精神性的刺激所引发的全身骨骼肌不自主的强烈收缩(阵挛型和强直型)。常见于小儿高热、破伤风、癫痫大发作、子痫和中枢兴奋药中毒等。临床分为轻微型、局限阵挛型、多灶性阵挛型、强直型、全身肌阵挛型等五种类型。2、人体休息时,一个大脑皮质锥体细胞的放电频率一般保持在110次/秒之间,而在癫痫病灶中,一组病态神经元的放电频率可高达每秒数百次。痫灶细胞群高频重复放电,使其轴突所直接联系的神经元产生较大的突触后电位,从而产生连续传播产生惊厥,直至抑制作用使惊厥发作终止。3、惊厥模型的制备有物理方法和化学方法。化学方法:应用大剂量的化学药物,士的宁兴奋中枢神经系统所有部位,但对脊髓的兴奋作用最为突出,能提高其反射功能,增加肌肉紧张度,引起强直性、反射性及泛化性惊厥。电休克法
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