饮料中6种防腐剂的高效液相色谱法同时测定.doc

饮料中6种防腐剂的高效液相色谱法同时测定摘要：目的:建立高效液相色谱法同时测定饮料中苯甲酸、山梨酸、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯等6种防腐剂的分析方法。方法：样品用水溶解，去除蛋白后过滤待测。检测时以甲醇-乙酸铵（0.02m）为流动相，经梯度洗脱，在238nm波长处进行检测，以外标法定量。结果：6种防腐剂的加标回收率在93.2%103.8%，相关系数0.99960.9999，检出限0.010.03g/kg。结论：本方法简单，快速，灵敏度高，重现性好，可以满足饮料中防腐剂的检测要求。关键词：高效液相色谱法防腐剂 饮料 防腐剂是用于保持食品原有品质和营养价值为目的的食品添加剂，但是有研究表明，食用含过量防腐剂的食品有可能对人体健康产生不利影响。目前，在饮料中常见的添加剂有苯甲酸、山梨酸、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯等，这六种防腐剂均有相应的国标检测方法，但并无同时测定方法。本文利用高效液相色谱对其进行了同时测定，且处理方法简单快速，分析时间短，灵敏度高。1 材料和方法1.1 分析方法1.1.1样品前处理乳饮料和果汁饮料：称取5.00g（精确到0.01g）样品于50ml比色管中，加少量水后分别加入5ml亚铁氰化钾溶液和5ml乙酸锌溶液，再用水定容至刻度，摇匀后离心，取上清液过0.22µm滤膜，待测。碳酸饮料：称取5.00g（精确到0.01g）样品于50ml比色管中，超声脱气后用水定容至刻度，摇匀后过0.22µm滤膜，待测。1.1.2检测条件检测波长：238nm、柱温：30、进样量：10µl、流速：0.7ml/min、采用甲醇和0.02m乙酸铵溶液进行梯度洗脱，洗脱程序为：06min，甲醇10%；711min，甲醇70%；1215min，甲醇10%；2 结果211 检测波长的选择 由苯甲酸、山梨酸、对羟基苯甲酸酯类的紫外吸收光谱图可知，它们的最大吸收波长分别为223.3、254.0、256.4。本方法选定238nm为最测定波长，实验结果表明，在此波长下，各组分分离良好，均可获得较为满意的吸光强度，且加标样品中，样品的溶剂峰和杂质峰对所测定组分不产生干扰。212 流动相的选择由于苯甲酸、山梨酸与对羟基苯甲酸酯类的极性差异较大，因此无法采用等度洗脱在合适的时间将其全部洗脱，本方法用甲醇和0.02m乙酸铵溶液进行梯度洗脱，可以获得满意的分离度，而且检测时间较短，可以在15min内同时检测六种防腐剂。标准品谱图见图1213 方法的线性用超纯水分别配制浓度为0.01mg/ml、0.02 mg/ml 、0.03 mg/ml 、0.05 mg/ml 、0.1 mg/ml的6种防腐剂混合标准溶液，测定峰面积，以峰面积y和溶液浓度x（mg/ml）作标准曲线，得线性回归方程及相关系数r。（见表1）214 方法的灵敏度和检出限在以上方法条件下，以3倍基线噪音确定方法的检出限，得出苯甲酸、山梨酸、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯的检出限分别为0.01g/kg、0.003g/kg、0.01g/kg、0.01g/kg、0.01g/kg、0.01g/kg。215回收率和精密度在空白样品中分别添加三个不同浓度的混合标准溶液，各平行测定六次，计算回收率和精密度。测得苯甲酸、山梨酸、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯的回收率范围分别为93.5%102.9%、94.1%101.5%、95.3%101.2%、94.8%103.8%、95.7%100.6%、93.2%99.3%。精密度分别是1.03%、1.22%、0.92%、0.64%、1.35%、0.86%。22样品分析应用本方法对市场采集的各种饮料样本共30个进行检测，其中碳酸饮料部分检测出