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常用缓冲溶液配制方法 实验 2009-05-29 08:51 阅读1070评论0 字号： 大大 中中 小小 1 甘氨酸盐酸缓冲液（0.05mol/L） X毫升0.2 mol/L甘氨酸+Y毫升0.2 mol/L HCI，再加水稀释至200毫升 pHXYpHXY2.0 2.4 2.6 2.850 50 50 5044.0 32.4 24.2 16.83.0 3.2 3.4 3.650 50 50 5011.4 8.2 6.4 5.0甘氨酸分子量 = 75.07，0.2 mol/L甘氨酸溶液含15.01克/升。 2邻苯二甲酸盐酸缓冲液（0.05 mol/L） X毫升0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾 + 0.2 mol/L HCl，再加水稀释到20毫升 pH(20)XYpH(20)XY2.2 2.4 2.6 2.8 3.05 5 5 5 54.070 3.960 3.295 2.642 2.0223.2 3.4 3.6 3.85 5 5 51.470 0.990 0.597 0.263邻苯二甲酸氢钾分子量 = 204.23，0.2 mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升 3磷酸氢二钠柠檬酸缓冲液 pH0.2mol/L Na2HPO4 （毫升）0.1mol/L 柠檬酸（毫升）pH0.2mol/L Na2HPO4（毫升）0.1mol/L 柠檬酸（毫升）2.2 2.4 2.6 2.8 3.0 3.2 3.4 3.6 3.8 4.0 4.2 4.4 4.6 4.8 5.00.40 1.24 2.18 3.17 4.11 4.94 5.70 6.44 7.10 7.71 8.28 8.82 9.35 9.86 10.3010.60 18.76 17.82 16.83 15.89 15.06 14.30 13.56 12.90 12.29 11.72 11.18 10.65 10.14 9.705.2 5.4 5.6 5.8 6.0 6.2 6.4 6.6 6.8 7.0 7.2 7.4 7.6 7.8 8.010.72 11.15 11.60 12.09 12.63 13.22 13.85 14.55 15.45 16.47 17.39 18.17 18.73 19.15 19.459.28 8.85 8.40 7.91 7.37 6.78 6.15 5.45 4.55 3.53 2.61 1.83 1.27 0.85 0.55Na2HPO4分子量 = 14.98，0.2 mol/L溶液为28.40克/升。 Na2HPO4-2H2O分子量 = 178.05，0.2 mol/L溶液含35.01克/升。 C4H2O7H2O分子量 = 210.14，0.1 mol/L溶液为21.01克/升。 4柠檬酸氢氧化钠-盐酸缓冲液 pH钠离子浓度（mol/L）柠檬酸（克） C6H8O7H2O氢氧化钠(克) NaOH 97%盐酸（毫升） HCl（浓）最终体积（升）2.2 3.1 3.3 4.3 5.3 5.8 6.50.20 0.20 0.20 0.20 0.35 0.45 0.38210 210 210 210 245 285 26684 83 83 83 144 186 156160 116 106 45 68 105 12610 10 10 10 10 10 10 使用时可以每升中加入1克克酚，若最后pH值有变化，再用少量50% 氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。 5柠檬酸柠檬酸钠缓冲液（0.1 mol/L） pH0.1 mol/L 柠檬酸（毫升）0.1 mol/L 柠檬酸钠（毫升）pH0.1 mol/L 柠檬酸（毫升）0.1 mol/L 柠檬酸钠（毫升）3.0 3.2 3.4 3.6 3.8 4.0 4.2 4.4 4.6 4.818.6 17.2 16.0 14.9 14.0 13.1 12.3 11.4 10.3 9.21.4 2.8 4.0 5.1 6.0 6.9 7.7 8.6 9.7 10.85.0 5.2 5.4 5.6 5.8 6.0 6.2 6.4 6.68.2 7.3 6.4 5.5 4.7 3.8 2.8 2.0 1.411.8 12.7 13.6 14.5 15.3 16.2 17.2 18.0 18.6柠檬酸C6H8O7H2O：分子量210.14，0.1 mol/L溶液为21.01克/升。 柠檬酸钠Na3 C6H5O72H2O：分子量294.12，0.1 mol/L溶液为29.41克/毫升。 6乙酸乙酸钠缓冲液（0.2 mol/L） pH(18)0.2 mol/L NaAc (毫升)0.3 mol/L HAc (毫升) pH(18)0.2 mol/L NaAc (毫升)0.3 mol/L HAc (毫升)2.6 3.8 4.0 4.2 4.4 4.60.75 1.20 1.80 2.65 3.70 4.909.25 8.80 8.20 7.35 6.30 5.104.8 5.0 5.2 5.4 5.6 5.85.90 7.00 7.90 8.60 9.10 9.404.10 3.00 2.10 1.40 0.90 0.60Na2Ac3H2O分子量 = 136.09，0.2 mol/L溶液为27.22克/升。 7磷酸盐缓冲液 （1）磷酸氢二钠磷酸二氢钠缓冲液（0.2） pH0.2 mol/L Na2HPO4 (毫升)0.3 mol/L NaH2PO4 (毫升) pH0.2 mol/L Na2HPO4 (毫升)0.3 mol/L NaH2PO4 (毫升)5.8 5.9 6.0 6.1 6.2 6.3 6.4 6.5 6.6 6.7 6.8 6.98.0 10.0 12.3 15.0 18.5 22.5 26.5 31.5 37.5 43.5 49.5 55.092.0 90.0 87.7 85.0 81.5 77.5 73.5 68.5 62.5 56.5 51.0 45.07.0 7.1 7.2 7.3 7.4 7.5 7.6 7.7 7.8 7.9 8.061.0 67.0 72.0 77.0 81.0 84.0 87.0 89.5 91.5 93.0 94.739.0 33.0 28.0 23.0 19.0 16.0 13.0 10.5 8.5 7.0 5.3Na2HPO42H2O分子量 = 178.05，0.2 mol/L溶液为85.61克/升。 Na2HPO42H2O分子量 = 358.22，0.2 mol/L溶液为71.64克/升。 Na2HPO42H2O分子量 = 156.03，0.2 mol/L溶液为31.21克/升。（2）磷酸氢二钠磷酸二氢钾缓冲液（1/15 mol/L） pHmol/L/15Na2HPO4 (毫升)mol/L/15KH2PO4 (毫升)pHmol/L/15Na2HPO4 (毫升)mol/L/15KH2PO4 (毫升)4.92 5.29 5.91 6.24 6.47 6.64 6.81 6.980.10 0.50 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.009.90 9.50 9.00 8.00 7.00 6.00 5.00 4.007.17 7.38 7.73 8.04 8.34 8.67 8.187.00 8.00 9.00 9.50 9.75 9.90 10.003.00 2.00 1.00 0.50 0.25 0.10 0Na2HPO42H2O分子量 = 178.05，1/15M溶液为11.876克/升。 KH2PO4分子量 = 136.09，1/15M溶液为9.078克/升。 8磷酸二氢钾氢氧化钠缓冲液（0.05M） X毫升0.2M K2PO4 + Y毫升0.2N NaOH加水稀释至29毫升pH(20)X (毫升)Y（毫升）pH(20)X (毫升)Y（毫升）5.8 6.0 6.2 6.4 6.6 6.85 5 5 5 5 50.372 0.570 0.860 1.260 1.780 2.3657.0 7.2 7.4 7.6 7.8 8.05 5 5 5 5 52.963 3.500 3.950 4.280 4.520 4.680 9巴比妥钠-盐酸缓冲液（18） pH0.04M巴比妥钠溶液0.2V盐酸pH0.04M巴比妥钠溶液(毫升)0.2N盐酸(毫升)6.8 7.0 7.2 7.4 7.6 7.8 8.0 8.2100 100 100 100 100 100 100 10018.4 17.8 16.7 15.3 13.4 11.47 9.39 7.218.4 8.6 8.8 9.0 9.2 9.4 9.6100 100 100 100 100 100 100 1005.21 3.82 2.52 1.65 1.13 0.70 0.35 巴比妥钠盐分子量=206.18;0.04M溶液为8.25克/升 10Tris盐酸缓冲液（0.05M，25） 50毫升0.1M三羟甲基氨基甲烷（Tris）溶液与X毫升0.1N盐酸混匀后，加水稀释至100毫升。 pHX(毫升)pHX(毫升)7.10 7.20 7.30 7.40 7.50 7.60 7.70 7.80 7.90 8.0045.7 44.7 43.4 42.0 40.3 38.5 36.6 34.5 32.0 29.28.10 8.20 8.30 8.40 8.50 8.60 8.70 8.80 8.9026.2 22.9 19.9 17.2 14.7 12.4 10.3 8.5 7.0三羟甲基氨基甲烷（Tris）HOCH2CH2OHC HOCH2NH2 分子量=121.14; 0. 1M溶液为12.114克/升。Tris溶液可从空气中吸收二氧化碳，使用时注意将瓶盖严。 11硼酸硼砂缓冲液（0.2M硼酸根） pH0.05M硼砂（毫升）0.2M硼砂（毫升）pH0.05M硼砂（毫升）0.2M硼酸（毫升）7.4 7.6 7.8 8.01.0 1.5 2.0 3.09.0 8.5 8.0 7.08.2 8.4 8.7 9.03.5 4.5 6.0 8.06.5 5.5 4.0 2.0硼砂Na2B4O7H2O,分子量=381.43;0.05M溶液（=0.2M硼酸根）含19.07克/升。硼酸H2BO3,分子量=61.84,0.2M溶液为12.37克/升。硼砂易失去结晶水，必须在带塞的瓶中保存。 11硼酸-硼砂缓冲液（0.2M硼酸根） pH0.05M硼砂（毫升）0.2M硼酸（毫升）pH0.05M硼砂（毫升）0.2M硼酸（毫升）7.4 7.6 7.8 8.01.0 1.5 2.0 3.09.0 8.5 8.0 7.08.2 8.4 8.7 9.03.5 4.5 6.0 8.06.5 5.5 4.0 2.0硼砂Na2B4O710H2O,分子量=381.43;0.05M溶液（=0.2M硼酸根）含19.07克/升。硼酸H2BO3，分子量=61.84, 0.2M溶液为12.37克/升。硼砂 易失去结晶水，必须在带塞的瓶中保存。 12甘氨酸氢氧化钠缓冲液（0.05M） X毫升0.2M甘氨酸+Y毫升0.2NnaOH加水稀释至200毫升 pHXYpHXY8.6 8.8 9.0 9.2 9.4 50 50 50 50 50 4.0 6.0 8.8 12.0 16.8 9.6 9.8 10.0 10.4 10.6 50 50 50 50 50 22.4 27.2 32.0 38.6 45.5 甘氨酸分子量=75.07;0.2M溶液含15.01克/升。 13硼砂-氢氧化钠缓冲液（0.05M硼酸根） X毫升0.05M硼砂+Y毫升0.2NNaOH加水稀释至200毫升 pHXYpHXY9.3 9.4 9.6 50 50 50 6.0 11.0 23.0 9.8 10.0 10.1 50 50 50 34.0 43.0 46.0 硼砂Na2B4O710H2O,分子量=381.43;0.05M溶液为19.07克/升。 14碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液（0.1M） Ca2+、Mg2+存在时不得使用 pH0.1MNa2CO3(毫升)0.1MN2HCO3(毫升)20379.16 9.40 9.51 9.78 9.90 10.14 10.28 10.53 10.838.77 9.12 9.40 9.50 9.72 9.90 10.08 10.28 10.571 2 3 4 5 6 7 8 99 8 7 6 5 4 3 2 1Na2CO210H2O分子量=286.2;0.1M溶液为28.62克/升。 N2HCO3分子量=84.0;0.1M溶液为8.40克/升。 15“PBS”缓冲液 PH7.67.47.27.0H2O NaCl Na2HPO4 NaH2PO4 1000 8.5 2.2 0.1 1000 8.5 2.2 0.2 1000 8.5 2.2 0.3 100ml 8.5g 2.2g 0.4g 1、1M Tris-HCl（pH7.4，7.6，8.0） 组份浓度 1 M Tris-HCl 配制量 1L 配置方法 1. 称量121.1gTris置于1L烧杯中。 2. 加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。 3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。 pH值浓HCl 7.4 约70mL 7.6 约60mL 8.0 约42mL 4. 将溶解定容至1L。 5. 高温高压灭菌后，室温保存。 注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差很大，温度每升高1，溶液的pH值大约降低0.03个单位。 2、1.5 M Tris-HCl （pH8.8） 组份浓度 1.5 M Tris-HCl 配制量 1L 配置方法 1.称取181.7gTris置于1L烧杯中。 2. 加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。 3. 用浓盐酸调pH值至8.8。 4. 将溶液定容至1L。 5. 高温高压灭菌后，室温保存。 注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1，溶液的pH值大约降低0.03个单位。 3、10TE Buffer （pH 7.4，7.6，8.0） 组份浓度 100 mM Tris-HCl，10 mM EDTA 配制量 1L 配置方法 1. 量取下列溶液，置于1L烧杯中。 1 M Tris-HCl Buffer（pH7.4，7.6，8.0） 100mL 500 mM EDTA（pH8.0） 20mL 2. 向烧杯中加入约800mL的去离子水，均匀混合。 3. 将溶液定至1L后，高温高压灭菌。 4. 室温保存。 4、3 M 醋酸钠 （pH5.2） 组份浓度 3 M 醋酸钠 配制量 100mL 配置方法 1. 称取40.8gNaOAc?3H2O置于100200mL烧杯中，加入约40mL的去离子水搅拌溶解。 2. 加入冰乙酸调节pH值至5.2。 3. 加入去离子水将溶液定容至100mL。 4. 高温高压灭菌后，室温保存。 5、PBS Buffer 组份浓度 137 mM NaCl，2.7mM KCl，10 mM Na2HPO4，2 mM KH2PO4 配制量 1L 配置方法 1. 称量下列试剂，置于1L烧杯中。 NaCl8 g KCl0.2g Na2HPO41.42 g KH2PO4 0.27g 2. 向烧杯中加入约800 mL的去离子水，充分搅拌溶解。 3. 滴加HCl将pH值调节至7.4，然后加入去离子水将溶液定容至1L。 4. 高温高压灭菌后，室温保存。 注意：上述PBS Buffer中无二价阳离子，如需要，可在配方中补充1mM CaCl2和0.5 mM MgCl2。 6、10 M醋酸铵 组份浓度 10 M醋酸铵 配制量 100mL 配置方法 1. 称量77.1g醋酸铵置于100200 mL烧杯中，加入约30 mL的去离子水搅拌溶解。 2.加去离子水将溶液定容至100mL。 3.使用0.22m滤膜过滤除菌。 4.密封瓶口于室温保存。 注意：醋酸铵受热易分解，所以不能高温高压灭菌。 7、Tris- HCl平衡苯酚 配置方法 1. 使用原料：大多数市售液化苯酚是清亮无色的，无需重蒸馏便可用于分子生物学实验。但有些液化苯酚呈粉红色或黄色，应避免使用。同时也应避免使用结晶苯酚，结晶苯酚必须在160对其进行重蒸馏除去诸如醌等氧化产物，这些氧化产物可引起磷酸二酯键的断裂或导致RNA和DNA的交联等。因此，苯酚的质量对DNA、RNA的提取极为重要，我们推荐使用高质量的苯酚进行分子生物学实验。 2. 操作注意：苯酚腐蚀性极强，并可引起严重灼伤，操作时应戴手套及防护镜等。所有操作均应在通风橱中进行，与苯酚接触过的皮肤部位应用大量水清洗，并用肥皂和水洗涤，忌用乙醇。 3. 苯酚平衡：因为在酸性pH条件下DNA分配于有机相，因此使用苯酚前必须对苯酚进行平衡使其pH值达到7.8以上，苯酚平衡操作方法如下： 液化苯酚应贮存于-20，此时的苯酚呈现结晶状态。从冰柜中取出的苯酚首先在室温下放置使其达到室温，然后在68水浴中使苯酚充分溶解。 加入羟基喹啉（8-Quinolinol）至终浓度0.1。该化合物是一种还原剂、RNA酶的不完全抑制剂及金属离子的弱螯合剂，同时因其呈黄色。有助于方便识别有机相。 加入等体积的1M Tris-HCl（pH8.0），使用磁力搅拌器搅拌15分钟，静置使其充分分层后，除去上层水相。 重复操作步骤。 加入等体积的0.1M Tris-HCl（pH8.0），使用磁力搅拌器搅拌15分钟，静置使其充分分层后，除去上层水相。 重复操作步骤，稍微残留部分上层水相。 使用pH试纸确认有机相的pH值大于7.8。 将苯酚置于棕色玻璃瓶中4避光保存。 8、20（W/V）Glucose 组份浓度 20（W/V）Glucose 配制量 100mL 配置方法 1. 称取20g Glucose置于100200mL烧杯中，加入约80mL的去离子水后，搅拌溶解。 2. 加去离子水将溶液定容至100mL。 3. 高温高压灭菌后，4保存。 9、Solution I （质粒提取用） 组份浓度 25 mM Tris-HCl（pH8.0），10mM EDTA，50mM Glucose 配制量 1L 配置方法 1. 量取下列溶液，置于1L烧杯中。 1M Tris-HCl（pH8.0） 25mL 0.5 M EDTA（pH8.0）20mL 20Glucose（1.11M） 45mL dH2O910mL 2. 高温高压灭菌后，4保存。 3. 使用前每50 mL的Soliution I中加入2mL的RNase A（20mg/mL）。 10、Solution II （质粒提取用） 组份浓度 250mM NaOH，1（W/V）SDS 配制量 500mL 配置方法 1. 量取下列溶液置于500mL烧杯中。 10SDS50mL 2N NaOH 50mL 2. 加灭菌水定容至500mL，充分混匀。 3. 室温保存。此溶液保存时间最好不要超过一个月。 注意：SDS易产生气泡，不要剧烈搅拌。 11、Solution III （质粒提取用） 组份浓度 3M KOAc，5M CH3COOH 配制量 500mL 配置方法 1. 量取下列溶液置于500mL烧杯中。 KOAc147g CH3COOH57.5mL 2. 加入300mL去离子水后搅拌溶解。 3. 加去离子水将溶液定容至500mL。 4. 高温高压灭菌后，4保存。 12、0.5M EDTA (pH8.0) 组份浓度 0.5 M EDTA 配制量 1L 配置方法 1. 称取186.1g Na2EDTA?2H2O，置于1L烧杯中。 2. 加入约800mL的去离子水，充分搅拌。 3. 用NaOH调节pH值值8.0（约20g NaOH）。 注意：pH值至8.0时，EDTA才能完全溶解。 4. 加去离子水将溶液定容至1L。 5. 适量分成小份后，高温高压灭菌。 6. 室温保存。 13、1 M DTT 组份浓度 1 M DTT 配制量 20mL 配置方法 1. 称取3.09g DTT，加入到50mL塑料离心管内。 2. 加20mL的0.01 M 的NaOAc（pH5.2），溶解后使用0.22m滤器过滤除菌。 3. 适量分成小份后，-20保存。 14、10mM ATP 组份浓度 10mM ATP 配制量 20mL 配置方法 1. 称取121mg Na2ATP?3H2O，加入到50mL塑料离心管内。 2. 加20mL的25mM Tris-HCl（pH8.0），搅拌溶解。 3. 适量分成小份，-20保存。 1.乙醇制氢氧化钾试液 可取用乙醇制氢氧化钾液（0.5mol/L）。 2.乙醇制氨试液 取无水乙醇，加浓氨试液使100ml中含NH3 911g，即得。 本液应置橡皮塞瓶中保存。 3.乙醇制溴化汞试液 取溴化汞2.5g，加乙醇50ml，微热使溶解，即得。 本液应置玻璃塞瓶内，在暗处保存。 4.二乙基二硫代氨基甲酸银试液 取二乙基二硫代氨基甲酸银0.25g，加氯仿适量与三乙胺1.8ml，加氯仿至100ml，搅拌使溶解，放置过夜，用脱脂棉滤过，即得。 本液应置棕色玻璃瓶内，密塞，置阴凉处保存。 5.二硝基苯试液 取间二硝基苯2g，加乙醇使溶解成100ml，即得。 6.二硝基苯甲酸试液 取3，5-二硝基苯甲酸1g，加乙醇使溶解成100ml，即得。 二硝基苯肼乙醇试液取2,4-二硝基苯肼1g，加乙醇1000ml使溶解，再缓缓加入盐酸10ml，摇匀，即得。 7.二硝基苯肼试液 取2,4-二硝基苯肼1.5g，加硫酸溶液(12)20ml，溶解后，加水使成100ml，滤过，即得。 8.三硝基苯酚试液（苦味酸？）本液为三硝基苯酚的饱和水溶液。 9.三氯化铁试液 取三氯化铁9g，加水使溶解成100ml，即得。 10.三氯化铝试液 取三氯化铝1g，加乙醇使溶解成100ml，即得。 11.三氯化锑试液 本液为三氯化锑饱和的氯仿溶液。 12.水合氯醛试液 取水合氯醛50g,加水15ml与甘油10ml使溶解，即得。 13.甘油醋酸试液 取甘油、50醋酸与水各等份，混合，即得。 14.甲醛试液 可取用“甲醛溶液”。 15.四苯硼钠试液 取四苯硼钠0.1g，加水使溶解成100ml，即得。 16.对二甲氨基苯甲醛试液 取对二甲氨基苯甲醛0.125g，加无氮硫酸65ml与水35ml的冷混合液溶解后，加三氯化铁试液0.05ml，摇匀，即得。 本液配制后7日即不适用。 17.亚铁氰化钾试液 取亚铁氰化钾1g，加水10ml使溶解，即得。 本液应临用新制。 18.亚硝基铁氰化钠试液取亚硝基铁氰化钠1g，加水使溶解成20ml，即得。 本液应临用新制。 19.亚硝酸钠乙醇试液 取亚硝酸钠5g，加60乙醇使溶解成1000ml，即得。 20.亚硝酸钴钠试液 取亚硝酸钴钠10g，加水使溶解成50ml，滤过，即得。 21.过氧化氢试液 取浓过氧化氢溶液（30），加水稀释成3的溶液，即得。 22.苏丹试液 取苏丹0.01g，加90乙醇5ml溶解后，加甘油5ml，摇匀，即得。 本液应置棕色的玻璃瓶内保存，在2个月内应用。 23.吲哚醌试液 取，吲哚醌0.1g，加丙酮10ml溶解后，加冰醋酸1ml,摇匀，即得。 24.钌红试液 取10醋酸钠溶液12ml，加钌红适量使呈酒红色，即得。 本液应临用新制。 25.间苯三酚试液 取间苯三酚0.5g，加乙醇使溶解成25ml，即得。 本品应置玻璃塞瓶内，在暗处保存。 26.间苯三酚盐酸试液 取间苯三酚0.1g，加乙醇1ml，再加盐酸9ml，混匀。 临用时新制 27.茚三酮试液 取茚三酮2g，加乙醇使溶解成100ml，即得。 28.钒酸铵试液 取钒酸铵0.25g，加水使溶解成100ml，即得。 29.变色酸试液 取变色酸钠50mg，加硫酸与水的冷混合液(9:4)100ml使溶解，即得。 本液应临用新制。 30.草酸铵试液 取草酸铵3.5g，加水使溶解成100ml，即得。 31.茴香醛试液 取茴香醛0.5ml，加醋酸50ml使溶解，加硫酸1ml，摇匀，即得。 本液应临用新制。 32.钨酸钠试液 取钨酸钠25g，加水72ml溶解后，加磷酸2ml，摇匀，即得。 33.品红亚硫酸试液 取碱式品红0.2g，加热水100ml溶解后,放冷加亚硫酸钠溶液(110)20ml、盐酸2ml，用水稀释至200ml，加活性炭0.1g，搅拌并迅速滤过，放置1小时以上，即得。 本液应临用新制。 34.香草醛试液 取香草醛0.1g，加盐酸10ml使溶解，即得。 香草醛硫酸试液取香草醛0.2g，加硫酸10ml使溶解，即得。 35.氢氧化钙试液 取氢氧化钙3g，置玻璃瓶内，加水1000ml，密塞。时时猛力振摇，放置1小时，即得。用时倾取上层的清液。 36.氢氧化钠试液 取氢氧化钠4.3g，加水溶解成100ml，即得。 37.氢氧化钡试液 取氢氧化钡，加新沸过的冷水使成饱和溶液，即得。 本液应临用新制。 38.氢氧化钾试液 取氢氧化钾6.5g，加水使溶解成100ml，即得。 39.重铬酸钾试液 取重铬酸钾7.5g，加水使溶解成100ml，即得。 40.重氮对硝基苯胺试液 取对硝基苯胺0.4g，加稀盐酸20ml与水40ml使溶解，冷却至15，缓缓加入10亚硝酸钠溶液,至取溶液1滴能使碘化钾淀粉试纸变为蓝色，即得。 本液应临用新制。 41.重氮苯磺酸试液 取对氨基苯磺酸0.1g，加10氢氧化钠溶液2ml,使溶解，加稀盐酸20ml与0.1mol/L亚硝酸钠溶液6ml,搅拌1分钟，加脲50mg，继续搅拌5分钟，即得。 本液应临用新制。 42.盐酸羟胺试液 取盐酸羟胺3.5g，加60乙醇使溶解成100ml，即得。 43.钼硫酸试液 取钼酸铵0.1g，加硫酸10ml使溶解，即得。 44.钼酸铵试液 取钼酸铵10g，加水使溶解成100ml，即得。 45.钼酸铵硫酸试液 取钼酸铵2.5g，加硫酸15ml，加水使溶解成100ml，即得。 本液配制后两周，即不适用。 46.铁氰化钾试液 取铁氰化钾1g，加水10ml使溶解，即得。 本液应临用新制。 47.氨试液 取浓氨溶液400ml，加水使成1000ml，即得。 48.浓氨试液 可取用“浓氨溶液”。 49.氨制硝酸银试液 取硝酸银1g，加水20ml溶解后，滴加氨试液，随加随搅拌，至初起的沉淀将近全溶，滤过，即得。 本液应置棕色瓶内，在暗处保存。 50.氨制氯化铜试液 取氯化铜22.5g，加水200ml溶解后，加浓氨试液100ml,摇匀，即得。 51.高锰酸钾试液 本液为0.02mol/L高锰酸钾溶液。 52.高氯酸试液 取70高氯酸13ml，加水500ml,用70高氯酸精确调至pH0.5,即得。 53.高氯酸铁试液 取70高氯酸10ml，缓缓分次加入铁粉0.8g，微热使溶解，放冷，加无水乙醇稀释至100ml，即得。 用时取上液20ml，加70高氯酸6ml，用无水乙醇稀释至500ml。 54.萘酚试液 取15的萘酚乙醇溶液10.5ml，缓缓加硫酸6.5ml,混匀后再加乙醇40.5ml及水4ml，混匀，即得。 55.硅钨酸试液 取硅钨酸10g，加水使溶解成100ml，即得。 56.硝铬酸试液 (1) 取硝酸10ml，加入100ml水中，混匀。 (2) 取三氧化铬10g，加水100ml使溶解。 用时将二液等量混合，即得。 57.硝酸汞试液 取黄氧化汞40g，加硝酸32ml与水15ml使溶解，即得。 本液应置玻璃塞瓶内，在暗处保存。 58.硝酸银试液 本液为0.1mol/L硝酸银溶液。 59.硫化氢试液 本液为硫化氢的饱和水溶液。 本液置棕色瓶内，在暗处保存。本液如无明显的硫化氢臭，或与等容的三氯化铁试液混合时不能生成大量的硫黄沉淀，即不适用 60.硫化钠试液 取硫化钠1g，加水使溶解成10ml，即得。 本液应临用新制。 61.硫代乙酰胺试液 取硫代乙酰胺4g，加水使溶解成100ml,置冰箱中保存。临用前取混合液（由1mol/L氢氧化钠溶液15ml、水5.0ml及甘油20ml组成）5.0ml，加上述硫代乙酰胺溶液1.0ml，置水浴上加热20秒钟，冷却，立即使用。 62.硫脲试液 取硫脲10g，加水使溶解成100ml，即得。 63.硫氰酸汞铵试液 取硫氰酸铵5g与二氯化汞4.5g，加水使溶解成100ml，即得。 64.硫氰酸铵试液 取硫氰酸铵8g，加水使溶解成100ml，即得。 65.硫酸亚铁试液 取硫酸亚铁结晶8g，加新沸过的冷水100ml使溶解，即得。 本液应临用新制。 66.硫酸汞试液 取黄氧化汞5g，加水40ml后，缓缓加硫酸20ml，随加随搅拌，再加水40ml，搅拌使溶解，即得。 67.硫酸铜试液 取硫酸铜12.5g，加水使溶解成100ml，即得。 68.硫酸镁试液 取未风化的硫酸镁结晶12g，加水使溶解成100ml，即得。 69.紫草试液 取紫草粗粉10g，加90乙醇100ml，浸渍24小时后，滤过，滤液中加入等量的甘油，混合，放置2小时，滤过，即得。 本液应置棕色玻璃瓶内，在2个月内应用。 70.氯试液 本液为氯的饱和水溶液。 本液应临用新制。 71.氯化亚锡试液 取氯化亚锡1.5g，加水10ml与少量的盐酸使溶解，即得。 本液应临用新制。 72.氯化金试液 取氯化金1g，加水35ml使溶解，即得。 73.氯化钙试液 取氯化钙7.5g，加水使溶解成100ml，即得。 74.氯化钠明胶试液 取白明胶1g与氯化钠10g，加水100ml，置不超过60的水浴上微热使溶解。 本液应临用新制。 75.氯化钡试液 取氯化钡的细粉5g，加水使溶解成100ml，即得。 76.氯化铂试液 取氯铂酸2.6g，加水使溶解成20ml，即得。 77.氯化铵试液 取氯化铵10.5g，加水使溶解成100ml，即得。 78.氯化铵镁试液 取氯化镁5.5g与氯化铵7g，加水65ml溶解后，加氯试液35ml，置玻璃瓶内，放置数日后，滤过，即得。 本液如显浑浊，应滤过后再用。 79.氯化锌碘试液 取氯化锌20g,加水10ml使溶解，加碘化钾2g溶解后,再加碘使饱和,即得。 本液应置棕色玻璃瓶内保存。 80.氯酸钾试液 本液为氯酸钾的饱和硝酸溶液。 81.稀乙醇 取乙醇529ml，加水稀释至1000ml，即得。 本液在20时含C2H5OH应为49.550.5(ml/ml)。 82.稀甘油 取甘油33ml，加水稀释使成100ml,再加樟脑一小块或液化苯酚1滴,即得。 83.稀盐酸 取盐酸234ml，加水稀释至1000ml，即得。 本液含HCl应为9.510.5。 84.稀硝酸取硝酸105ml，加水稀释至1000ml，即得。 本液含HNO3应为9.510.5。 85.稀硫酸 取硫酸57ml，加水稀释至1000ml，即得。 本液含H2SO4应为9.510.5。 86.稀醋酸 取冰醋酸60ml，加水稀释至1000ml，即得。 87.碘试液 本液为0.1mol/L碘液。 碘化汞钾试液取二氯化汞1.36g,加水60ml使溶解，另取碘化钾5g，加水10ml使溶解，将二液混合，加水稀释至100ml，即得 88.碘化钾试液 取碘化钾16.5g，加水使溶解成10