生物化学实验规程.doc

CDFY/ZY-JWC-SYGC03生化实验指导书1、蛋白质的沉淀反应操作规程操作流程一、实验目的：沉淀蛋白质二、实验准备：1、实验器材：试管、试管架、滴瓶、漏斗、恒温水浴箱 2、实验试剂：5%蛋白质、饱和（NH4 ）2SO4、水、10%CUSO4、1%乙酸、3%AgNO3、10%醋酸、10%NaOH3、抄写板书三、实验步骤：1、（1）取一试管、加入20滴5%蛋白质溶液及20滴饱和（NH4）2SO4摇匀， 有蛋白质析出，此为何种蛋白质？ （2）将上试管内容物过滤，滤液加固体（NH4）2SO4使之达到饱和，注意 边加边摇。此时析出的蛋白质为何种蛋白质？ （3）取上混浊液加适量水，观察是否复溶？2、取试管4支，按下表操作： 管号 试剂 （滴） 1 2 3 4 5%蛋白质溶液 5 5 5 51% 乙酸 2 210%硫酸酮 3 3 3%硝酸银 3 3 3、（1）、取试管4支，编号，按下表操作： 管号试剂（滴） 1 2 3 4 5%蛋白质溶液 20 20 20 201% 醋酸 1 10% 醋酸 10 10% NaOH 10 （2）、将4支试管同时放入沸水浴中加热，观察并记录各试管蛋白质出现的现象，解释变化原因。（3）、取出试管，冷却后于第三试管中慢慢滴入10%NaOH溶液，并观察现象。（4）、向第四管中慢慢滴入10%醋酸，并观察现象。四、实验结束：清洗清点器械、打扫实验室、关好水电门窗。实验准备加好试剂混匀加热观察现象判断结果实验结束生物化学实验规程生化实验指导书2、琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制操作规程操作流程一、实验目的：验证竞争性抑制作用二、实验准备：1、实验器材：食物搅拌器、漏斗、试管、试管架、纱布、恒温水浴箱、滴瓶 、滴管 2、实验试剂：肌肉匀浆、0.2mol琥珀酸、0.02mol琥珀0.2mol丙二酸、0.02mol丙二酸、液体石蜡、甲烯兰、蒸馏水3、实验标本：瘦精肉4、抄写板书三、实验步骤：1、 肌肉提取液的制备2、 取试管4支，编号，按下表操作： 管号试剂（滴） 1 2 3 4 肌肉提取液 20 20 20 200.2mol琥珀酸 10 10 10 -0.02mol琥珀酸 - - - 100.2mol丙二酸 - 10 - 100.02mol丙二酸 - - 10 -蒸馏水 10 - - -甲烯兰 4 4 4 4 3、 将上述各管摇匀，于液面上加液体石蜡15滴，放37水浴中保温，随时比较，观察各管颜色变化，记录各管退色时间及顺序。四、实验结束：清洗清点器械、打扫实验室、关好水电门窗。实验准备加好试剂混匀加液体石蜡37度水浴加热记录各客裉色时间及先后顺序实验结束生化实验指导书3、血糖的测定操作规程操作流程一、实验目的：测定血浆里面血糖的含量二、实验准备：1、实验器材：试管、试管架、试管夹、水浴锅、刻度吸量管、洗耳球2、实验试剂：邻甲苯胺试剂、葡萄糖标准应用液3、实验标本：血浆4：抄写板书三、实验步骤：1、取干燥试管3支，编号，按下表操作： 试剂 管号 空白管 测定管 标准管 血浆 0.1ml葡萄糖标准液 0.1ml蒸馏水0.1ml 邻甲苯胺试剂5.0ml5.0 ml 5.0ml 2、混匀各管后置沸水浴中，加热15分钟后取出，用冷水冷却。3、在波长680钠米处比色测定，以空白管调零，读取和管光密度。计算：血糖值（mmol/l）=测定管光密度/标准管光密度*5.55四、实验结束：清洗清点器械、打扫实验室、关好水电门窗。实验准备加好试剂混匀加热15分钟取出测定吸光度，计算出结果实验结束生化实验指导书4、血清尿素氮的测定操作规程操作流程一、实验目的：测定血清里面尿素的含量二、实验准备：1、实验器材：试管、试管架、恒温水浴箱、722型分光光度计、移液 管、试管夹2、实验试剂：尿素氮试剂、1：5血清、2%二乙酰一肟液、尿素氮标准应用液3、实验标本：血清或血浆4、抄写板书三、实验步骤：1、取试管3支，按下表操作： 管号试剂（ml） 测定管 标准管 尿素氮标准应用 - 0.11：5稀释血清 0.1 -尿素氮试剂 5.0 5.02%二乙酰一肟液 0.5 0.5 2、混匀,置沸水浴中煮沸10分钟后用冷水冷却5分钟,在波长540nm处比色测定,以空白管调零.计算：血清尿素氮含量=测定管吸光度/标准管吸光度*0.7*5 （mmol/l）四、实验结束：清洗清点器械、打扫实验室、关好水电门窗。实验准备加好试剂混匀加热15分钟取出冷却，测定吸光度计算出结果实验结束生化实验指导书5、血清丙氨酸氨基转移酶的测定操作规程操作流程一、实验目的：测定血清里面丙氨酸氨基转移酶的单位二、实验准备：1、实验器材：试管、试管架、水浴锅、刻度吸量管、洗耳球2、实验试剂：PH7.4磷酸盐缓冲液、SGPT基质液、丙酮酸标准液、2，4-二硝基苯肼溶液、氢氧化钠溶液3、实验标本：血清或血浆4、抄写板书三、实验步骤：1、取试管2支，按下表操作： 管别 试剂（ ml） 测定管 对照管 血清 0.1 0.1ALT基质液 0.5 -置37水浴中保温30分钟2，4-二硝基苯肼 0.5 0.5ALT基质液 - 0.5置37水浴中保温20分钟0.4N NaOH 5 5 2、混匀，10分钟后在505nm波长处比色，用蒸馏水调零，测定管光密度减去对照管光密度，再查标准曲线求出转氨酶的单位。3、查标准曲线，查出血清里