吴茱萸与密楝果实中脂肪酸成分的GC_MS分析.pdf

2009 Vol 30 No 10食品科学 分析检测162 吴茱萸与密楝果实中脂肪酸成分的G C MS 分析 赵 桦 1 田光辉2 宫海明1 3 1 陕西理工学院生物科学与工程学院 陕西 汉中 723000 2 陕西理工学院化学与环境科学学院 陕西 汉中 723000 3 甘肃农业大学生命科学技术学院 甘肃 兰州 730070 摘 要 采用索氏提取法提取芸香科植物吴茱萸和密楝果实的脂溶性成分 对其极性成分经甲酯化处理后用气相 色谱 质谱联用技术 GC MS 分离和鉴定 运用面积归一化法确定各个成分的相对百分含量 从吴茱萸果实脂肪油 中鉴定出 45 种脂肪酸 其中有 14 种不饱和脂肪酸 主要种类有 十四碳二烯酸 13 626 亚油酸 13 992 亚麻酸 10 153 十四碳三烯酸 4 603 反式 油酸 2 207 饱和脂肪酸31 种 主要种类有 棕榈酸 15 506 壬二酸 5 363 异 十七酸 3 82 硬脂酸 3 306 阿魏酸 2 909 等 从密楝果实脂肪油中鉴 定出35 种脂肪酸 占其极性脂溶性成分的90 其中有11 种不饱和脂肪酸 主要种类有 十四碳二烯酸 29 818 亚油酸 9 25 亚麻酸 6 699 反 十六碳 9 烯酸 2 736 顺 十六碳 9 烯酸 2 717 等 饱和脂肪酸 24 种 主要种类有 棕榈酸 16 411 阿魏酸 2 139 硬脂酸 2 134 m 香豆酸 1 567 香草酸 1 475 等 结果表明 吴茱萸和密楝果实中含有多种重要的脂肪酸 在人体营养 医疗保健等方面具有一定开发应用价值 关键词 吴茱萸 密楝 脂肪酸 GC MS GC MS Analysis of Fatty Acid Compositions in Fruits of Evodia rutaecarpa Benth and E lenticellata Huang ZHAO Hua1 TIAN Guang hui2 GONG Hai ming1 3 1 School of Biological Science and Engineering Shaanxi University of Technology Hanzhong 723000 China 2 School of Chemical and Environmental Sciences Shaanxi University of Technology Hanzhong 723000 China 3 College of Life Science and Technology Gansu Agricultural University Lanzhou 730070 China Abstract The liposoluble components were extracted from the fruits of Evodia rutaecarpan Benth and Evodia lenticellata Huang by Soxhlet extraction respectively Their polar components were identified and determined by gas chromatography mass spectrometry GC MS after methyl esterification treatment and the relative percentage of each component was con firmed by peak area normalization method Total 45 kinds of fatty acid including 14 unsaturated fatty acids and 31 saturated fatty acids were identified from fruit oil of E rutaecarpa Benth The main components of unsaturated fatty acids were tetradecdienoic acid 13 626 9 12 octadecadienoic acid 13 992 9 12 15 octadecatrienoic acid 10 153 tetradectrienoic acid 4 603 and Z 9 octadecenoic acid 2 207 etc While the main components of saturated fatty acids were hexade canoic acid 15 506 nonanedioic acid 5 363 isoheptadecanoic acid 3 82 octadecanoic acid 3 306 and ferulic acid 2 909 etc Total 35 kinds of fatty acid including 11 unsaturated fatty acids and 24 saturated fatty acids were identified from the fruit oil of E lenticellata Huang The main components of unsaturated fatty acids were tetradecdienoic acid 29 818 9 12 octadecadienoic acid 9 25 9 12 15 octadecatrienoic acid 6 699 Z 9 hexadecenoic acid 2 736 and E 9 hexadecenoic acid 2 717 etc While the main components of saturated fatty acids were hexadecanoic acid 16 411 erulic acid 2 139 octadecanoic acid 2 134 m coumaric acid 1 567 and vinillic acid 1 475 etc It was shown that there are some important fatty acids in the fruits of E rutaecarpa Benth and E lenticellata Huang and both Evodia rutaecarpa Benth and Evodia lenticellata Huang have a potential development and application value in food nutrition and health care Key words Evodia rutaecarpa Benth Evodia lenticellata Huang fatty acid GC MS 中图分类号 Q946 8 文献标识码 A 文章编号 1002 6630 2009 10 0162 04 收稿日期 2008 08 12 基金项目 陕西省自然科学基金项目 2008SJ08ZT02 7 陕西省教育厅专项科研计划项目 07JK214 作者简介 赵桦 1957 男 教授 硕士 主要从事药用植物研究 E mail zhaohuahz 163 分析检测食品科学2009 Vol 30 No 10 吴茱萸 Evodia rutaecarpa Beth 为芸香科吴茱萸属 植物 成熟果实入药 主要分布于我国长江流域 吴 茱萸又名无萸 茶辣 吴辣 气辣子 米辣子等 密楝为吴茱萸属密楝 E lenticellata Huang 成熟果实 1 2 其果实民间入药 称为小花吴茱萸 主要分布于我国 陕西南部和四川等地 吴茱萸是一种常用温中散寒药 含有多种有效成分 有多种药理作用 3 始载于 神农 本草药 近年来国内外学者对吴茱萸作了许多研究工 作 发现生物碱类化合物是吴茱萸的主要有效成分 3 近年来 利用气相色谱 质谱联用技术 GC MS 对药用植 物的脂溶性成分进行了一些研究 4 6 但有关吴茱萸和密 楝脂肪酸成分的研究尚未见文献报道 本实验拟采用 GC MS联用技术 对吴茱萸和密楝果实中的脂肪酸成分 进行较为全面的分析 比较研究 以期为吴茱萸属植 物资源的综合开发利用提供科学依据 1材料与方法 1 1材料与试剂 吴茱萸为贵州产吴茱萸干燥果实 2006 年产 密楝 产自陕西汉中 为吴茱萸属密楝成熟果实 2006 年产 均经过汉中药检所彭强主任药师鉴定 乙醚 甲醇等均为国产分析纯 水为超纯水 1 2仪器与设备 GC6890N MSD5973N型气相色谱 质谱联用仪 美 国安捷伦科技有限公司 HP 5 色谱柱 30m 0 25mm 0 25 m 美图 JandW 公司 索氏提取器 SL202N 型 药物电子天平 上海明桥精密科学仪器有限公司 FZ102 微型植物粉碎机 河北黄骅市中兴有限责任公司 PYX DHS 35X40型隔水式电热恒温培养箱 上海跃进医疗器 械 厂 1 3方法 1 3 1GC MS分析条件 GC 汽化室温度250 色谱柱为 HP 5 弹性石英毛 细管柱 30m 0 25mm 0 25 m 以4 min 的升温 速率由 80 程序升温至 290 恒温 30min 载气为 99 999 高纯氦气 MSD 离子源为 EI 源 离子温度为 230 电子轰击能量 70eV 1 3 2吴茱萸和密楝脂溶性成分提取 分别将 60 干燥的吴茱萸果实和密楝果实粉碎后过 40 目筛 各自精密称取两份20 00g 粉末置于索氏提取器 中 以乙醚为溶剂 40 回流提取 8h 蒸馏回收乙醚溶 剂 得淡绿色具特殊气味的清亮油状液体粗脂肪油分别 为 2 1g 和 2 58g 产率分别为 10 5 和 12 9 1 3 3吴茱萸和密楝脂溶性物质的柱层析分离 分别对吴茱萸和密楝脂溶性物质进行柱层析分离 层析柱填充物为硅胶 氧化铝 3 1 W W 用三种洗脱剂 进行洗脱 得到三种馏分 正己烷洗脱非极性馏分 二氯甲烷洗脱弱极性馏分 甲醇洗脱极性馏分 在吴 茱萸脂溶性成分中 极性馏分占66 6 非极性和弱极 性成分占33 4 在密楝脂溶性成分中 极性馏分占55 6 非极性和弱极性成分占 44 4 1 3 4样品甲酯化处理 对吴茱萸和密楝的极性化合物进行甲酯化处理 用 20 三氟化硼 BF3 的甲醇溶液 温度 50 甲酯化 24h 后经分离BF3 萃取脂肪酸甲脂化合物 待做 GC MS 分析 7 2结果与分析 2 1吴茱萸和密楝果实中脂肪酸的种类与含量 经 GC MS 分离和分析 分别得到吴茱萸和密楝果 实脂肪酸成分的总离子流图 如图 1 2 通过检索美 国NIST02L 谱图库 并结合标准质谱图确认其成分 同 时运用峰面积归一化法通过G170LBA化学工作站数据处 理系统 求得各脂肪酸成分的相对百分含量 分析结 果如表 1 图1 吴茱萸果实中脂肪酸G C M S 总离子流图 Fig 1 TIC chromatogram of fatty acids in fruit of Evodia rutaecarpa Benth 90 80 70 60 50 40 30 20 10 51015202530354045 相对丰度 时间 min 从吴茱萸果实脂肪油中鉴定出45 种脂肪酸 其中有 14 种不饱和脂肪酸 含量占其脂肪酸总量的49 167 主 要种类有 十四碳二烯酸 13 626 亚油酸 13 992 图2 密楝果实中脂肪酸G C M S 总离子流图 Fig 2 TIC chromatogram of fatty acids in fruit of E lenticellata Huang 90 80 70 60 50 40 30 20 10 51015202530354045 相对丰度 时间 min 2009 Vol 30 No 10食品科学 分析检测164 化合物名称 保留时间 min 分子式分子量 相对含量 中文名称英文名称吴茱萸密楝 4 癸烯酸 甲酯 4 Decenoic acid methyl ester9 437C11H20O21840 214 2 甲氨基 苯甲酸 甲酯 2 methyl amino Benzoic acid methyl ester12 485C9H11O2165 0 172 9 羰基 壬酸 甲酯 9 oxo Nonanoic acid methyl ester13 193C10H18O31861 427 辛二酸 二甲酯 Octanedioic acid dimethyl ester13 575C10H18O42020 7170 177 对羟基苯甲酸 甲酯 Methylparaben14 581C8H8O31520 761 甲撑基 八烷桥环 3 3 0 甲酸 甲酯 exo Bicyclo 3 3 0 octane 2 15 116C11H16O21802 064 carboxylic acid 4 methylene methyl ester cis 10 11 环丙 十一烷酸 甲酯 Cyclopropanenonanoic acid methyl ester15 338C13H24O22121 1841 101 香草酸 甲酯 Vinillic acid methyl ester15 692C9H10O41820 3791 475 正十二烷酸 月桂酸 甲酯 Dodecanoic acid methyl ester15 755C13H26O22141 345 10 羰基癸酸 羊蜡酸 甲酯 10 Oxodecanoic acid methyl ester16 136C11H20O32000 139 壬二酸 二甲酯 Nonanedioic acid dimethyl ester16 539C11H20O42165 3631 472 癸二酸 二甲酯 Decanedioic acid dimethyl ester19 302C12H22O42300 7160 350 十四碳二烯酸 甲酯 Tetradecdienoic acid methyl ester20 406C15H26O223813 62629 818 十四碳三烯酸 甲酯 Tetradectrienoic acid methyl ester20 531C15H24O22364 6031 870 十四碳烯酸 十四碳麻酸 甲酯 Tetradecenoic acid methyl ester20 94C15H28O22400 216 十四碳酸 肉豆蔻酸 甲酯 Methyl tetradecanoate21 308C15H30O22421 0990 598 十一碳二酸 二甲酯 Undecanedioic acid dimethyl ester21 996C13H24O42440 527 P 香豆酸 草木酸 甲酯 P Coumaric acid methyl ester22 725C10H10O31781 686 m 香豆酸 草木酸 甲酯 m Coumaric acid methyl ester22 836C10H10O2178 1 567 异 十五碳酸 甲酯 i Pentadecanoic acid methyl ester23 155C16H32O22560 195 十五碳烯酸 甲酯 Pentadecenoic acid methyl ester23 474C16H30O22540 191 十五碳酸 甲酯 Pentadecanoic acid methyl ester23 905C16H32O22560 2710 466 阿魏酸 甲酯 Ferulic acid methyl ester24 453C11H12O42082 9092 139 十六碳 7 10 二烯酸 甲酯 7 10 Hexadecadienoic acid methyl ester25 557C17H30O22660 6922 624 反式 十六碳 9 烯酸 甲酯 Z 9 Hexadecenoic acid methyl ester 25 869C17H32O22680 7542 736 顺式 十六碳 9 烯酸 甲酯 E 9 Hexadecenoic acid methyl ester 26 119C17H32O22681 2712 717 棕榈酸 甲酯 Hexadecanoic acid methyl ester26 515C17H34O227015 50616 411 异 十七碳酸 甲酯 i Heptadecanoic acid methyl ester28 181C18H36O22843 8200 647 十七碳酸 甲酯 Heptadecanoic acid methyl ester28 827C18H36O22841 0490 470 11 甲氧基 十六碳酸 甲酯 Methyl 11 methoxyhexadecanoate29 75C18H36O3300 0 292 亚麻酸 甲酯 Z Z Z 9 12 15 Octadecatrienoic acid methyl ester30 618C19H32O229210 1536 699 亚油酸 甲酯 Z Z 9 12 Octadecadienoic acid methyl ester30 479C19H34O229413 9929 250 反式 油酸 甲酯 Z 9 Octadecenoic acid methyl ester30 722C19H36O22962 2070 540 顺式 油酸 甲酯 E 9 Octadecenoic acid methyl ester 30 896C19H36O22960 5700 518 硬脂酸 甲酯 Octadecanoic acid methyl ester31 166C19H38O22983 3062 134 亚油酸 乙酯 Z Z 9 12 Octadecadienoic acid ethyl ester31 847C20H36O23080 459 十九烯酸 甲酯 Nonadecenoic acid methyl ester32 062C20H38O23100 219 共轭亚油酸 甲酯 9 11 Octadecadienoic acid methyl ester32 458C19H34O2294 0 136 异构 十九碳酸 甲酯 i Nonadecanoic acid methyl ester32 694C20H40O23120 246 十九碳酸 甲酯 Nonadecanoic acid methyl ester33 312C20H40O23120 3040 147 十六碳二酸 二甲酯 Hexadecanedioic acid dimethyl ester33 909C18H34O43141 3900 353 11 花生烯酸 甲酯 11 Eicosenoic acid methyl ester34 839C21H40O2324 0 151 花生酸 二十碳酸 甲酯 Eicosanoic acid methyl ester35 436C21H42O23261 2930 684 二十一碳酸 甲酯 Heneicosanoic acid methyl ester37 463C22H44O23400 3790 245 二十二碳酸 甲酯 Docosanoic acid methyl ester39 435C23H46O23541 2090 753 二十三碳酸 甲酯 Tricosanoic acid methyl ester41 316C24H48O23680 4600 306 二十四碳酸 甲酯 Tetracosanoic acid methyl ester43 142C25H50O23820 7070 623 二十五碳酸 甲酯 Pentacosanoic acid methyl ester44 898C26H52O23960 1620 171 二十六碳酸 甲酯 Hexacosanoic acid methyl ester46 606C27H54O24100 1060 187 二十七碳酸 甲酯 Heptacosanoic acid methyl ester48 251C28H56O24240 115 表1 吴茱萸和密楝果实中脂肪酸成分及相对含量 Table 1 Fatty acids constituents and relative contents in the fruits of E rutaecarpa Benth and E lenticellata Huang 注 所有待测组分径甲酯化或乙酯化才能测出 165 分析检测食品科学2009 Vol 30 No 10 为 16 411 2 139 2 134 和 1 472 吴茱萸和密楝果实脂肪酸中含量较高的不饱和脂肪 酸 如亚油酸 亚麻酸 油酸都具有十分重要的 生物学活性 有益于人体健康 它们在降低血液中胆 固醇的含量 预防高血压和动脉粥状硬化 改善心脑 血管疾病方面具有明显效果 4 8 9 同时 吴茱萸和密 楝果实脂肪酸中含有一些重要的饱和脂肪酸 其中棕榈 酸能降低血清中胆固醇的含量 对胰岛素起一定保护作 用 10 11 阿魏酸具有抗血小板凝集和血栓 抗炎 清 除氧自由基 亚硝酸盐 过氧化亚硝基 增强免疫功 能 抗菌 抗病毒 抗肿瘤 抗突变等功能 12 13 硬 脂酸可部分地降低胆固醇的溶解 同时可能会对胆酸的 生成进行调节 从而降低血清和肝脏中胆固醇含量 10 在吴茱萸和密楝果实中 有两种含量较高的不饱和 脂肪酸 即十四碳二烯酸和十四碳三烯酸 它们在吴 茱萸果实脂肪酸中的含量分别为 13 626 和4 603 在 密楝中的含量分别为 29 818 和1 87 但其生物学活 性至今未见文献报道 它们在吴茱萸和密楝果实中的药 用价值有待进一步研究 综上所述 吴茱萸与密楝果实中脂肪酸种类丰富 含量较高 具有重要的生物学活性 对人体营养 医 疗保健等方面具有较高的开发应用价值 参考文献 1 中国科学院西北植物研究所 秦岭植物志 第一卷 第三册 M 北 京 科学出版社 1981 134 135 2 四川植物志编辑委员会 四川植物志 第九卷 M 成都 四川民族 出版社 1989 124 3 周莲娣 李建春 吴茱萸药理研究述评 J 中医药学刊 2005 23 1 159 160 4 张媛 王喆之 火麻仁脂溶性成分的GC MS 分析 J 西北植物学报 2006 26 9 1955 1958 5 刘吉金 王晓炜 熊英 等 GC MS 对松叶脂溶性化学成分的研究 J 中药与天然药物 2006 16 1 36 37 6 白成科 猫儿屎和三叶木通种子油中脂肪酸成分的GC MS分析 J 西北植物学报 2007 27 5 0859 0863 7 陈德经 孟千祥 板栗仁的脂溶性成分及其特征 J 食品科学 2007 28 11 130 133 8 李翼新 张超 罗小玲 亚麻酸研究进展 J 粮食与油脂 2006 2 10 12 9 王宏钊 缪珊 孙纪元 亚麻酸药理研究进展 J 国际药学研究 杂志 2007 34 4 254 258 10 陈银基 鞠兴荣 周光宏 饱和脂肪酸分类与生理功能 J 中国油脂 2008 33 3 35 39 11 张丽 高聆 梁军 等 棕榈酸对胰岛的脂毒性及非诺贝特的保护作 用 J 中华内分泌代谢杂志 2005 21 2 155 157 12 王宏伟 石二霞 阿魏酸及其衍生物的药理学研究进展 J 内蒙古 医学院学报 2007 29 6 601 603 13 闫冬 赵娜 张希玉 等 阿魏酸钠片在健康人体中的生物等效性研 究 J 中国新药杂志 20