第七章 芳胺类药物的分析.ppt

第七章芳香胺类药物的分析 第一节芳胺类药物的分析 第二节苯乙胺类药物分析 基本要求 练习与思考 基本要求 一 掌握芳胺类 苯乙胺类药物的鉴别和含量测定的基本原理与方法 第一节芳胺类药物的分析 芳胺类药物分为两类 芳伯氨基未被取代 芳伯氨基被酰化 一 对氨基苯甲酸酯类药物的基本结构与主要化学性质 一 基本结构与典型药物 苯佐卡因 盐酸普鲁卡因 盐酸丁卡因 盐酸普鲁卡因胺 1 芳伯氨基特性 重氮化 偶合反应 芳醛缩合成Schiff碱 易氧化变色等 盐酸丁卡因无此特性 二 主要理化性质 水解特性 分子结构中的酯键或酰胺键易水解 除盐酸丁卡因外水产物为对丁基氨基苯甲酸外 上述均为对氨基苯甲酸 弱碱性 除苯佐卡因外 其余均含有叔胺氮的侧链 故具有弱碱性 4 其它特性 因结构中有芳伯氨基或同时具有脂烃胺侧链 其游离碱多为碱型油状液体或低熔点固体 难溶于水 可溶于有机溶剂 其盐酸盐则易溶于水 二 酰胺类药物的基本结构与主要化学性质 一 基本结构与典型药物 对乙酰氨基酚 扑热息痛 盐酸布比卡因 盐酸利多卡因 1 水解后显芳伯氨基特性 分子结构中含有芳酰氨基 酸水解后显芳伯氨基的特性反应 注意空间位阻的影响 2 水解产物易酯化 对乙酰氨基酚 酸水解生成醋酸 在硫酸中与乙醇反应 发出醋酸乙酯香味 二 主要化学性质 3 酚羟基特性 对乙酰基酚有游离酚羟基 可与FeCl3发生显色反应 4 弱碱性 利多卡因和布比卡因烃胺侧链有叔胺氮 显碱性 可与生物碱沉淀剂发生沉淀反应 可相互区别 5 与金属离子发生沉淀反应 利多卡因和布比卡因酰氨基上氮可与Cu2 Co2 生成有色配位化合物沉淀 三 鉴别试验 一 重氮化 偶合反应分子结构中含有芳伯氨基或潜在芳伯氨基的药物 均可发生此反应 Ar NH2 HCl NaNO2 重氮盐 OH 萘酚 橙黄 猩红色 直接反应 苯佐卡因 盐酸普鲁卡因 盐酸普鲁卡因胺 间接反应 对乙酰氨基酚 利多卡因和布比卡因由于空间位阻很难发生此反应 丁卡因虽无芳伯氨基 但可与NaNO2反应生成N 亚硝基化合物的乳白色沉淀 二 与三氯化铁反应 对乙酰氨基酚 FeCl3 蓝紫色化合物 1 与铜和钴离子反应 利多卡因与硫酸铜生成蓝紫色配位化合物 与氯化钴生成亮绿色沉淀 三 与金属离子反应 2 羟肟酸铁盐反应基于普鲁卡因胺分子中的芳酰胺结构 3 与汞离子反应 盐酸利多卡因 H2NO3 Hg NO3 2 黄色 对氨基苯甲酸酯 H2NO3 Hg NO3 2 红色或橙黄色 1 盐酸普鲁卡因的鉴别 四 水解产物反应 2 苯佐卡因的鉴别 苯佐卡因 NaOH 乙醇 乙醇 I2 NaOH CHI3 碘仿臭气 黄色沉淀 五 紫外特征吸收光谱法 1 在 max处测定供试液的百分吸收系数 例如 对乙酰基酚在0 4 NaOH中于 max 240nm E1 1cm 715在HCl 0 1nol L 甲醇于 max 249nm E1 1cm 880 2 在规定的浓度测定 max例如 盐酸普鲁卡因胺5 g ml max 280nm 六 红外吸收光谱法 略 一 对乙酰氨基酚中的特殊杂质检查1 乙醇溶液的澄清度与颜色 因其生产工艺用铁粉作还原剂 可能带入 致使乙醇溶液产生混浊 中间体对氨基酚易氧化产生有色化物 在乙醇溶液中显橙红色或棕色 四 特殊杂质检查 检查方法 配制0 1g ml本品乙醇溶液 溶液应澄清 无色 如显混浊 与1号浊度标准液比较 不得更浓 如显色 与棕红色2号或橙红色2号标准液比较 不得更深 2 有关物质检查 Ch P是以对氯苯乙酰胺为对照品 采用TLC法中的杂质对照品法 3 对氨基酚检查 利用对氨基酚在碱性条件下可与亚硝基铁氰化钠生成蓝色配位化合物 采用比色法 1 乙醇溶液的澄清度与颜色 二 盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查 为什么要检查 怎样检查 原中国药典采用TLC法中的杂质对照品法进行检查 现行中国药典采用HPLC法检查 一 亚硝酸钠滴定法Ar NH2 Ar NHCOR Ar NO2均可采用此法Ch P中的苯佐卡因 盐酸普鲁卡因和盐酸普鲁卡因胺及其制剂可直接采用本法 五 含量测定 1 原理 Ar NHCOR H2O Ar NH2 RCOOH H Ar NH2 NaNO2 2HCl Ar N2 Cl NaCl 2H2O 测定主要条件 1 加KBr增加反应速度 重氮化的反应历程为 NaNO2 HCl HNO2 NaCl HNO2 HCl NOCl H2O KHCl KBr HCl HBr KCl HNO2 HBr NOBr H2O KHBr KHBr比KHCl大300倍 生成NOBr量大得多 加快反应速度 2 加过量HCl加速反应 重氮化速度加快 重氮盐在酸性介质中稳定 防止生成氨基偶氮化合物 Ar N2 Cl H2N ArAr N N NH Ar HCl一般摩尔比为Ar NH2 HCl 1 2 5 6 3 室温条件下滴定 温度高反应速度快 每升高10 加快2 5倍 太高 可使Ar N2 Cl H2O Ar OH N2 HCl 4 滴定管尖端插入液面下滴定 3 指示终点的方法 1 永停滴定法溶液检流计终点前 无过量无电流HNO2终点时 有过量有电流 使指针偏离零HNO2永停在某一位置 2 外指示剂法用KI 淀粉指示剂指示终点的原理 2NaNO2 2KI 4HCl2NO I2 2KCl 2NaCl 2H2O 二 非水溶液滴定法 略 1 对乙酰基酚原料的含量测定在0 4 NaOH介质中 257nmD E1 1cm 样 E1 1cm 标 100 E1 1cm 7152 对乙酰基酚片溶出度测定 测定条件同上 1片 稀HCl24ml H2O1000ml精密量取5ml 0 4 NaOH10ml H2O100ml 257nm测定A W 1 1000 5 100 100 C g 100ml W g 200 C C A 715 溶出度 W 标示量 100 80 为合格 三 分光光度法 此法主要用于盐酸普鲁卡因注射液的测定 因该注射液中常含有降解产物对氨基苯甲酸 可以苯甲酸为内标同时测定两者的含量 该法简单准确 色谱条件 色谱柱为 BondapakC18300mm 4mm流动相为甲醇 1 HAc 40 60 UV检测器250nm 四 HPLC法 第二节苯乙胺类药物的分析 一 苯乙胺类药物的基本结构与主要化学性质 一 基本结构与典型药物 常见的苯乙胺类药物 二 主要化学性质 1 弱碱性本类药物结构中有烃氨基侧链 为仲胺氮显弱碱性 2 酚羟基特性本类药物结构中有酚羟基 可与FeCl3 发生氧化 3 光学活性多数药物结构中有手性碳原子 具有旋光性 二 鉴别试验 一 与三氯化铁反应 Ar OH FeCl3 络合显色 碱液 紫红色 二 甲醛 硫酸反应在此试剂中形成醌式结构而显色 药物三氯化铁甲醛 硫酸肾上腺素0 1mol LHCl显绿色 甲氨试液显红 紫红红色重酒石酸去甲肾上腺素绿色 加NaCO3试液显紫色 红色淡红色盐酸去氧肾上腺素紫色玫瑰红橙红棕红盐酸异丙肾上腺素深绿色 加5 NaCO3试液显蓝紫色 红色棕色暗紫色 三 氧化反应 本类药物具有Ar OH 易被氧化剂I2 H2O2 K3Fe CN 6氧化而显色 例如 肾上腺素在中性或酸性条件下 被I2 H2O2氧化后 生成肾上腺素红 盐酸异丙肾上腺素在酸性条件下 被I2氧化 生成异丙肾上腺素红 四 紫外特征吸收与红外吸收光谱 例如 盐酸异丙肾上腺素0 05mg ml max 280nmA 0 50 这一类药物均可采用红外吸收光谱进行鉴别 一 酮体检查本类药物在生产过程中多采用酮体氢化制得 若氢化不完全 易引入酮体杂质 采用UV法检查 利用酮体在310nm有吸收 本类药物无吸收 例如 肾上腺素本项检查配2 0mg ml 310nmA 0 05盐酸去氧肾上腺素配2 0mg ml 310nmA 0 02盐酸异丙肾上腺素配2 0mg ml 310nmA 0 15 三 特殊杂质检查 220260300nm 肾上腺酮及肾上腺素的紫外吸收曲线 max310nm 二 有关物质的检查采用TLC法 或HPLC 中的高低浓度对比法进行检查 三 盐酸苯乙双胍中有关双胍的检查采用PC法中的杂质对照法进行检查 一 非水溶液滴定法本类药物的原料药多采用此法 本法重点将在第八章讨论 1 重酒石酸去甲肾上腺素的测定相当于 B 的有机酸盐可直接滴定 2 盐酸克仑特罗的测定相当于 B 的HX酸盐不能直接滴定 需加Hg Ac 2处理后滴定 3 硫酸沙丁醇的测定相当于 B 的H2SO4盐可直接滴定 也可处理后滴定 四 含量测定 二 溴量法本类药物重酒石酸间羟胺 盐酸去氧肾上腺素及其注射液用此法 基本原理 三 比色法利用药物分子结构中的Ar OH与Fe3 络合显色 进行比色测定 也可利用药物分子结构中的Ar NH2重氮化偶合显色 进行比色 例如 盐酸克伦特罗栓的含量测定 四 HPLC法例一 重酒石酸去甲肾上腺素注射液的测定采用RPIP HPLC UV法 用外标一点法进行定量测定 例二 血浆中儿茶酚胺类 肾上腺素类 药物的测定采用RPIP HPLC EChD法 用标准曲线法进行定量测定 练习与思考 A型题 1 盐酸普鲁卡因注射液中检查的特殊杂质是A 水杨醛B 间氨基酚C 水杨酸D 对氨基苯甲酸E 氨基酚2 对乙酰氨基酚中检查的特殊杂质是A 水杨醛B 间氨基酚C 对氨基酚D 苯甲酸E 苯酚3 肾上腺素和盐酸去氧肾上腺素中检查的特殊杂质是A 水杨醛B 间氨基酚C 对氨基酚D 酮体E 苯甲酸 B型题 A 硫酸铜反应B 氧化反应C 还原反应D 水解后重氮化 偶合反应E 重氮化 偶合反应1 盐酸利多卡因2 肾上腺素3 盐酸普鲁卡因4 对乙酰氨基酚 A B E D