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文档简介
双向电泳解决方案IPG预制胶条第一向等电聚焦pH3-10预制胶(7cm、11cm、17cm、18cm、24cm)pH3-10非线性预制胶(7cm、11cm、17cm、18cm、24cm)pH3-6预制胶(7cm、11cm、17cm、18cm、24cm)pH4-7预制胶(7cm、11cm、17cm、18cm、24cm)pH5-8预制胶(7cm、11cm、17cm、18cm、24cm)pH7-10预制胶(7cm、11cm、17cm、18cm、24cm)pH3.9-5.1预制胶(7cm、11cm、17cm、18cm、24cm)pH4.7-5.9预制胶(7cm、11cm、17cm、18cm、24cm)pH5.5-6.7预制胶(7cm、11cm、17cm、18cm、24cm)pH6.3-8.3预制胶(7cm、11cm、17cm、18cm、24cm)预混缓冲液和试剂ReadyPrep双向电泳启动试剂盒再水合/样品缓冲液ReadyPrep双向电泳启动试剂盒平衡缓冲液还原剂和烷化剂(DTT,TBP)去垢剂等(CHAPS,尿素,Tris等)蛋白标准品Precision Plus Protein标准品(包括未染、全蓝、双色、彩虹、Western C专用和Dual Xtra小分子量标准品)天然预染标准品天然未染标准品银染SDS-PAGE标准品生物素SDS-PAGE标准品等电聚焦和双向电泳Maker染色剂考马斯染色剂(兼容质谱)银染试剂盒(兼容质谱)荧光染料试剂盒(兼容质谱)负染试剂盒TGX预制胶第二向垂直电泳7.5%单一浓度预制胶(10孔、15孔和IPG孔)10%单一浓度预制胶(10孔、15孔和IPG孔)12%单一浓度预制胶(10孔、15孔和IPG孔)4-15%梯度胶(10孔、15孔和IPG孔)4-20%梯度胶(10孔、15孔和IPG孔)Any kD梯度胶(10孔、15孔和IPG孔)制胶试剂丙烯酰胺/甲叉双丙烯酰胺(bis)(粉剂,30%和40%丙烯酰胺/bis混合液)交联剂和催化剂(bis、PDA、DATD、TEMED等)琼脂糖(分子生物学级、PCR级、低分子量和低熔点等)缓冲液预混上样和制胶缓冲液预混电泳缓冲液其他试剂示踪染料(溴酚蓝和二甲苯青)两性电解质洗涤浓缩液干胶液第一向 等电聚焦一、ReadyStrip IPG预制胶条ReadyStrip IPG 预制胶条ReadyStrip IPG 胶条有多种规格,可提供多种 pH 梯度选择,每一胶条有 1,3 或 7 个 PH 单位并且每一种类均有5 种不同的胶条长度,并都能适用于Bio-Rad的第二向电泳槽。短胶条适用于方法优化,而长胶条则能予以最好的蛋白分辨率和更高的上样量。ReadyStrip IPG 胶条由高纯度IPG单体制备而成,并经过充分的质量和性能测试以确保双向电泳结果的重复性。产品特点: 凝胶长度的精密度为2 mm,确保精确的pI分离 每块胶条清楚标有正极和pH范围,24cm胶条还标有条形码 两端衬条长度一致,无须修剪即可置于第二向凝胶中央梯度选择 标准宽范围pH梯度,在单块凝胶中能获得全部蛋白的最大分辨率 窄范围pH梯度可获得更高的分辨率(每pH单位可获取更多凝胶长度) 极窄范围pH梯度提供最完美的分辨率 在第一向中综合使用重叠pH范围的IPG胶条,可提高分辨率二、ReadyPrep等电聚焦试剂ReadyPrep 双向电泳启动试剂盒ReadyPrep 双向电泳启动试剂盒是为首次使用 PROTEAN等电聚焦电泳仪和ReadyStripIPG 胶条而设计的,试剂盒包含了一整套经测试的预混合试剂及相关实验技术要点的参考手册,并与Bio-Rad的第二向电泳槽相匹配。ReiadyPrep 双向电泳启动试剂盒包含下列实验所需的所有试剂: 制备的大肠杆菌总蛋白样品 可溶解样品的 IPG 胶条水化液 IPG 胶条进行 SDS-PAGE 所需的平衡缓冲液 将 IPG 胶条向第二向凝胶转移所需的琼脂糖覆盖液双向电泳预混缓冲液和单个试剂Bio-Rad 预混合缓冲液和蛋白样品已经过双向电泳实验的严格测试,采用这些试剂能进一步完善整个双向电泳实验,并减少可变因素,并能方便地与IPG胶条匹配使用: ReadyPrep 双向电泳启动试剂盒的再水合/样品缓冲液 标准配方同时也适合许多蛋白样品 ReadyPrep双向电泳启动试剂盒平衡缓冲液I 可用于DTT/碘乙酰胺烷化方法的第一个平衡步骤 ReadyPrep双向电泳启动试剂盒平衡缓冲液II 加入碘乙酰胺,可用于 DTT/碘乙酰胺烷化方法的第二个平衡步骤,加入TBP和丙烯酰胺也可用于单步TBP/丙烯酰胺烷化方法 大肠杆菌总蛋白样品 该蛋白样品经性能测试,与ReadyPrep 双向电泳启动试剂盒的水化/样品缓冲液配合使用时,能提供稳定的电泳图谱。在使用更复杂的实验样品前,可以用这个样品作为对照来验证您的双向电泳系统和实验操作 还原剂和烷化剂无论 DTT 或 TBP 均可用于 SDS-PAGE 前的平衡步骤,碘乙酰胺烷化是防止第二向 SDS-PAGE电泳中再氧化的标准方法,也可在样品制备阶段进行还原/烷化。 琼脂糖覆盖液操作方便的琼脂糖覆盖液能节省第二向 SDS-PAGE 的时间,溶液中含溴酚蓝示踪染料以监控电泳进程,使用该低熔点ReadyPrep琼脂糖覆盖液,能确保IPG胶条在多领域的应用,而在第二向超大型PROTEAN Plus 电泳中,电泳时IPG胶条是垂直于实验台,这时普通低熔点胶条不够坚固来固定IPG胶,在这种情况下推荐使用PROTEAN Plus 琼脂糖覆盖液对IPG胶条进行固定。 单个试剂及去垢剂Bio-Rad 也同时提供单个的尿素,Tris,及去垢剂CHAPS。第二向 垂直电泳一、蛋白质标准品Precision Plus Protein标准品有未染、全蓝、双色、Kaleidoscope、WesternC和Dual Xtra六种选择。全蓝、双色、Dual Xtra和WesternC含有三条高亮度参考条带(25、50和75kD)方便凝胶方向的判断。Precision Plus Protein标准品的特点如下:l 清晰的窄条带可用于精确的分子量估算;l 精确的分子量数值,经质谱验证;l 专利的染色技术确保批次间分子量的一致性,以及电泳迁移图谱的良好重复性;l 每个未染的蛋白条带都含有一个独特的Strep标记的亲和多肽,可进行Western杂交检测和分子量确定;l 天然荧光便于多种荧光检测;l 适用于Criterion Stain Free凝胶成像系统。Precision Plus Protein Dual Xtra标准品Precision Plus Protein Dual Xtra标准品含有12条预染条带,分子量范围从2到250kD,可用来监测电泳和转印效率。2kD和5kD条带利于低分子量蛋白的检测。粉色的2kD条带易于从蓝色染料前沿中辨识。Dual Xtra蛋白标准品的优点包括:l 宽范围分子量应用更广;l 2kD和5kD蛋白带;l 清晰、明亮,预染的12条蛋白带可精确的进行分子量确定;l 显眼的粉色条带作为参照和方向定位;l 天然荧光属性利于多元化应用;l 分子量和迁移率的批次间具高度一致性。Precision Plus Protein WesternC 标准品Precision Plus Protein WesternC 标准品含有10条蛋白条带偶联 StrepTactin 偶联物可用于化学发光检测蛋白条带可显示在凝胶转印膜胶片或 CCD 图像中预染条带可检测电泳过程评估转印效果每个条带均带有 Strep-标签可进行化学发光检测。优点包括:l 高精确度计算MW-R值0.99;l 双色预染条带25、50和75 kD 3个条带为粉色;其他条带预染为蓝色;l 结果整洁清晰精确l 所有条带含有 Strep-标签当使用 StrepTactin-HRP时可被化学发光检测l 天然荧光属性利于多种应用l 无需稀释方便随时使用二、制胶试剂丙烯酰胺聚丙烯酰胺是一种常用的电泳基质,由丙烯酰胺与低聚物交联剂(如甲叉双丙烯酰胺,bis ) 的自由基聚合而成。可靠的电泳结果取决于这一反应的可重复性,高纯度的起始试剂是影响凝胶质量的一个重要因素。Bio-Rad的99.9%超纯丙烯酰胺经过严格的纯化和测试,确保了凝胶聚合均一所需的一切品质。丙烯酰胺有3种形式,可满足每个实验室的需要: 丙烯酰胺粉剂 丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺粉剂产品使浓度和丙烯酰胺/甲叉双丙烯酰胺比率可调 预混合丙烯酰胺/甲叉双丙烯酰胺粉剂 含量固定的组份,直接加入指定量的超纯水即可配制成30-50%的储存液 丙烯酰胺预混液 可直接使用,有2种浓度 ( 30% 和40% ),3 种不同的丙烯酰胺/甲叉双丙烯酰胺比例( 19:1,29:1 和 37.5:1 )交联剂和催化剂三、预混缓冲液预混合上样和制胶缓冲液预混合电泳缓冲液预混合转印缓冲液四、垂直电泳预制胶Mini-PROTEAN TGX 预制胶保质期更长的 Mini-PROTEAN TGX 预制胶为创新的凝胶系统,使用标准的Tris/甘氨酸电泳缓冲液可提供类似Laemmli的分离模式。Mini-PROTEAN 胶兼容 Mini-PROTEAN Tetra (1-4块胶) 和 Dodeca 电泳槽(1-12 块胶),这类胶还可用于 Mini-PROTEAN 3 电泳槽,同时提供转印用Mini Trans-Blot 电泳槽和预切膜三明治。优点包括: 直接用于Laemmli系统 缓冲体系不昂贵低运行成本 电泳时间短 准确的分子量评估 适用于复杂样品 底部开放式胶盒设计使凝胶的操作和转印更方便 胶盒打开方便更快进入下游实验五、蛋白染色剂考马斯染色剂Bio-Safe 考马斯亮蓝G-250 染料Bio-Safe 考马斯染色剂G-250 染色剂是一种预混合的无毒溶液,脱色过程无需甲醇和醋酸。Bio-Safe 染色剂在清晰背景上产生蓝色条带。Bio-Safe 考马斯染色剂的使用快速、灵敏、便利。优点包括:l 水相染色无需特殊处理和通风橱l 凝胶浸于染色剂时条带随即可见l 无废液处理问题及费用考马斯亮蓝R-250 染色剂和脱色液考马斯亮蓝R-250 染色剂是对蛋白聚丙烯酰胺凝胶进行考马斯染色的最快速简便的方法。考马斯R-250 染色液和考马斯R-250 脱色液可直接使用。l 检测聚丙烯酰胺凝胶上纳克级蛋白和核算l 高通量能染色12 块大规模凝胶(26.5*23cm)l 操作方便的浓缩液形式银染Plus 试剂盒银染Plus 是最灵敏、使用最简便的银染色剂。银染Plus 试剂盒源于Gottlied 和Chavko(1987)所开发的检测琼脂糖凝胶上天然和变性真核DNA的方法。该试剂盒经化学改进,可用于检测聚丙烯酰胺和琼脂糖基质上的蛋白和核酸。银染Plus 试剂盒的特点:l 检测纳克级蛋白和核算l 防止凝胶基质上中的银沉淀从而消除背景l 只需3 个步骤:固定,清洗和染色能染色40 块小胶和13 块大胶荧光染料Oriole 荧光凝胶染料Oriole 荧光凝胶染料是一种即用,快速,灵敏和高线性的蛋白凝胶染料,可用来对SDS-PAGE 凝胶上的蛋白进行检测和定量。无需固定,只需要一个步骤即可进行染色。因为无需脱色,蛋白样品可在2 小时之内进行准确检测和定量。l 快速荧光凝胶染色;包括成像,全过程不超过2 小时l 与随后的蛋白酶解及质谱分析完全兼容l 纳克级灵敏度和低背景l 动态范围宽(3 个数量级)SYPRO Ruby 蛋白凝胶染料该染料是双向电泳中使用最广泛的染料。SYPRO Ruby 蛋白凝胶染料与质谱分析和以Edman 为基础的测序兼容。优点包括:l 最低灵敏度范围为1-10ngl 检测糖蛋白、脂蛋白和金属蛋白l 不受样品中外源核酸的干扰l IEF 凝胶的理想选择Flamingo 荧光凝胶染料Flamingo 荧光染料是一个10储存液,内含一种与变性蛋白质结合后就会发光的荧光染料。这种易用的荧光染料可配合激光为激发光源的的扫描仪应用于1-D 和2-D 蛋白质电泳分析。染色只需2 步,在5 小时内即可完成整个染色步骤。无需脱色并具有灵活的染色时间。染过的胶在2-8,暗处可保存6 个月而不会丢失图像信号。Flamingo 染料可与质谱分析和以Edman 为基础的测序相兼容。使用Flamingo 荧光凝胶染料染色的凝胶可以使用各种荧光成像系统成像。l 检测的最低灵敏度可以达到0.25-0.5ngl 线性可达0.5ng-1ugl 可用于IEF 胶染色负染色剂Bio-Rad 的负染色剂是基于凝胶上的金属离子的选择性沉淀,而蛋白带不被染色和修饰。因为蛋白不被修饰,所以该沉淀方法完全兼容随后的应用,如质朴分析。Bio-Rad为聚丙烯酰胺凝胶提供两种类型的负染色试剂。两种染料的灵敏度都比考马斯亮蓝R-250 高。锌染色剂和脱色试剂盒锌染色剂和脱色试剂盒源于Fernandez-Patron 等(1992)的方法,是一种用于聚丙烯酰胺凝胶的可逆负染色剂。简单的三步骤使您在15 分钟内看到负染条带。凝胶的白色背景在黑色背景下产生对比强烈的清晰条带。凝胶在15 分钟内完全脱色,用于Western 杂交、氨基酸分析和N-端测序。铜染色剂和脱色试剂盒Bio-Rad 的铜染色剂和脱色试剂盒源于Lee et al.(1987)的方法,只需10分钟就能看到SDS-PAGE 上的蛋白条带。由于蛋白是负染,如果不进行蛋白洗脱和转印,则不需要脱色步骤。-广州誉维生物科技仪器有限公司提供广州誉维生物科技仪器有限公司创立于2002年,是一家由归国留学生创办,主
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