医学微生物实验图谱.doc

1、小吞噬细胞：即中性粒细胞。胞内富含溶酶体酶等杀菌物质，是血液中数量最多、具有吞噬功能的细胞。可随血流迅速动员至感染部位，在机体抗感染中发挥重要作用。吞噬化脓球菌等。革兰染色呈红色。圆，体积小于单核细胞。核呈分叶状，2、3叶居多。2、大吞噬细胞：单核巨噬细胞。包括大单核细胞和巨噬细胞。吞噬病原体、凋亡的细胞和异物。革兰染色呈蓝色。圆，体积大，核偏大偏向一侧。 两图见于报告。3、吞噬百分率：计数100个中性粒细胞中具有吞噬作用的细胞数。即为吞噬百分率。 吞噬指数：观察100个中性粒细胞，计算被吞噬的细菌的总数，求平均每个中性粒细胞吞噬的细菌数即为吞噬指数。4、淋巴细胞转化实验 原理：淋巴细胞在体外培养时，受到刺激物的刺激后可表现为体积增大、代谢物旺盛、蛋白质和核酸合成增加，即向淋巴母细胞转化和增殖。此现象称为淋巴细胞的转化现象。分型：小淋巴细胞、过渡型、淋巴母细胞、染色体型意义：淋巴细胞转化率的高低可以反映机体的免疫水平，因此可作为测定机体细胞免疫状态的指标之一。 图见于报告。 5、E花环形成实验 原理：T细胞表面有绵羊红细胞的受体，可在自然情况下于绵羊红细胞结合，形成E玫瑰花环。结果判定：淋巴细胞呈蓝紫色或淡蓝色，绵羊红细胞不着色，凡结合3个绵羊红细胞或以上者为E花环形成细胞即是阳行反应。计数200个淋巴细胞，求出E花环形成率(%)。意义：根据花环形成的多少，可测知T细胞的数目，从而间接了解机体细胞免疫功能状态。 图见于报告6、血清学反应：是指相应的抗原和抗体在体外进行的结合反应。由于抗体主要存在于血清中，进行这类反应时一般都要用含有抗体的血清作为实验材料，所以把体外的抗原、抗体反应称为血清学反应。这类反应是根据抗原、抗体具有高度特异性的原理来进行实验的，即用已知的一方来检测另一方的存在。特点：特异性、可逆性、可见性影响因素：浓度比例、电解质、温度、酸碱度。分类：凝集反应、沉淀反应、补体结合试验、中和反应、免疫标记技术。（1） 沉淀反应：可溶性抗原（如血清、毒素、细菌浸出液等）与相应抗体在适量电解质的存在下，若二者相遇，比例适当，形成肉眼可见的沉淀物和沉淀线，称为沉淀反应。类型和特点：1、环状沉淀反应，形成白色沉淀环。 2、单向琼脂扩散试验，白色沉淀环的直径与抗原的浓度呈正比。 3、双向琼脂扩散试验，可出现一条或一条以上的沉淀线。 4、对流免疫电泳，沉淀线出现较快。 （2）凝集反应：颗粒性抗原与相应的抗体结合，在有一定浓度的电解质环境中，抗原抗体凝集成大小不定的凝集块，这种现象叫做凝集反应。 种类：直接凝集反应和间接凝集反应。 比较是：前者抗原与抗体直接结合，后者是以与免于无关的微球载体为媒介。（3）免疫标记技术：是将已知抗体或抗原标记上易显示的物质，通过检测标记物来反应抗原抗体反应的情况，从而间接地测出被检抗原或抗体的存在与否或量的多少。常用免疫标记物：荧光素、酶、放射性同位素或电子致密物。 ELISA常用的方法与用途：双抗体夹心法：用已知抗体检测未知抗原。间接法：检测特异性抗体。7、革兰染色法 方法：先用碱性染料（结晶紫）是标本着色再加媒染剂（碘溶液），然后用酒精脱色，最后用稀释石碳酸复红复染。 结果判定：保留结晶紫不被酒精脱色的，称为革兰氏阳性菌，被酒精脱去紫色的，称为革兰氏阴性菌。 意义：将细菌分为两大类，可以帮助鉴别细菌及治疗时选择适当的抗菌药物。8、细菌的特殊结构：芽孢，荚膜、鞭毛。见于报告。9、液体培养基：浑浊生长，沉淀生长，表面生长。 半固体培养基：线状生长，弥漫生长。 固体培养基：菌落、菌苔。10、变异：菌落的变异（S）R） 鞭毛变异（H）O）迁徙生长11、细菌的生化反应：糖发酵（产气为阳性） 吲哚试验（上层变红为阳性） 尿素试验（变红为阳性，指示剂是酚红）硫化氢（黑为阳性）12、消毒器材：高压蒸汽锅、干热灭菌器、紫外线、滤菌器、化学消毒剂13、细菌的划线分离：标本中含有多种细菌，要检查标本中是否存在某种病原菌，就必须先分离出单个菌落。 菌落（colony）由单个细菌（或其他微生物）细胞或一堆同种细胞在适宜固体培养基表面或内部生长繁殖到一定程度；形成肉眼可见有一定形态结构等特征的子细胞的群落14、药物敏感试验：结果判定：以纸片周围抑菌圈直径的大小为标准。 大于15mm高度敏感，1015mm中度敏感，79mm低度敏感，无抑菌圈为耐药。15、化脓性链球菌形态见实验书P2930 金葡菌透明溶血环，甲型链球菌和肺炎链球菌草绿色溶血环，乙型透明溶血环 奈氏菌在巧克力琼脂平板上培养。16、白喉棒状杆菌：革兰染色阳性，Albert染色有异染颗粒呈棕褐色。 血碲钾平板呈黑色菌落。 Elek平板沉淀和自由扩散见书P15017炭疽杆菌：革兰阳性。有氧时形成芽孢，菌落呈卷发样18结核杆菌：抗酸染色法。罗氏培养基呈菜花样菌落。191.肠道杆菌 （SS平板、双糖培养基）肠道杆菌：革兰阴性 无芽胞SS平板：（含有中性红的培养基），若该培养基加入的是非肠道致病菌（非致病菌能分解乳糖产酸），则菌落变红，反之，致病菌则菌落不变红。双糖培养基：分两层（两层中均有酚红指示剂），下层为含葡萄糖的半固体培养基，上层为含乳糖及硫酸亚铁的固体培养基。若上下层均发酵，则为非肠道致病菌。若只有下层发酵，则为可疑肠道致病菌。2.肥达反应（原理、意义、凝集效价、结果判定）原理：用已知的伤寒杆菌H、O抗原和甲、乙型副伤寒杆菌的H抗原分别与患者血清作试管凝集试验，可测定患者血清中相应抗体的含量及其增减情况，用以诊断伤寒或副伤寒。意义：用以诊断伤寒或副伤寒通过凝集效价来进行结果判定，当伤寒杆菌O抗体的凝集效价在1：80以上和伤寒杆菌H抗体凝集效价在1：160以上，才能判定为伤寒感染，若只符合其中的任意一个，都不能判定是否有伤寒感染。而甲、乙型副伤寒H抗体凝集效价要在1：80以上才有判定意义。3.厌氧芽胞梭菌（破伤风杆菌、产气荚膜梭菌、肉毒杆菌）的形态及培养特性破伤风杆菌为革兰阳性菌，有芽胞位于菌体顶端，芽胞大于菌体，呈鼓槌状。破伤风杆菌使疱肉培养管中的疱肉变黑色，在培养基上形成不规则菌落，菌落周边疏松似羽毛状，呈迁徙状生长。破伤风杆