卵巢恶性肿瘤组织谷胱甘肽S转移酶的表达及其与化疗耐药的关系.doc

卵巢恶性肿瘤组织谷胱甘肽S转移酶的表达及其与化疗耐药的关系中华妇产科杂志 1998年第2期第33卷 论著作者：李力姚德生陈心秋陈发龙 黄薇张洁清唐步坚单位：530021 南宁，广西医科大学附属肿瘤医院妇科关键词：卵巢肿瘤；谷胱甘肽转移酶类；抗药性；预后【摘要】目的检测卵巢肿瘤组织中谷胱甘肽S转移酶(GST-)的表达，并探讨其与化疗耐药的关系。方法采用免疫组化SP法对53例卵巢恶性肿瘤、20例卵巢良性肿瘤和17例正常卵巢组织进行GST-检测，并对相关的临床病理因素进行分析。结果(1)卵巢恶性肿瘤组织中GST-表达阳性率为60.4%，卵巢良性肿瘤组织中GST-表达阳性率仅为10.0%，而正常卵巢组织中则无一例GST-表达阳性；(2)不同病理类型、临床分期和术后残留灶大小的恶性肿瘤组织中GST-表达阳性率相比较，差异无显著性；(3)恶性肿瘤中，初治和复发的GST-表达阳性率分别为47.2%和88.2%；(4)GST-表达阳性的患者对化疗的有效率低于GST-表达阴性的患者，前者为37.5%(12/32)，而后者为76.2%(16/21)；(5)GST-表达阳性的患者治疗后1年及3年生存率低于GST-表达阴性者。结论卵巢恶性肿瘤组织中GST-表达与其化疗耐药有关。GST-表达的检测对临床判断化疗敏感性和预后有一定的参考价值。 The Expression of Glutathione S-transferase in Human Ovarian Cancer as An Indicator of Resistance to ChemotherapyLi Li, Yao Desheng, Chen Xinqiu, et al. Affiliate Tumor Hospital of Guangxi Medical University, Nanning 530021【Abstract】ObjectiveTo study the relationship between the expression of glutathione S-tranferase (GST-) in cancer tissue and the chemoresistance in patients with ovarian carcinoma.MethodsThe expression of GST- in 53 cases of ovarian cancer, 20 ovarian benign tumors and 17 normal controls was determined by using immunohistochemical SP method and the results were studied in correlation with some clinical and pathological data.Results (1) Positive expression with GST- was demonstrated in 60.4% of malignant and 10.0% of benign ovarian tumors while the expression was negative in normal controls. (2) No significant difference for the expressions was shown in relation to the histopathology, the clinical staging and the size of residual tumors after cytoreductive surgery. (3) The positive rate of the expression was 47.2% (17/36) for the initially treated patients while those with tumor recurrence had a positive rate of 88.2% (15/17). (4) GST- positive cases showed less response rate of 37.5% (12/32) to chemotherapy as compared with that of 76.2%(16/21) for GST- negative cases. (5) The survival period of the patients with GST- positive expression was shorter than that of those with GST- negative expression.Conclusion The expression of GST- in patients with ovarian carcinoma is closely related to the chemosensitivities clinically. Determinations of the GST- are useful for predicting the chemosensitivities and the prognosis of the disease.【Key words】Ovarian neoplasmsGlutathione transferasesDrug resistancePrognosis肿瘤细胞对化疗药物的耐药是导致化疗失败的重要原因。目前已有研究表明，肿瘤细胞中谷胱甘肽S转移酶(glutathion S-transferase, GST-)的过度表达与肿瘤耐药特别是对铂类药物耐药有关1。我们对53例卵巢恶性肿瘤组织进行GST-表达检测，并对相关的临床病理因素进行分析，旨在探讨肿瘤组织中GST-表达与其临床耐药的关系。现将结果报告如下。资料与方法一、研究对象全部组织标本均来自本院住院患者。并经病理学确诊，分为3组。卵巢恶性肿瘤组，53例，其中上皮性癌36例，非上皮性癌17例；临床分期按FIGO标准，期18例，期35例；全部病例均接受手术治疗和术后以顺铂为主的化疗。疗效判定按国际抗癌联盟(UICC)标准2，并随访至1996年12月。卵巢良性肿瘤组，20例，其中浆液性和粘液性囊性腺瘤11例，良性畸胎瘤9例。正常卵巢组17例，均为子宫肌瘤手术时切除的卵巢并经组织学检查为正常者。二、标本收集及处理全部标本均在手术时收集。其中卵巢恶性肿瘤36例系初次手术，其余17例为手术化疗后复发再次手术者。标本经常规福马林固定，石蜡包埋切片，其中1张切片经常规HE染色，行病理学检查；另2张切片行免疫组化染色备用。三、GST-免疫组化染色免疫组化采用SP法，GST-单克隆抗体由中国医学科学院肿瘤研究所提供，免疫组化药盒购自福州迈新公司，按说明书操作。染色后经DAB显色，苏木精衬染，脱水，透明，封片。四、免疫组化结果判断本研究以已知的GST-阳性的胆囊癌组织切片免疫组化染色结果为阳性对照，以PBS代替一抗的免疫组化染色结果为阴性对照。GST-的结果分析参照Wright等3提出的标准。五、统计学分析全部数据输入计算机，采用华西医科大学编制的医学统计软件处理，率的比较采用2检验分析，生存率采用Kaplan-Meier生存曲线法4计算。结果一、各组卵巢组织中的GST-表达卵巢恶性肿瘤组中GST-表达阳性者32例，占60.4%；卵巢良性肿瘤组中GST-表达阳性者2例，占10.0%；而正常卵巢组中，无一例表达阳性。3组相比较，差异有极显著性(P0.01)。二、卵巢恶性肿瘤组织GST-表达与其临床期别、病理类型及分化和术后残余肿瘤大小的关系卵巢恶性肿瘤组织中GST-表达与临床期别、病理类型及分化程度、术后残余肿瘤灶大小无明显相关(P0.05)。见附表。三、卵巢恶性肿瘤组织中GST-表达与其初治和复发的关系36例初治者中，GST-表达阳性17例，占47.2%；17例复发者中，GST-表达阳性15例，占88.2%。二者比较，差异有显著性(P0.05)。四、卵巢恶性肿瘤组织中GST-表达与化疗疗效的关系32例GST-表达阳性者，对化疗的有效率(缓解加部分缓解)为37.5%(12/32)。21例GST-表达阴性者，对化疗的有效率为76.2%(16/21)。二者比较，差异有显著性(P0.05)。五、卵巢肿瘤组织GST-表达与预后的关系GST-表达阴性的患者平均生存时间中位数为22月，1年、3年生存率分别为90.0%和70.0%；而GST-表达阳性的患者生存时间中位数为17月，1年、3年生存率分别为68.0%和37.0%。二者比较，差异有显著性(P0.05)。临床分期期、GST-表达阴性患者1年、3年生存率分别为100.0%、95.4%，而阳性患者为90.0%、74.6%，二者相比，差异无显著性(P0.05)；但期患者1年、3年生存率，阴性患者为92.3%，60.0%，阳性患者为70.0%、20.4%，二者比较，差异有显著性(P0.05)。在术后残余癌灶直径2 cm和2 cm的患者，GST-表达阴性患者1年、3年生存率分别为95.4%、89.2%和91.0%、65.2%；而表达阳性患者分别为90.9%、68.2%和66.1%、10.0%，二者比较，差异均有显著性(P0.05)。讨论一、卵巢恶性肿瘤组织中GST-表达与临床耐药的关系化疗是治疗卵巢癌的重要手段，而铂类化疗药被认为是治疗卵巢癌最有效的药物。但有资料表明，以顺铂为主的化疗方案对卵巢癌患者的总体生存率并无明显改善5。卵巢癌的耐药是导致化疗失败的附表卵巢癌组织中GST-表达与临床病理因素的关系(例数)类别总例数组织学类型分化程度临床分期术后残余灶(cm)上皮性非上皮性中或高低22表达阳性3224813111022239表达阴性2112975813147重要原因。目前已有研究提示，恶性肿瘤组织中的GST-的扩增和过度表达与肿瘤耐药有关6。本研究结果也显示，卵巢恶性肿瘤组中的GST-的阳性表达率60.4%，明显高于卵巢良性肿瘤，而正常卵巢组则未发现1例GST-表达阳性。同时本研究也发现，肿瘤组织中GST-阳性表达的患者对化疗的有效率为37.5%，而GST-表达阴性的患者对化疗的有效率则可达76.2%。两者比较，差异有显著性。这一结果与已有的研究报告7，即肿瘤中GST-的表达与对铂类为主化疗方案的疗效密切相关一致。因此，肿瘤组织中的GST-检测可成为预测卵巢癌患者对化疗是否敏感的重要临床指标之一。已有研究表明，肿瘤耐药患者中有一部分为获得性耐药1。本研究结果也发现，复发患者的肿瘤组织中GST-表达阳性率明显高于初治者。这提示，卵巢癌对化疗药物特别是对铂类药物的获得性耐药，与肿瘤组织在接受化疗后出现GST-基因的激活与表达有关。Godwin等8通过体外研究证实，卵巢癌细胞系在顺铂诱导耐药过程中，细胞内逐渐出现GST-表达，同时细胞内谷胱甘肽水平也增加，对顺铂重度耐药的细胞，其谷胱甘肽水平较正常细胞增加近50倍。二、GST-表达导致肿瘤耐药的机理肿瘤组织中GST-过度表达导致肿瘤细胞对化疗药物耐药的机理尚不清楚。但已有研究证实，GST-是一种具有多种生理功能的蛋白质，它与肿瘤耐药有关的机理是：(1)它可催化谷胱甘肽与各种亲电子分子和疏水性分子结合，使其更有极性而加强外排。而铂类化疗药物具有亲电子性特点，因此不可避免地成为GST-的底物，而导致肿瘤细胞内药物外排出增加，对肿瘤细胞毒性下降，而出现耐药5。(2)它可通过非酶结合的方式将细胞内的毒性化学药物排除，从而达到解毒的目的9。目前的研究也已发现，当导入外源性GST-基因或在诱导耐药过程中细胞表达GST-时，其细胞的化疗药物特别是铂类药物贮留量明显减少10。三、GST-表达与肿瘤预后的关系我们的研究结果发现，GST-表达阳性的卵巢癌患者预后比表达阴性者差，进一步对临床期别早晚、术后残余肿瘤这些以往研究已证实与肿瘤预后有关的因素进行Kaplan-Meier生存曲线分析，仍显示GST-表达阳性的患者预后比GST-表达阴性者差。因此，组织中GST-是否表达可视为肿瘤预后好坏的重要指标之一。GST-表达影响肿瘤患者预后的机理可能与GST-表达阳性的患者对化疗药物特别是铂类药物疗效差有关1。以往的研究已表明，肿瘤耐药是个多因素参与的复杂的生物过程11。本研究结果也提示，仍有相当部分GST-表达阴性患者的化疗疗效不佳或预后较差，这可能与肿瘤的其它耐药机理有关。参考文献1Johnson SW, Orols RF. 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