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文档简介
_切片方法321如下图,在切片之前首先要用刀片对SD大鼠脑进行粗切,可平分为5段,粗切之后进行切纹状体,海马,黑质的精细切分。36541:纹状体和黑质的切法:切除小脑和嗅球(保险起见用刀片切除1,和6的位置);然后从3处切开(即大约整体的2/5处),13区为黑质,36区为纹状体,黑质和纹状体都是以3处处的剖开面为底面用胶水固定在切片机小圆板底座上。22:海马的切法:切除小脑和嗅球(保险起见用刀片切除1,和6的位置),保险起见海马保留24之间的区段(用刀片切在2和4的位置)然后以 处的剖开面为底面用胶水固定在切片机小圆板底座上。具体切片方案如下根据大鼠脑立体定位图谱(第三版)在PD模型中,所需部位主要为鼠大脑的纹状体、黑质以及海马部位: 纹状体区:前囟1.70mm至-0.4mm,共2.10mm,由前往后平均分为以下四个区间(每区段0.5mm): +1.70mm-+1.20mm, +1.20mm-+0.70mm, +0.70 mm -+0.20mm,+0.20mm- -0.40mm,+1.70mm-+1.20mm,+1.70mm-+1.20mm, +1.20mm-+0.70mm, +0.70 mm -+0.20mm, +0.20mm- -0.40mm,可分为四个小瓶来装片,于10ml 的棕色玻璃瓶中( 内盛6ml的0.01mM PBS,pH7.4配制的5%多聚甲醛溶液 ),每个区段长度为0.50mm,理论上可切30m的脑片16张,实际保留时至少保证12张脑片。并从前到后标明区段1(+1.70mm-+1.20mm),区段2(+1.20mm-+0.70mm),区段3(+0.70mm-+0.2mm),区段4(+0.2mm- -0.4mm). 黑质区:前囟-4.52mm至-6.04mm,共1.52mm,理论上一共可切56张30m的脑片。进入脑区-4.16mm后,先连续切100m的脑片共3片,接着切30m的脑片共2张,均不保存,理论上此时已到-4.52mm的脑区位置。 开始脑区位置-4.52mm- -4.8mm 为一个备用脑片区段,共0.28mm理论上该区段可切9片脑片。从-4.8mm开始到-6.04mm, 共1.24mm,分为四个区段(每区段0.31mm),每个区段至少保留8片。-4.8mm- -5.11mm-5.11mm- -5.42mm-5.42mm- -5.73mm-5.73mm-
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