高效液相色谱法测定肝康复口服液中芍药甙的含量.doc

高效液相色谱法测定肝康复口服液中芍药甙的含量高效液相色谱法测定肝康复口服液中芍药甙的含量更新日期：2011-01-24 点击： 孔燕李江 摘要：采用HPLC法测定肝康复口服液中芍药甙的含量，操作方便迅速，灵敏度高，重现性好。结果准确，稳定，空白无干扰，平均加样回收率为99.17%，RSD=1.13%，可作为该制剂的质量指标。 关键词：肝康复口服液；HPLC；芍药甙；含量测定 中图分类号：R284.2文献标识码：A文章编号：1008-0805(2000)09-0791-01 Determination of Paeoniflorin in Gan Kang Fu Oral Liquid by HPLC KONG Yan，LI Jiang (Xuzhou Hospital of Traditional Chinese Medicine, Jiangsu Province 221009,China) Abstract: The contents of Paeoniflorin in Gan Kang Fu oral liquid were determined by HPLC, this method was simple and rapid. The results were accurate and stable, no disturbance in negative group. The mean sample recovery rate was 99.17%, RSD was 1.13%. As a result, this method was available for quality control of this preparation. Key words: Gan Kang Fu oral liquid;HPLC;Paeoniflorin;Determination 肝康复口服液是由多种中药经提取、精制而成的纯中药复方制剂。临床上用于病毒性肝炎的治疗，在降低血清谷丙转氨酶及恢复肝细胞功能方面有显著的疗效。方中赤芍味苦，性微寒，归肝经，为凉血活血之品，是主药之一，而且用量颇大。芍药甙为其主要成分。为考察本品的内在质量，确定其质量控制标准，今以芍药甙为指标，采用高效液相色谱法测定其含量。 1仪器与药品 美国Waters高效液相色谱仪：Waters 486型紫外检测器，Waters 510型输液泵，Waters 746型积分仪及梯度控制器。 芍药甙：购于中国药品生物制品检定所。 乙腈：为色谱纯，上海吴泾化工总厂。 肝康复口服液：徐州市中医院制剂中心提供。 试剂：均为分析纯。 2方法与结果 2.1色谱条件 色谱柱：Hypersil C18，10 m，4.6 nm250 nm。 流动相：乙腈-水(2080)。 流速：1.0 ml/min室温：2225 测定波长：230 nm灵敏度：AT28 纸速：0.25 cm/min 理论板数按芍药甙峰计算应不低于1 500。 2.2标准曲线的绘制：精密称取芍药甙2 mg，加流动相溶液置25 ml量瓶中至刻度，分别吸取2，4，6，8，10 ml于10 l量瓶中，并添加流动相溶液至刻度，摇匀为标准溶液，分别吸取上述5种芍药甙溶液依次进样10 l，以进样量为横坐标、峰面积为纵坐标，绘制标准曲线得回归方程： Y=5 117.29+2 514 726 X,=0.999 7 2.3供试品的含量测定 2.3.1供试品溶液的制备：量取5 ml肝康复口服液置分液漏斗中，用水饱和的正丁醇提取4次，5 ml/次，分取上层溶液水浴蒸干，残渣加流动相溶液适量使溶解，移置10 ml量瓶中，并稀释至刻度，摇匀即得。 2.3.2供试品的测定及结果：分别吸取芍药甙对照品溶液(C=48 g/ml)及6批肝康复口服液各10 l，进样测定，结果见表1。 表1样品测定结果(n=3) 批号 芍药甙含量C/mg*ml-1 RSD(%) 990415 1.104 6 1.24 990609 1.079 4 1.37 990816 1.123 7 1.08 991101 1.096 8 1.79 000123 1.111 9 2.01 000312 1.132 7 1.31 2.4加样回收率试验：量取肝康复口服液5 ml，精密加入芍药甙对照品1 mg，按供试品溶液制备项下操作，测定，结果加样回收率为99.17%，RSD=1.13%(n=6)。 2.5精密度试验：取同一浓度的对照品溶液(48 g/ml)准确吸取10 l，重复进样6次，结果=1 212 186，RSD=0.91%。 2.6重现性实验：取批号为991101的供试品溶液，准确吸取10 l，进行6次平行测定，结果RSD=0.83%。 2.7稳定性实验：取同一批号的供试品溶液(991101)，准确吸取10 l，测定1次/h，结果表明至少在8 h内稳定，RSD=1.07%。 2.8空白试验 2.8.1缺赤芍阴性空白液的制备：按处方的比例称取赤芍以外的其他各药，模拟“肝康复口服液的生产工艺流程”及“供试品溶液的制备方法”制成10 l缺赤芍阴性空白液。 2.8.2空白试验及结果：精密吸取供试品溶液(991101)、芍药甙对照品溶液(48 g/ml)，及缺赤芍阴性空白液各10 l，进样测定，结果如图1，表明供试品与对照品在保留时间6.52附近有明显吸收峰，而缺赤芍阴性空白无，对芍药甙的测定无干扰。 图1肝康复HPLC图谱 1.芍药甙对照品2.空白对照品3.供试品 3讨论 肝康复口服液在我院应用多年，疗效显著。本文采用HPLC法对6批肝康复口服液进行测定，得芍药甙含量在1.079 41.132 7 mg/ml之间，其加样回收率为99.17%，RSD为1.13%。结果表明这种方法操作简便、迅速、灵敏度高、重现性好，结果准确，稳定，无空白干扰。可作为保证疗效，控制该产品质量标准的手段。 作者简介：孔燕(1961-)，女(回族)，江苏省徐州人，现任江苏省徐州市中医院主管中药师. 孔燕（江苏省徐州市中医院221009） 李江（江苏省徐州市中医院221009） 参考文献： 1李淑芝，郭亚健，徐艳春，等.不同煎煮条件对芍药甙煎出量的影响J.中成药，199