ca1500凝血仪原理及操作注意事项PPT参考课件.ppt

1 2 3 仪器测试原理 为凝固法 发色底物法和免疫分析法 4 凝固法 基本测试原理是光学法的散射光检测 用660nm光电二极管检测散射光强度的变化 还并用了百分比方式的测定原理 当试剂加入标本后 凝血开始启动 随之光学出现变化 仪器把这种光学的变化描绘成凝固曲线 把开始出现凝集的起始点作为0 把完全凝固的终点作为100 把50 变化点处作为凝固时间 报告点 当测定含有干扰物 黄疸 溶血 高脂血症等 或低纤维蛋白原血症的特殊标本时 其作为起始点的0 的基线会随之上移或下移 相当于扣除本底干扰 5 凝固法测试项目 以上凝固法检测原理所测定的项目包括了最常用的如PT APTT FIB TT 内源凝血因子 FVIII XI XI XII 外源凝血因子 FII V VII X 等 6 发色底物法 血浆 试剂 底物混合发生反应 根据吸光度变化 计算结果 是通过测定产色物质的吸光度变化 以推算待测物的含量 这种方法属生物化学法 其基本原理是 试剂中为人工合成的含某种酶裂解位点的短肽 与产色物质如对硝基苯胺 pNA 连接 待检物品中含有活性酶或无活性的酶原被加入的激活剂活化 在检测过程中产色物质被解离下来 使被检物品出现颜色变化 其与被检物含量呈一定的数量关系 此方法以酶学方法为基础 可检测项目包括如 AT III Plg PC PS FM PAI Tpa 2 AP等 7 免疫分析法 血浆与乳胶试剂发生反应 以被检物作为抗原 制备相应的多克隆抗体 利用抗原抗体的特异结合反应来对被检物进行定性和定量检测 在凝血仪上多采用免疫比浊法测定 其基本原理是当一定波长的光线通过反应混合液时 被其中抗原抗体反应形成的免疫复合物吸收而减弱 在一定范围内 其吸光度与复合物量呈正相关 因此当抗体量固定时 根据复合物的吸光度值 即可推算出待测抗原含量 可测定项目如D 二聚体 vWF因子 FDP等 8 凝血测试一般注意事项 9 1 样本采集 穿刺要一针见血 避免淤血 气泡 溶血和组织液污染 为避免血液当中有组织液的渗入 采血时以第二或第三管样品做凝血测试管为佳 如果从导管取样 则需用生理盐水冲洗管道 前面5ml血不能使用 采血后立即与抗凝剂充分混合 尽快送往实验室 采血量必须准确 如果少于计划量的90 则不能使用 不能在静脉穿刺部位或附近部位采样 10 2 样本处理 使用3 8 或3 2 W V 拘橼酸钠溶液作为抗凝剂 血样与抗凝剂的比例为9 1 如果血球压积55 则需调整这个比例 方法是 0 00185 血液毫升数 100 压积 抗凝剂毫升数 按比例重抽血检验 11 2 样本处理 血浆分离 采样后60分钟内进行 分离血浆应在3000r min离心10分钟 务使血小板去除 盛血浆容器应加塞 防止PH改变 血浆存放时间不能太久 室温存放在2个小时以内 2 8摄氏度 不能大于4个 12 3 试剂 清洗液 clean 开盖后放于仪器上有效期仅24小时缓冲液 开盖后放置仪器上保存 24h 使用放置时间太长的缓冲液会导致凝血时间延长即Fib含量测定偏低 质控血浆 1ml蒸馏水溶解置室温15分钟后使用 13 3 试剂 TT 每瓶用5ml专用缓冲液溶解 须放置室温10分钟后才使用 机上有效期 15 10小时PT 每瓶用4ml蒸馏水溶解 须放置室温或37 30分钟后才使用 机上放置时间长 有沉淀 可稍加混匀 溶解时要轻转动容器 避免剧烈振荡 14 4 影响测定结果的因素 抗凝剂 草酸钠 EDTA 肝素不适于作抗凝剂 严重黄疸 脂血 重度溶血会影响测定结果 如是因抽血不当或采血时机不当引起的 应尽可能重抽血 使用纤溶药物 如双香豆素 链激酶 尿酶等可使凝固时间延长 超过治疗剂量的肝素使凝固时间延长 15 FDP增加使凝固时间延长 某些药物 如口服避孕药 雌激素 天门冬