复方银杏通脉口服液产品资料.doc

复方银杏通脉口服液产品资料复方银杏通脉口服液的主要药效学资料摘要复方银杏通脉口服液能降低甲亢型阴虚大鼠血液cAMP、BUN与CREA含量，具有明显的滋阴补肝肾作用；能增加狗脑血流量、心输出量，降低脑血管阴力及处周血管阻力，而不影响血压，心率及左室压力，能舒张离体兔基底动脉，使机体脑血管系统及处周血循环状态得到改善；能改善大鼠血液流变学各项指标，具有较好的活血通脉作用；能增强小鼠的记忆力。药理研究为临床应用提供了一定的实验依据。前 言复方银杏通脉口服液系银杏，制何首乌等精制而成，临床证明其有滋阴补肾、舒肝通脉功效，为此我们对其药理作用进行了以下几个方面的研究：（1）对甲亢型阴虚大鼠的影响；（2）对狗心脑血管系统的影响；（3）对离体兔基底动脉的影响；（4）对大鼠血液流变学指标的影响；（5）对小鼠记忆力的影响。1 实验材料1.1 药物与试剂（1）复方银杏通脉口服液：省中药研究院提供，批号950701，浓度0.78g/ml，规格10ml/支。（2）天麻首乌片，常德中药厂生产，批号950315，试验时磨碎，用水溶解过滤备用。（3）（8-H3）cAMP：北京原子能科学研究院提供，批号950604。（4）去甲肾上腺素：武汉第二制药厂提供，批号950408。1.2 动物（1）SD系清洁级大白兔，购自本院实验动物中心。（2）ICR系清洁级小白鼠，购自湖南医大实验动物中心。（3）市售杂种狗。（4）家兔，衡阳医学院提供。1.3 仪器（1）NIHON KOHDEN型多道生理记录仪，配486型微机，CYS型压力换能器等，日本产。（2）NIHON KOHDBN型电磁流量计，日本生产。（3）卡式控头型号：FR-025T，FR-130T。2 方法与结果2.1 复方银杏通脉口服液对阴虚型大型大鼠的影响。2.1.1 方法取SD大鼠60只，雌雄各半，体重180-220g，随机分成6组，分别是（1）空白对照组；（2）甲亢阴虚模型线；（3）阴虚加天麻首乌片组，（4）（6）阴虚复方银杏通脉口服液高、中、低剂量组，如表1。除空白对照组外，其余各组动物每只每天灌胃甲状腺素5mg，利血平0.03mg，连续10天，同时（3）（6）组动物分别灌胃天麻首乌片0.5g/kg，银杏舒通液8.4g/kg、4.2g/kg、2.1g/kg（相当于临床剂量的4、2、1倍），连续10天后称体重，计算给药前后体重变化值。采血测定cAMP、BUN、CR。BUN、CR测定由省交通医院完成。cAMP采用放免测定，眼眶取血后用EDTA抗凝，分离得血浆，经1MHCIO4处理，2MKOH中和，冰浴放置后离心得上清液，进行RIA反应，标记物选用8H3cAMP，由本院免疫室完成。2.1.2 结果由表1可见，甲亢阴虚模型组与空白对照组比较；其血液cAMP、BUN、CR均显著升高，体重增长明显抑制，表明阴虚模型成功。银杏舒通液高、中、低剂量组及天麻首乌片组与甲亢阴虚模型比较，其cAMP、BUN、CR均显著降低，其体重增长明显提高；和空白对照组比较没有明显差异，表明复方银杏通脉口服液具有滋阴补肝肾的作用，其功效与天麻首乌片相当。2.2 对狗心脑血管系统的影响2.2.1 方法取健康杂种狗30条，体重8.5kg以上，饲养3天后开始试验，用戊巴比妥钠麻醉的狗：背位交叉固定，分离气管，套上人工呼吸机，分离右侧股静脉，输入葡萄盐水，分离左侧颈总动脉，放入卡式探头，连接电磁流量计，记录脑血流量；右侧股动脉插入压力换能器，记录血压及总外周阻力；打开胸腔，总动脉窦处套入卡式探头，记录心输出量；左室插入压力换能器，记录左室压力；连接心电记录插头。所有信号进入多道生理记录仪一微机处理系统，最后开腹插入十二指肠插管，准备给药用。试验分五组，每组6只动物，分别是空白对照组，天麻首乌片组，复方银杏通脉口服液高、中、低剂量组，按随机表依次给药测量，分别记录给药后0、10、20、30、60、90、120分钟各数值，其中脑血管阻力指数为股动脉血压与脑血流量之比。2.2 结果表2可见，空白对照组给药前后各项指标没有显著性差异，表明实验状态在0120分钟内比较稳定，复方银杏通脉口服液高、中、低剂量组在给药后3090mim内；狗脑血流量、心输出量，脑血管阻力及总外周阻力给药前后比较，有显著性差异，表时复方银杏通脉口服液具有增加脑血流量、心输出量，降低脑血管阻力及总外周阻力的作用；天麻首乌片在给药3090mim内，狗脑血流量及脑血管阻力与给药前后比较，有显著性差异，二者在这两项指标上的作用是相当的。复方银杏通脉口服液高、中、低剂量组在给药期间对狗的血压、心率、左室压力无明显影响。21表1 复方银杏通脉口服液对阴虚大鼠血液生化及体重的影响组 别动物数（只）剂 量（g/kg）体重变化（g）OANP（pmol/ml）BUN（mmol/l）CR（uml/l）空白对照组10NS18.466.756.6478.085.624.320.878.45甲亢阴虚模型组10NS21.090.547.7885.070.826.110.0212.23阴虚加天麻首乌片组100.513.272.636.8181.476.425.000.7410.65阴虚加复方银杏液高剂量组108.414.358.716.7888.144.721.080.857.23阴虚加复方银杏液中剂量组104.215.257.046.2873.818.822.740.679.16阴虚加复方银杏液低剂量组102.113.968.216.6479.747.223.180.598.92与甲亢阴虚模型组比较 P0.05 P0.01 表2 复方银杏通脉口服液对狗心脑血管系统的影响组别剂量项 目给 药 前给 药 后 时 间 (min)1020306090120空白对照组血压 KPa16.02.217.22.417.02.117.42.517.12.316.82.016.21.8心率 次/min18725192361893418431186321903018528NS脑血流量 ml/min34.211.338.312.736.512.434.711.033.912.531.89.430.310.1心输出量 L/min0.51140.1010.5480.1180.5270.1130.5200.1180.5100.1030.5010.1210.4820.105脑血管阻力指数 0.4940.1350.4490.1270.4660.1320.5010.1380.5040.1250.5280.1430.5350.147外周血管阻力 DS/c10534940333443424335532355328554535647左室压力 KPa18.63.219.13.418.73.618.83.018.53.318.03.219.22.8天麻首乌血压 KPa17.32.8 17.83.017.73.016.82.716.42.916.22.616.22.8心率 次/min19436195321933419030191281852718829片组脑血流量 ml/min36.19.535.511.435.010.242.112.848.310.7*45.412.234.310.8心输出量 L/min0.5270.1230.5210.1060.5180.1150.5270.1200.5350.1260.5310.1140.4810.090.10g/kg脑血管阻力指数 0.4780.1020.4960.1500.5080.1370.3690.090*0.3400.101*0.3570.112*0.4720.121外周血管阻力 DS/cm534842358403623133846325343303735742左室压力 KPa19.33.419.03.019.22.819.53.619.33.218.03.318.82.9复方银杏液高剂量组2.52g/kg血压 KPa17.02.617.32.516.82.717.63.118.13.418.03.117.42.4心率 次/min19032188261923018932194351903018627脑血流量 ml/min36.511.836.112.738.010.647.513.255.714.6*54.512.7*31.311.8心输出量 L/min0.5230.0950.5310.1320.5410.1170.5830.1010.6360.110*0.6320.108*0.5350.124脑血管阻力指数0.4790.1060.4790.1270.4310.1030.3710.080*0.3250.094*0.3300.104*0.4580.129外周血管阻力 DS/cm53453134538329343202630233*30230*33949左室压力 KPa19.64.519.43.819.33.619.84.020.34.119.23.319.03.7复方银杏液中剂量组1.26g/kg血压 KPa16.31.816.01.716.32.018.82.118.82.417.32.718.52.5心率 次/min18423188251902719228194311903218329脑血流量 ml/min32.59.833.210.333.911.241.710.146.812.4*48.213.5*30.710.6心输出量 L/min0.4920.0810.4960.0940.5010.1130.5960.087*0.5900.1180.6070.099*0.4800.104脑血管阻力指数0.5020.1240.4820.1160.4900.1280.4650.1030.3610.114*0.3590.107*0.5370.138外周血管阻力 DS/cm535127342233513132818*30422*30228*36438左室压力 KPa19.02.019.23.219.33.419.53.419.23.419.63.318.32.7复方银杏液低剂量组0.63g/kg血压 KPa16.52.016.92.117.12.417.12.217.42.517.02.716.82.1心率 次/min18832190271902919232190331882818425脑血流量 ml/min37.312.836.812.437.712.343.611.549.910.355.19.932.18.3心输出量 L/min0.5520.1060.5450.1180.5600.1250.6060.1110.6080.1160.6130.1280.5180.109脑血管阻力指数0.4820.0840.4880.1020.5140.1170.3820.07*0.3880.101*0.3870.1160.5230.145外周血管阻力 DS/cm533724339293243229928*30329*29432*34452左室压力 KPa18.73.318.53.019.03.219.23.518.53.018.92.718.12.4与给药前比较 * P0.05 * P0.012.3 对离体兔基底动脉的影响2.3.1 方法取2kg以上家兔，雌雄不拘。戊巴比妥纳过量处死，开颅取出基底动脉，置KHI液中。分离出血管后，剪成45mm的动脉环，穿入两根直径为0.1mm的银丝，做成三角环状，置于37恒温KH液中，通95%O2+5%CO2。上三角环连于张力换能器，信息进入NIKONKOHDEN生理仪，下三角环负荷0.5g。待稳定1小时后，加入去甲肾上腺时后，去甲肾上腺素至2.010-5mg/ml浓度，产生最大收缩并稳定5min后，加入各药物（见表3），30mim后，测定其张力。基底动脉张力用g表示，并计算张力下降%。阳性药天麻首乌片剂量相当于复方银杏通脉口服液中剂量。2.3.2结果表3可见，加入去甲肾上腺素后，基底动脉产生收缩，复方银杏通脉口服液三个剂量组和天麻首乌片组均使收缩抑制，与空白对照组比较，复方银杏通脉口服液高、中剂量组和天麻首乌片组基底动脉张力有显著性差异；复方银杏通脉口服液低剂量组也有一定抑制作用，但没有显著情差异。而与空白对照组比较，其余各组张力下降百分率均有显著性差异。以上结果表明，复方银杏通脉口服液能抑制兔离体基底动脉收缩，对脑血管系统有一定的舒张作用。表3 复方银杏通脉口服液对离体兔基底动脉的影响（XSD）组别标本数（条）浓度（mg/ml）最大收缩张力（g）给药后张力（g）张力下降（%）空白对照组10NS0.460.120.430.125.94.9天麻首乌片组112.50.480.130.330.1130.88.7复方银杏液高剂量组9200.00.450.110.170.0762.820.1复方银杏液中剂量组1020.00.470.140.250.1042.516.4复方银杏液低剂量组102.00.440.120.360.1114.16.7与空白对照组比较，P0.05, P0.012.4 对大鼠血液流变学指标的影响2.4.1 方法取SD系大鼠50只，雌雄各半，体重180220g，随机分成5组，分别是（1）空白对照组；（2）天麻首乌片组；（3）（5）复方银杏通脉口服液高、中、低剂量组，连续灌胃相应药物10天，剂量见表4。末次给药后1h用乙醚麻醉动物，由腹主动脉取血，用肝素抗凝，送省交通医院测定，各项指标测定方法如下：血液粘度：采用上海产SWDJ型血液回旋粘度计测定，切变速率60S-1。血浆粘度：采用上海医疗器械十厂的毛细管粘度计测定。红细胞压积：采用微量毛细管离心法，于5000r/min下离心10min，计算红细胞占总体积的百分率。血小板聚集：用光密度法，用ADP诱导血小板聚集，用PA3210血小板聚集仪测定聚集峰值。2.4.2 结果表4表明，复方银杏通脉口服液高、中、低剂量组与空白对照组比较，血液流变学各项指标显著降低，天麻首乌片组与空白对照组比较，血液粘度、血浆粘度也显著降低，表明复方银杏通脉口服液具有活血通脉之功效。2.5 对小鼠记忆力的影响2.5.1 方法取ICR小鼠若干，体重1822g，小鼠禁食12小时后，用复杂迷宫取食法，先出取食时间在100300S内小鼠50只，雌雄各半，随机分成五组，分别是（1）空白对照组；（2）天麻首乌片组；（3）（5）复方银杏通脉口服液高、中、低剂量组。（1）组灌胃生理盐水0.5ml/20g，（2）组灌胃天麻首乌片0.78g/kg，（3）（5）灌胃复方银杏通脉口服液分别为12.0g/kg，6.0g/kg，3.0g/kg（分别相当于临床剂量的4、2、1倍），每天1次，连续灌胃10天，第9天开始训练3次，然后禁食12小时，于末次给药30分钟后测定取食时间，见表5。2.5.2结果表5表明，复方银杏通脉口服液高、中剂量组和天麻首乌片组与空白对照组比较，取食时间明显缩短，表明复方银杏通脉口服液具有增强小鼠记忆力的作用，其功效和天麻首乌片相当。表4 复方银杏通脉口服液对大鼠血液流变学指标的影响组 别动物数（只）剂 量（g/kg）血液粘度（60s-1）血浆粘度（mpas）血小板凝聚（%）红细胞压积（%）空白对照组10NS5.121.4854.8543.250.830.2611.282.02天麻首乌片组100.54.361.2140.1842.180.720.2710.722.24复方银杏液高剂量组108.44.161.1540.2439.600.670.259.501.98复方银杏液中剂量组104.84.071.2438.7741.270.760.268.162.15复方银杏液低剂量组102.14.331.2744.8340.380.810.3010.292.10与空白对照组比较，* P0.05 * P0.01表5 复方银杏通脉口服液对小鼠记忆力的影响组别动物数（只）剂量（g/kg）取食时间（xSD S）空白对照组10NS217.6天麻首乌片组100.7830.5185.4复方银杏液高剂量组1012.021.6*173.8复方银杏液中剂量组106.024.8*169.3复方银杏液低剂量组103.025.5*196.2低剂量组27.9与空白对照组比较，*P0.05，*P0.01。3、小 结复方银杏通脉口服液能降低甲亢阴虚型大鼠血液CAMP、BUN、CREA，降低大鼠血液流变学指标（全血粘度、血浆粘度、红细胞压积、血小板聚集），具有滋阴补肝肾，活血通脉之功效；能明显提高小鼠记忆力；能增加狗脑血流量，心输出量，降低脑血管阻力及外周血管阻力，能舒张离体兔基底动脉，具有改善心、脑血管及外周血循环的作用。以上药理研究为临床应用提供了药理依据。参考文献1、李仪奎等：中药药理学实验方法学，人民卫生出版社，1991年6月第1次印刷。2、毛良等：浙江中医杂志 1986.5:2263、徐淑云等：药理学实验方法，人民卫生出版社，1991年第2次版。4、谢人明等：中草药 1986.8:235、刘元斌等：中国药理学报 1987.3:2246、廖福龙等：中西医结合杂志 1988.2：103实验负责人：李勇敏参加人员：熊建宾 刘 敏 姜友平 马子南 王晓红 首第武实验日期：95年8月95年10月原始资料保存处：省中医药研究院科教处复方银杏通脉口服液动物急性毒性试验资料摘 要将复方银杏通脉口服液缩成最大浓度4.76g/ml，给予小鼠以最大剂量，最大体积灌胃，此时最大剂量可达571g/kg，相当于人临床用量的1464倍以上，动物未见明显毒性作用，结果表明该药一次性用药是安全的。1、试验目的观察复方银杏通脉口服液一次性用药的安全性。2、药物复方银杏通脉口服液：湖南省中医药研究院中药所制剂室提供，批号950801，水浴浓缩成最大浓度为4.76g/ml。3、动物：ICR小鼠，清洁级，体重1820g，雌雄各半，购自湖南医科大学实验动物中心。4、方法：由预试结果可知，最大浓度最大体积给药没有小鼠死亡，求不出LD50 ，此时测定最大耐受量。 取小鼠20只，雌雄各半，禁食不禁水12小时，按0.8ml/20g剂量灌胃小鼠，24小时内3次，观察给药后小鼠反应情况及7天内小鼠死亡情况。5、结果：给药后动物正常，连续7天未见异常，亦无动物死亡，处死动物后，肉眼观察动物心、肝、脾、肺、肾等脏器均未见异常。小鼠灌胃给药最大耐受量达571g(生药)/kg（体重），按体表面积折算，相当于70kg人临床等效剂量的188倍。按公斤体重计算，相当于60kg人临床用量的1464倍，详见下表：表 复方银杏通脉口服液急性毒性试验结果批号给药途径浓度g/ml最大耐量g/kg临床用量g/kg相当于人用倍数动物数（只）观察时间（天）变化情况死亡（只）解剖情况950801经口4.765710.391464207正常0正常6、讨论：由以上结果看出，该药最大用量达临床用量的1464倍时，动物未见异常，表明该药一次性用药较为安全。7、结论：复方银杏通脉口服液一次性用药是较安全的。试验负责人：李勇敏 助理研究员参 加 者：彭淑珍 李勇敏试验 日 期：95年8月1日至9月1日复方银杏通脉口服液动物长期毒性试验资料摘要复方银杏通脉口服液7.5g/kg、30.0g/kg浓度，连续给大鼠灌胃给药3个月（12周），结果给药期及恢复观察期与对照组比较，大鼠一般状况，体重增长，血液学指标，主要脏器之脏器系数，肉眼观察及镜下组织形态学观察均无明显差异或异常，表明复方银杏通脉口服液临床应用是较安全的。一、试验目的观察大鼠长期口服复方银杏通脉口服液所产生的毒性反应及其程度，以确定临床用药的安全性。二、材料与方法1、药物复方银杏通脉口服液，批号：950601，由湖南省中医药研究院中药所制剂室提供，实验时药浓度为0.78g/ml，3.0g/ml（只设高、低剂量组）。2、动物及饲养SD系清洁级大鼠，8-9周龄，体重60-80g，雌雄各半，由本院实验动物中心提供，试验给药期间室温控制在18-25，通风良好，笼具卫生。3、方法：将动动随机分成三组，每组20只，雌雄各半，1、空白对照组：灌胃生理盐水2.0ml/200g；2、低剂量组：灌胃药物剂量为7.5g/kg，每日1次（相当于临床用量20倍）；3、高剂量组：灌胃药物剂量为30.0g/kg，每日1次（相当于临床用量78倍）。连续给药12周，根据体重变化，每周相应调整给药量。4、检测项目（1）临床观察：每日观察记录动物一般状况，包括外观体征、行为活动、精神、毛发、粪便、进食及体重增长情况（每周称体重一次）。（2）血液学指标：给药12周后，剖杀2/3动物（计12只），采血测定血液RBC、HB、WBC+DC、Pt及CT值。（3）血液生化指标：采血测定血清ALT、AST、BUN、CR、T-CHD、TP、ALB值。（4）病理组织学检查系统尸检：对全部动物剖检，观察有无肉眼病变及异常，包括表面及切面，重点观察心、肝、脾、肺、肾等重要脏器组织；脏器系数测定：对全部动物的心、肝、脾、肺、肾进行称重，计算各个脏器系数并统计。组织学检查：将全部动物的心、肝、脾、肺、肾用10%富尔马林固定，送病理室检查。恢复性观察：停药后，余下1/3动物，饲养观察4周后，检查项目同给药期，以了解有关延迟毒性以及毒性可逆恢复情况。三、结果1、对大鼠临床观察项目的影响与对照组比较，复方银杏通脉口服液二个剂量组大鼠外观体征、行为活动、精神状态、粪便、进食、体重增长等均无明显影响（其中各组体重变化情况见表1）2、对大鼠血液学指标的影响与对照组比较，复方银杏通脉口服液二个剂量组大鼠血液RBC、HB、WBC+DC、Pt及CT均无明显影响（见表2）3、对大鼠血液生化指标的影响与对照组比较，复方银杏通脉口服液二个剂量组大鼠血清ALT、AST、T-CHD、TP、ALB无明显影响；而BUN、CR均显著性低于对照组（P0.05），停药恢复4周后，各项指标正常（见表3）4、对大鼠重要脏器之脏器系数的影响与对照组比较，复方银杏通脉口服液二个剂量组大鼠心、肝、脾、肺、肾之脏器系数无明显影响（见表4）5、对大鼠重要脏器组织形态学的影响（见病理报告）。表1 复方银杏通脉口服液对大鼠体重变化的影响（XSD g）时间(n)给 药 期 恢复性观察期体重（g）012345678910111213141516组别空白对照组73.390.8118.0131.5149.0166.8178.8187.1193.4202.8211.5219.2224.3235.5241.6248.5252.1雌5.87.18.28.719.315.514.315.216.112.415.718.015.311.88.48.88.4复方银杏液74.093.7116.8128.4142.8160.3175.4190.4208.3208.1214.8220.5227.0230.3236.2342.1247.0低剂量组5.16.06.88.611.716.818.715.521.820.318.718.320.810.711.412.08.4性 复方银杏液72.888.8116.3130.0148.4163.3180.6187.6184.1200.2208.8214.2220.4227.1230.8238.4246.7高剂量组4.76.47.510.710.016.117.817.820.818.818.218.421.78.28.311.38.6空白对照组78.289.6121.2139.5158.1179.0198.2208.4218.0227.5236.3247.1258.3267.8273.2278.7284.2雄5.58.45.88.810.515.618.818.518.818.820.121.621.812.113.113.514.4复方银杏液70.484.8116.7135.2158.8172.7180.5202.3217.7228.6240.8247.5257.0259.5263.7272.9276.4低剂量组7.06.87.68.49.414.012.116.817.518.421.920.823.69.411.610.412.6性 复方银杏液72.687.3118.4139.0161.7183.2184.9201.0213.4222.8230.7239.0245.4255.7263.6271.1277.8高剂量组5.07.18.28.712.816.113.814.418.017.718.218.520.615.816.216.314.8与空白对照组比较:P0.05 n12 动物数20只 n12 动物数8只表3复方银杏通脉口服液对大鼠血液生化指标的影响(XSD)组 别ALT(m/L)AST(m/L)BUN(mmoL/L)CR(mmoL/L)T-CRO(mmoL/L)TP(g/l)ALR(g/l)给药期空白对照组75.00144.083.8880.761.4857.8834.3511.1320.100.8710.330.172.001.00复方银杏液78.78155.384.8872.831.3854.9733.59低剂量组8.4121.620.808.770.126.542.15复方银杏液85.83108.174.8468.111.3856.5734.01高剂量组16.7627.350.548.210.174.403.58恢复性观察期空白对照组77.36142.333.0777.471.4158.0233.7815.4716.450.3311.220.188.743.28复方银杏液75.71146.525.7672.541.4457.2034.75低剂量组10.0211.470.748.680.108.874.12复方银杏液80.17145.105.8974.251.4055.3233.27高剂量组14.7319.740.918.100.197.563.64与空白对照组比较 * P0.05表4复方银杏通脉口服液对大鼠重要脏器系数的影响(XSD)组 别心（g/100g）肝（g/100g）脾（g/100g）肺（g/100g）肾（g/100g）空白对照组0.3840.0363.1560.2270.2510.0430.6320.2030.5540.117给复方银杏液0.3960.0323.2740.2350.2540.0500.67