GC-MS法测定冰硼含片中冰片的含量.doc

GC-MS法测定冰硼含片中冰片的含量GCMS法测定冰硼含片中冰片的含量张晓川lk,陈琴华1,2,张卓,朱军(1.郧阳医学院附属东风总医院药剂部,十堰市442008;2.西安交通大学医学院,西安市710061)中图分类号R283.64;R927.2文献标识码A文章编号i0010408(2007)36284502摘要目的:建立以气相色谱一质谱联用技术测定冰硼含片中冰片含量的方法.方法:色谱柱为DB5型石英毛细管(3om0.32mm0,25vm),样品用乙醚超声提取,采用选择离-Tm,l(SIM)法定量.结果:冰片检测浓度在10.0500.0g?mL范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系(r=0.9999);平均加样回收率为98.55%,RSD=1.13%(=6);最低检测限为10pg.结论:本方法简便,快速,结果准确,可用于冰硼含片的质量控制.关键词气相色谱质谱联用技术;冰片;冰硼含片;选择离子监测法GC.MSAssayfortheDeterminationofBorneolContentinBorneolBuccalTabletZHANGXiaochuan,CHENQinhua,ZHUJun(Dept.ofPharmacy,TheAffiliatedDongfengGeneralHospitalofYunyangMedicalCollege,Shiyan442008,China)CHENQinhua,ZHANGZhuo(SchoolofMedicine,XianJiaotongUniversity,Xian710061,China)ABSTRACTOBJECTIVE:TodevelopanewmethodofGCMSassayforthedeterminationofBorneolcontentinBorneolbuccaltablet.METHODS:TheBorneolwasanalyzedquantitativelyontheDB5quartzcapillarychromatographiccolumn(30m0.32mm0.25m).Thesamplewasextractedbyultrasoundindiethyletherandquantifiedbyselectiveionmonitoring(SIM),RESULTS:AgoodlinearrelationshipwasachievedforBorneolovertherangeof10.0500.0g?mL(r=0.9999).Theaveragerecoverywas98.55%(RSD=1.13%,=6)andthedetectionlimitwas10pg.CONCLUS10N:Themethodissimple,rapidandaccurate,andsuitableforthequalitycontrolofBorneolbuccaltablet.KEYWORDSGaschromatographymassspectrometry(GCMS);Borneol;Borneolbuccaltablet;Selectiveionmonitoring(SIM)冰硼含片是在冰硼散的基础上经剂型改制而成.原剂型收载于1995年版中国药典(一部),由冰片,硼砂,朱砂,玄明粉4味中药组成】,具有清热解毒,消肿止痛及抗溃疡的功效,临床用于口腔疾患,百日咳,带状疱疹,子宫颈糜烂等症的治疗.其中,冰片为龙脑香科常绿乔木龙脑香DryobalanopsaromaticaGaertnerf,树脂的加工品.中医认为,冰片味辛苦,微寒,归心,脾,肺,有开窍醒神,通诸窍等作用.笔者使用气相色谱质谱(GCMS)联用仪,选用选择离子监测(SIM)法,对冰片进行含量测定,方法简便,快速,结果准确,可用于冰硼含片的质量控制.1材料1.1仪器QP2010型GCMS联用仪(日本岛津公司);SK1型快速混匀器(江苏国华仪器厂);AS3120型超声波清洗器(南京昕航科学仪器有限公司).1.2试药冰片对照品(中国药品生物制品检定所,批号:881200001);冰硼含片(西安交通大学药业集团,批号:051114,050912,050711,050614,050302);高纯氦气(昆山普克莱斯实主管药师.研究方向:临床药学.电话:07198272348中国药房2007年第18卷第36期用气体有限公司,纯度99.99%);正己烷,乙醚(分析纯,西安化学试剂厂).2方法与结果2.1色谱条件分析柱:DB5型石英毛细管(30m0,32mm0.25/m);载气:高纯氦气;流速:2,OmL?min;进样El温度:2()(】;进样方式:分流进样,分流比为10:1;程序升温:起始温度70C,保持2min,以5C?min速率升温至130,保持2min;进样量:luL;接口温度:200C;热电离(EI)源温度:200C;电子轰击能量:70eV;采用SIM(选择离子为95),采集延时2.5min.2.2溶液的配制2.2.1对照品溶液的配制:精密称取冰片对照品100.0mg,置于100mL容量瓶中,用5,0mL乙醚溶解,用正己烷定容,配制成1,0mg?mL的对照品贮备液,再用正己烷分别稀释配制成浓度为10,20,50,80,100,200,300,500g?mI的系列溶液,备用.2,2.2供试品溶液的配制:取冰硼含片10片,精密称定,研细,精密称取100mg,置于10mL容量瓶中,加入8.0mL乙醚,超声提取20min,用正己烷稀释至刻度,静置,吸取上清液进样分析.2.3方法专属性试验在上述色谱条件下,冰片对照品全离子扫描(FullSCAN)图及其质谱图和分子式见图1;对照品和样品的SIM图谱见图2.3.04.05.06.07.08.09.010.011.012.0图1GCMS/SCAN图谱Fig1TotalioncurrentchromatogramofBorneolI.1C图2GCMS/SIM图谱A.空白辅料;B.冰片;C.样品Fig2SelectedionmonitoringchromatogramsA.blank;B.Borneol;C.sample由图1可以看出,冰片的基峰(m/z)为95,故笔者选择其为检测离子.由图2可以看出,冰硼含片中的杂质对其含量测定无干扰,其保留时间为9.7min.2.4线性关系考察取2.2.1,项下的冰片对照品系列溶液,按2.1,项下色谱条件进样.以浓度(x)为横坐标,峰面积积分值(y)为纵坐标进行线性回归,得回归方程为Y=25490x一123727(r=0.9999).结果表明,冰片检测浓度在10.0500.0g?mL范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系.在信噪比(S/N)为3时,测得最低检测限为lOpg.2.5精密度试验取2.2.1,项下对照品溶液1.Op.L,按2.1项下色谱条件连续进样6次,测定.结果,冰片峰面积的RSD=1.25%,表明仪器精密度良好.2.6稳定性试验取2.2.2项下供试品溶液1.Op.L,分别在0,2,4,8,16h时按2.1项下色谱条件进样测定.结果,冰片峰面积的RSD=1.69%,表明供试品溶液在16h内稳定.2.7重现性试验取同一批冰硼含片,按2.2.2项下方法制备6份供试品溶液,分别按2.1项下色谱条件进样测定.结果,冰片峰面积的RSD=1.63%,表明方法重现性良好.2.8加样回收率试验取同一供试品溶液(相当于含冰片79.40/,g?mL)6份各500L,分别加入冰片对照品溶液(80tg?mL)50L,混2846ChinaPharmacy2007Vo1.18No.36匀,按2.1项下色谱条件进样1.Op.L,测定,计算加样回收率.结果详见表1.表1加样回收率试验结果(n=6)Tab1TherecoveryofBorneol(n6)2.9样品含量测定取冰硼含片5批,按2.2.2项下方法制备供试品溶液,按2.1项下色谱条件进样测定,并采用外标法,以峰面积计算5批样品中的冰片含量(以每片含冰片的质量计算).结果详见表2.表2样品含量测定结果(n=5)Tab2BorneolcontentinBorneoltablet(n5)规定每片冰硼含片含冰片以龙脑计不得少于3.5rag,可以看出这5批制剂均符合规定.3讨论笔者首次采用GCMS/SIM法测定冰硼含片中冰片的含量,从色谱图可以看出,空白辅料杂质峰不干扰测定,方法专属性强;相关系数和回收率结果均符合含量测定的相关要求,且检测限低(10pg),因而是测定冰片的有效方法.在冰片SIM图谱中两侧的同质量峰组分为异龙脑,其可以产生与龙脑同样的质荷比(m/z=95).在选择溶剂时,笔者曾考虑使用乙醇和乙酸乙酯,但其所含杂质特别多,不利于分离;若使用氯仿作为溶剂,其极性较强,对试验所使用的弱极性的色谱柱不利.经综合考虑,最终笔者选择了乙醚,正己烷作为溶剂.参考文献1J张岚,李斐.冰硼含片中冰片含量测定方法的改进JJ.药品检测,2001,10(7):40.2】鲍廷铮,许军,王庆伦.冰硼散药理作用与临床应用概况J】.江西中医学院,1997,9(4):47.3】张瑞涛,王晖,陈丽,等.冰片滴鼻对豚鼠鼻黏膜血管和脑