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文档简介

硅胶薄层色谱板的制备和硅胶色谱柱的填装 天然药物学 一 实验目的 掌握硅胶薄层色谱板的制备方法 掌握硅胶色谱柱的填装方法 二 原理及应用 吸附色谱 硅胶薄层板可用于化合物定性与定量 硅胶色谱柱可用于化合物分离和纯化 装置图 一 薄层色谱 层析缸 薄层板 装置图 二 溶剂 石英砂或固定相 硅胶 砂芯或棉花 柱色谱装置 关于薄层色谱和柱色谱 相同点 薄层色谱和柱色谱都属于液 固吸附色谱 都是经过在吸附剂和展开剂 洗脱剂 之间的多次吸附 溶解作用 将混合物中各组分分离成孤立的样点 实现混合物的分离 不同点 薄层色谱 是将吸附剂涂布在玻璃板上 形成薄薄的平面涂层 干燥后在涂层的一端点样 竖直放入一个盛有少量展开剂的有盖容器中 展开剂接触到吸附剂涂层 借毛细作用向上移动 柱色谱 是将吸附剂装于柱中 当待分离的混合物溶液流过吸附柱时 各种成分同时被吸附在柱的上端 当洗脱剂流下时 由于不同化合物吸附能力不同 往下洗脱的速度也不同 从而达到分离的目的 三 实验步骤 硅胶薄层色谱板的制备1 把一份硅胶H和三份0 75 CMC Na水溶液 M V 溶液置研钵中充分研匀 2 将玻璃板置一水平的平面上 取适量硅胶和CMC Na混合物倒入玻璃板上 轻轻震动使混合物在玻璃板上铺匀 阴干 3 把阴干好的硅胶板在105 的烘箱中烘30min 4 待板凉至室温后 至干燥器中保存 硅胶色谱柱的填装1 将一小团脱脂棉放于色谱柱底部 2 将硅胶慢慢倒入色谱柱中 轻轻敲击柱子外侧 3 打开活塞 将洗脱剂慢慢加入柱子中流过柱体 直至整个柱床全部润湿 关闭活塞备用 三 实验步骤 四 注意事项 硅胶和CMC Na要充分研匀 没有硅胶团和气泡 混合物的量要适中 不能铺的太厚 装柱时硅胶一次性全部加入 在洗脱剂没
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