出凝血课件完整版(终版).ppt

出血 血栓 止血检测 江西省儿童医院检验科柯江维 血管中流动的血液为什么不凝固破损的血管为什么能止血 生理状态下 机体内存在着复杂的凝血系统和抗凝系统 凝血血栓 抗凝出血 血液凝固血液由流动的液体状态变成不流动的凝胶状血块的过程称为凝血 血浆 内有纤维蛋白原和凝血因子血清 缺少纤维蛋白原和部分凝血因子 但增添了一些由血管内皮细胞和血小板释放的化学物质 人体止血包括血管 血小板 凝血和纤溶系统四个主要方面 这四方面之间又相互作用和调控 作为一个检验医生 首先应弄清正常的凝血与抗凝机制 如何建议医生正确选择实验室检查项目如何正确判断检验结果 抗凝机制 正常止血机能 两个方面 四个因素 凝血机制 血管壁 血小板 凝血系统 抗凝及纤溶系统 凝血与抗凝机制的病理生理基础 一 血管壁的作用 血管受损血管收缩止血血液粘稠止血内皮细胞PLT黏附聚集止血TXA25 HT释放暴露内皮下胶原激活 内源性凝血止血TF释出外源性凝血止血 神经反射 内皮素血管紧张素 vWF 一 血管壁的作用 血管的止血作用表现为 血管的收缩 血小板的激活 凝血系统的激活 局部血粘度的增高 正常血管壁抗血栓形成能力 血管内皮细胞合成前列环素 PGI2 扩张血管 抑制plt功能纤溶酶原激活物 PA 激活纤溶酶 清除小凝块血栓调节蛋白 TM 参与蛋白C系统的抗凝作用肝素或类肝素物质具有多种抗凝活性 二 血小板的作用 血管受损vWF血小板黏附PLT聚集 FgPLT释放 5 HTADP 血管加速 加速 a使纤维蛋白收缩聚集形成网收缩 维护血管内皮的完整性 血小板参与血管内皮的再生和修复过程 增强血管壁的抵抗力 减低血管壁的通透性和脆性 血小板止血功能 粘附 聚集在血管破损处 形成白色血栓 释放活性物质 促进血小板聚集 增强血管收缩 促进凝血过程 血块收缩 形成稳固血栓 维持血管壁的完整性 毛细血管的通透性 一期止血缺陷特征 一期止血缺陷指血管壁和血小板的缺陷 皮肤 粘膜出血为主 内脏出血少见 创伤后即刻出血 持续时间较长 压迫止血有效 止血后不易复发 输血或输血制品效果差 常用筛选试验如下 毛细血管抵抗力试验 CRP 出血时间 BT 血小板计数 PLT 血块收缩试验 CRT 三 凝血因子与凝血过程 血液由流动状态变为凝胶状态称血液凝固 是由一系列凝血因子参加的 复杂的酶促反应和分子聚合过程 血液凝固 血管损伤后出血止血过程 1 血管收缩 血管变窄 目的是减少血液流向受损区域2 血小板堆积 血小板快速流向创伤处 粘附在血管壁上 凝血因子促进血小板堆积3 纤维蛋白凝块形成 在血小板堆上形成紧密的纤维蛋白网 通过凝血因子的交互作用形成纤维蛋白 该作用类似 多米诺骨牌 StructureofBloodClot 在损伤处形成凝块 内皮细胞释放抗凝物质 肝素 AT蛋白C 历史 17世纪中叶 从血细胞和血清中分出 凝块纤维 进行形态研究19世纪初 现代凝血概念的起源 凝块纤维 来源于血浆 命名为纤维蛋白 发现 凝血酶 20世纪初 提出凝血理论 是外源凝血途径的基础 认为Fg II TF Ca2 参与凝血 1964年 瀑布学说 少量FXII即能使大量凝血酶原转为凝血酶 内源凝血途径的基础 上世纪90年代后 组织因子途径学说 存在于血液中的凝血因子均为无活性的酶原血液凝固是一系列凝血因子连锁性反应的结果 当凝血过程被激活时 其中一个凝血因子按顺序以另一个凝血因子为底物 使之激活成为具有活性的酶 形成 瀑布样反应 凝血过程一旦开始 一定会进行到底 凝血过程有一自行扩大的正反馈作用 凝血因子 纤维蛋白原 凝血酶原 组织因子 钙离子 易变因子 不存在 稳定因子 抗血友病因子 Christmas因子 Stuart Power因子 血浆凝血活酶前加速素 Hegeman因子XIII纤维蛋白稳定因子PK激肽释放酶原HMWK高分子量激肽原 目前公认的凝血因子共14个 按罗马字命名的有12个 经典 以及高分子量激肽原 HMWK 激肽释放酶原 PK 大多数由肝脏产生 其中II VII IX X合成依赖于Vitk 称Vitk依赖因子除TF外 都存在于血浆 除FIV Ca2 外 均为蛋白质 正常情况下 所有因子都处于无活性状态 1 维生素K依赖的凝血因子 包括FII VII IX和X PC PS 共同特点 分子结构中的氨基 N 末端含有 羧基谷氨酸残基 Gla Gla在肝细胞内的生物合成依赖VitK的介导具有结合Ca2 的能力 并借助于Ca2 与磷脂膜结合 Ca2 起 搭桥 作用 羧基谷氨酸 Ca2 磷脂膜 若缺乏VitK或上述4个因子N端无 Gla则无凝血活性 可导致新生儿出血或获得性成人出血性疾病 1 因子II 凝血酶原 prothrombin 分子量72000 血浆浓度1500nmol L 生理活化途径 FII A和B两条肽链构成的凝血酶 FIIa 凝血酶原酶 精274 苏275肽键断裂 释放出F1 2 中间产物 凝血酶原酶 精323 异亮324肽键断裂 凝血酶使纤维蛋白原转变为纤维蛋白 遗传性凝血酶原缺陷症非常罕见 为常染色体隐性遗传性疾病 2 因子VII 稳定因子 stablefactor 分子量48000 血浆浓度10nmol L组织损伤时 TF释放到血液中 FVII与其结合 分子构型改变 暴露活性部位 成为VIIa 凝血活性增强约100倍TF FVIIa Ca2 可激活FX和IX 使内源及外源凝血途径相沟通由TF释放到TF FVIIa Ca2 形成的过程是体内最重要的凝血途径FVII缺陷常合并严重出血 3 因子IX 血浆凝血活酶成分 plasmathromboplastincomponent PTC分子量57000 血浆浓度80nmol L 可被FXIa或TF FVIIa Ca2 复合物激活 FIX FXIa 精146 丙147肽键断裂 无活性双链 FIX FXIa 使重链上的精181 缬182肽键断裂 有活性 FIXa FIX缺乏为血友病B 是一种性联隐性遗传性疾病 4 因子X stuart prower因子 分子量55000 血浆浓度160nmol L 处于 内源 外源及共同途径的交点 具有重要的生理和病理意义 可被IXa VIIIa Ca2 磷脂 TF FVIIa Ca2 激活 有活性的 FXa FX 重链上的精51 异亮52肽键断裂 从其N端释出一小肽 从其C端释出含17个氨基酸残基的一小肽 有酶活性的 FXa FX缺陷为常染色体隐性遗传性疾病 两性均可受累 2 接触凝血因子 指参与内源性凝血途径接触相激活的凝血因子 包括FXII XI PK HMWK共同特点 通过接触反应启动内源凝血途经 并与激肽 纤溶和补体等系统相联系缺乏并不出现出血现象 除FXI缺乏有轻度出血外 反而表现出不同程度的血栓形成倾向或纤溶活性下降 1 因子XII 接触因子 hagemanfactor HF为单链糖蛋白 是内源凝血途径的始动因子 FXII的激活不再是体内凝血的一个重要环节 而对纤溶系统的激活作用更大 体外凝血试验仍有沿用各种物质去激活FXII FXII的激活 固相激活 与带负电荷的物质接触 体内 胶原 微纤维 基底膜长链脂肪酸等 体外 玻璃 白陶土 硅藻土等分子构型发生改变活性部位暴露FXIIa FXII的激活 液相 酶类 激活 单链FXII 激肽释放酶纤溶酶凝血酶胰蛋白酶等 在精353 缬354肽键处断裂 FXIIa 重链和轻链 酶活性中心位于轻链 激肽释放酶 在重链精334处裂解 FXIIa仍有酶活性 血液中FXI是与HMWK结合成复合物的形式存在 FXIa激活纤溶的作用大于激活FIX 甚至大于FXIIa对纤溶的作用 FXI 凝血酶或体外FXIIa 精369 异亮370肽键断裂 FXIa 活性中心位于2条轻链C端的丝氨酸残基 2 因子XI 血浆凝血活酶前质 plasmathromboplastinantecedent PTA 3 激肽释放酶原prekallilarein PK 与FXI相似 PK在血液中是与HMWK结合成复合物的形式存在 PK缺陷与FXII一样 病人无任何出血症状 却常合并血栓栓塞性疾病 PK FXIIa 精371 异亮372肽键断裂 K 酶活性中心位于轻链 重链区有于HMWK结合的部位 K的作用是激活FXII FXI 使HMWK激肽 使PLG 纤溶酶原 PL 4 高分子量激肽原highmolecularwightkininogen HMWK血液中HMWK与PK FXII结合成复合物的形式存在 起辅因子作用 参与FXII FXI的激活生成的激肽有扩张血管 增加血管通透性及降低血压的作用HMWK缺陷与其他接触活化因子缺陷病人一样 无出血症状 3 对凝血酶敏感的凝血因子 包括FI V VIII XIII共同特点 对凝血酶甚为敏感 从而发生酶促反应或被激活 1 因子I 纤维蛋白原 fibrinogen Fg FIB 为血液凝固的基础物质 是凝血酶作用的底物 A A B A B 340K 纤维蛋白原 Fg为两个单体组成的二聚体蛋白每个单体都有A B 及 三条肽链分子的三维空间构形是由6条肽链形成3个球状区域中央区称E区 两侧外周区称D区 Fg转变为纤维蛋白的过程 纤维蛋白单体 FM 形成 酸性纤维蛋白肽 18 20残基 精 甘 裂解部位 球状单位 单体交互作用部位 D 区 在IIa作用下 FgA 链上精16 甘17键和B 链上精14 甘15键先后被裂解 释放出FPA FPB FgFM 去A去B的Fg或血栓前体蛋白 PTP FM的聚合 FPA FPB释放后 每个FM分子N端区的自身聚合位点暴露 与另一分子的D区相应位点结合 形成可溶性FM聚合物 SFM 纤维蛋白肽A B 聚合作用 交联纤维蛋白形成 SFM在FXIIIa和Ca2 作用下 链和 链之间以共价键 CO NH 交联 形成不溶性FM聚合物 即Fb 纤维蛋白形成过程 Fg FM 纤维蛋白聚合物 交联纤维蛋白 凝血酶FXIIIa 2 因子V 易变因子 labilefactor在体外 是最不稳定的凝血因子 是FXa的辅因子 参与II的激活 起始凝血酶 FXaFVFVaFV缺陷有副血友病之称 有轻度出血症状 3 因子VIII复合物 抗血友病球蛋白 antihemophilicglobulin AHG由因子VIII促凝活性与vWF形成复合物形式存在 1 99 是FIXa的辅因子 可被IIa激活FVIIIaFVIII缺乏为血友病A 是最常见的出血性疾病 4 因子XIII 纤维蛋白稳定因子 fibrinstabilizingfactor FSF 由2个a亚单位和2个b亚单位组成的四聚体 a2b2 活性部位在a亚单位 b亚单位无催化活性 FXIIIa2链 IIaCa2 N端的精 甘键断裂 无活性的a2 b2 Ca2 有谷氨酰胺酶活性的FXIIIa a2 4 其他凝血因子1 因子III 组织因子 组织凝血活酶tissuefactor TF广泛存在于各组织细胞中 特别在脑 胎盘 肺中含量丰富 正常血中不含TF 内皮细胞内毒素 免疫复合物 单核细胞 含低TF活性 IL 1 TNF等刺激下可以合成和表现TF FIII 辅因子 与FVII或FVIIa形成复合物 2 因子IV 钙离子 calcium Ca2 与其他二价金属离子 Mg2 和Zn2 共同参与凝血过程Ca 参与 FXI和XIII的活化 FIXa与FVIIIa 内源 FIII与FVIIa 外源 FXa与FVa 共同 等复合物的活化 在凝血反应中 Ca 主要促使活化的凝血因子与磷脂表面形成复合物 Ca 对血液凝固起关键作用 无Ca 血液不能凝固 凝血因子特性丝氨酸蛋白酶 II VII IX X 酶活性XI XII PK辅因子 III V VIII HMWK依赖VitK II VII IX X在吸附血浆中没有 VitK依赖因子在血清中没有 Fg V VIII XIII 储存不稳定 V VIII内源 VIII IX XI XII PK HMWK参与凝血途径外源 III VII共同 I II V X XIIIIV3个途径都有参与 附表 凝血因子凝血因子 是指血浆和组织中直接参与凝血的物质 根据发现的先后顺序 以罗马数字编号 见表3 1 凝血过程 分为三个阶段 两个途径 内源性 外源性 第一阶段 凝血酶活酶形成第二阶段 凝血酶形成第三阶段 纤维蛋白形成 凝血过程 瀑布学说 凝血过程大体上分为三个基本步骤 凝血酶原激活物形成 凝血酶原凝血酶 纤维蛋白原纤维蛋白 凝血机制 1 凝血过程的瀑布学说内源凝血途径 intrinsicpathway 是指由FXII被激活至FIXa VIIIa Ca2 PF3复合物形成过程 外源凝血途径 extrinsicpathway 是指从TF释放到TF VIIa Ca2 复合物形成的过程 共同凝血途径 commonpathway 是指从FX的激活到纤维蛋白形成的过程 它是内 外凝血系统的共同凝血阶段 两条凝血途径并不是完全独立 而是相互密切联系在机体的整个凝血过程中可能发挥不同的作用 在体内已不再是主要的凝血途径 是体内凝血的主要途径 也是发生止血血栓病理改变的主要原因之一 凝血过程 凝血活酶形成 内源性凝血途径外源性凝血途径 接触胶原纤维 组织因子 Ca2 XIIaXIIVIIaVIIXIXIaIXIXaVIIICa2 PF3XXa V Ca2 磷脂VIIICaPF3XXaVCa磷脂 TF FVIIa Ca2 凝血过程 凝血酶形成 XaVaCa2 磷脂凝血酶原凝血酶 凝血过程 纤维蛋白形成 凝血酶纤维蛋白原XIII纤维蛋白单体XIIIa以共价键聚合的纤维蛋白网络 缓激肽 起始阶段 复合物 TF 激活 复合物 凝血酶原酶复合物 扩增阶段 可溶性Fb 不溶性交联的Fb Fg HMWK PK K IIaCa2 VIIIVIIIaIIIPlt PF3Ca2 IIaXaVVaCa2 正常凝血过程 瀑布学说 PF3 磷脂 凝血酶原 II 凝血酶 IIa 纤维蛋白原 I 可溶性纤维蛋白稳固性纤维蛋白 内源性途径 胶原等带负电荷表面 HMWKK XIIXIIa 外源性途径 组织损伤释放 组织因子 III XIXIa IIa IXaXIIa K IXIXa VIIaVII XIIIXIIIa 参加因子 XXa VIII IX XI XIIV X II IIII VII Ca2 PF3 Ca2 IIa HMWK PKK 明了化 血液凝固的机理 内源性激活途径 外源性激活途径 Testsofthrombusandhaemostasis 共同途径 四 正常抗凝系统 抗凝系统的作用抗凝系统包括 细胞抗凝系统体液抗凝系统 体液抗凝系统中的主要抗凝物质 抗凝血酶 AT 肝素 蛋白质C PC 体外的主要抗凝物质 降低血钙浓度而妨碍血液凝固 如 草酸盐柠檬酸盐 四 正常抗凝系统 细胞抗凝机制 单核 巨噬细胞肝细胞 吞噬清除 凝血过程有关物质和产物 体液抗凝作用 AT TFPI肝素 a a a a aK a aTF a肝素辅因子 APC PS激活纤溶 a TMPC 肝和内皮细胞合成 TFPI 组织因子途径抑制物AT 抗凝血酶 Pc PsTM 血栓调节蛋白 Ca2 二期止血缺陷特征 凝血机制和抗凝机制缺陷深部组织和关节 肌肉或内脏出血难止为主 创口延迟性出血难止 持续时间较长 压迫止血效果欠佳输血制品有效 但易复发 二期止血缺陷 常用筛选试验如下 活化的部分凝血活酶时间 APTT 凝血酶原时间 PT 纤维蛋白原含量测定 Fg 凝血酶时间 TT 五 纤维蛋白溶解系统的作用 纤维蛋白溶解概念 纤维蛋白或纤维蛋白原被纤维蛋白溶解酶 简称纤溶酶 水解的过程 简称纤溶 意义 使血液经常保持液态 血流通畅 防血栓形成 纤溶的基本过程包括 纤溶酶原的激活纤维蛋白的降解 见图所示 五 纤维蛋白溶解系统的作用 纤溶酶原激活物t PAu PA aK a 纤溶酶原纤溶酶PL纤溶酶抑制物 水解 X 纤维蛋白及纤维蛋白纤维蛋白原降解产物D D等 t PAu PA内皮细胞 肾小球 PLG 血小板聚集 最重要的生理性抗凝系统 纤溶活性亢进特征 皮肤大片状瘀斑或伴有内脏出血 创口以渗血为特征 难于止血 尤其损伤部位 血凝块易溶解 对抗纤溶药有效 多为获得性 由组织创伤或手术 挤压造成的 纤溶系统 观察纤溶活性变化 常用筛选试验有 优球蛋白溶解时间 ELT 纤维蛋白 原 降解产物测定 FDPs D 二聚体测定 DD 凝血因子纤溶系统血小板抗凝系统血管内皮细胞 止凝血障碍的实验室检查 检查目的 止凝血障碍疾病的诊断 抗凝治疗监测溶栓治疗效果判断术前检查 标本采集 病人准备 药物影响 抗凝药 抗血小板药 溶栓防栓药 如APC 避孕药 抗凝 抗凝剂 109mmol L枸橼酸钠1 9试管 真空抗凝管 塑料试管注意事项 采血顺利 混匀充分 立即送检 2h完成 血管壁检测 血管壁功能试验与应用 出血时间测定将皮肤毛细血管刺破后 血液自然流出到自然停止所需的时间称为出血时间 BT 主要反映血管壁和血小板相互作用高度怀疑血管因素异常时才做 参考值 BT测定器法6 9 2 1min 9min为延长 意义 BT延长 血小板明显 50 109 L 血小板功能异常 血小板无力症或药物影响 如阿斯匹林 潘生丁 血管壁异常 遗传性毛细血管扩张症 严重缺乏血浆某些凝血因子 血管性假性血友病 VWD DICBT缩短某些严重高凝状态或血栓性疾病 血小板检测 血小板计数血小板平均容积 MPV 和血小板分布宽度 PDW 测定 参考值 MPV为7 11fL PDW为15 17 临床意义 MPV增加 血小板破坏增加而骨髓代偿功能良好者 MPV增加是造血功能恢复的首要表现 MPV减低 骨髓造血功能不良 血小板生成减少 MPV随血小板数持续下降 是骨髓造血功能衰竭的指标之一 有半数白血病患者MPV减低 PDW增高 表明血小板大小悬殊 见于AML 巨幼贫 CML 脾切除 巨大血小板综合征 血栓性疾病等 PDW减低 表明血小板的均一性高 无临床意义 血小板形态与功能密切相关 通过血小板形态的检查 对疾病的诊断 鉴别诊断以及发病机制的探讨 都有十分重要的意义 正常血小板形态 血小板胞体为圆形 椭圆型或不规则形 直径2 3 m 血小板相关免疫球蛋白检测 1 原理 ELISA法 双抗体夹心 法 2 参考值 PAIgG 0一78 8ng 107血小板 PAIgM 0 7 0ng 107血小板 PAIgA 0 2 0ng 107血小板 临床意义1 PAIg增高 见于ITP 同种免疫性血小板减少性紫癜 多次输血 输血后紫癜 药物免疫性血小板减少性紫癜 恶性淋巴瘤 慢性活动性肝炎 系统性红斑狼疮 慢性淋巴细胞性白血病 多发性骨髓瘤 Evan综合征 良性单株丙球蛋白血症等 90 以上ITP患者的PAlgG增高 若同时测定PAlgM PAIgA和PAC3 则阳性率可高达100 2 观察病情 经治疗后 ITP患者的PAIgG水平下降 复发后 则又可升高 临床应用 主要凝血试验 凝血因子异常的实验诊断 活化凝血酶原时间凝血酶原时间纤维蛋白原测定凝血酶时间D D二聚体FDP 活化部份凝血活酶时间APTT 是反映内源性凝血途径中VIII IX XI XII因子水平的实验 APTT只反映因子水平 并不反映凝血因子是否活化 反映内源凝血的筛选实验 参考范围32 43秒 受检者较正常对照值延长10s以上才有意义 白陶土 接触因子激活剂 部分凝血活酶 脑磷脂 Ca2 凝固时间 血浆 APTT的临床意义 APTT延长 和 因子中某一项或几项因子水平缺乏 血友病甲 血友病乙 当凝血酶原 纤维蛋白原及因子V X缺乏时 但敏感性略差 如肝脏疾病 肝硬化DIC后期继发纤溶亢进时 血中抗凝物如凝血因子抑制物或肝素水平增高 肝素治疗的监护 一般在肝素治疗期间 APTT维持在正常对照的1 5 2 5倍适宜 均需测血小板计数 使其维持在正常范围内 若低于50 109 L需暂时停药 溶栓治疗时 ATPP与PT TT应将值控制在正常值的2倍 APTT缩短 见于血液呈高凝状态 DIC早期 血栓前状态 血栓性疾病 凝血酶原时间PT 反映外源性凝血途径中II V VII X因子水平的实验 反映外源凝血的筛选实验 参考范围平均值为 12 1 s 超过正常对照值3s为异常 凝固时间 血浆 组织凝血活酶 含TF Ca2 PT的临床意义 PT延长 先天凝血因子异常 如I II V VII X因子中某一项或几项因子水平缺乏 可用于外源凝血因子缺陷的筛查 后天凝血因子缺乏 如肝脏疾病 肝硬化 大多数凝血因子由肝脏合成 维生素K缺乏 可见于阻塞性黄疸 可用作肝脏蛋白质合成功能的检测手段 DIC后期 由于大量消耗和产生的FDP拮抗凝血酶的作用使PT延长 因此可用作DIC的检测 口服抗凝药 可密定 华法林 PT最敏感 肝素等 PT缩短 高凝状态 DIC早期 心梗 脑血栓形成 深静脉血栓形成 口服避孕药 PT时间缩短 但并不常见 1 凝血酶原时间比值 PTR PTR PT受检 PT对照参考值为0 85 1 152 国际标准化比值 INR WHO规定口服抗凝剂患者的报告方式 INR PTRISI 参考值为0 1 INR 采用INR监测和调整口服抗凝药物的剂量 使不同来源的临床资料具有可比性WHO规定不同情况下抗凝治疗时合适的INR范围1 术前2周或口服抗凝药INR1 5 3 2 25 2 原发 继发性静脉血栓的预防INR2 3 3 0 2 5 3 活动性静脉血栓 反复静脉血栓 肺栓塞预防INR2 0 4 0 3 0 4 动脉血栓预防INR 5 3 5 5 INR缩短 表示高凝状态 不适用INR的三种情况包括 INR不适用于测定口服抗凝药初期的病人血浆INR不适用于肝病凝血因子缺陷病人的血浆INR不适用于非抗凝治疗而PT延长的病人血浆 血浆纤维蛋白原测定Fg 参考值 2 4g L 意义 减少 1 先天性纤维蛋白原缺乏症 原发性Fg减少 原发纤溶2 DIC晚期 消耗过多 3 严重肝病增高 1 高凝状态 血栓性疾病 急性炎症 手术创伤 恶性肿瘤等 Fg是急性时相蛋白 2 生理性 部分正常老人 妊娠晚期 凝血酶时间TT反映共同途径是否存在抗凝或纤溶亢进 血浆 凝固时间 标准凝血酶 参考范围 16 18秒 以超过正常对照3秒以上为有病理意义 TT的临床意义 TT延长1 血浆纤维蛋白原水平低下 如低 无 纤维蛋白原血症 异常纤维蛋白原血症等 FIB减少时TT延长 2 循环中有抗凝血酶活性增高 如FDP存在 高肝素血症 抗凝血酶 活性增高等 3 肝硬化 肝肿瘤 DIC 异常抗凝物质增多 TT缩短较罕见 异常纤维蛋白血症 巨球蛋白血症可缩短 无特别临床意义用链激酶 尿激酶作溶栓治疗时 可用TT作为监护指标 以控制在正常值的2 5倍为宜 纤维蛋白降解产物 FDP 参考范围 5mg L意义 1 FDP增高 是体内纤溶亢进的标志 但不能鉴别原发性和继发性纤溶亢进 2 可作为血栓形成的观察指标 D 二聚体 参考范围 D 二聚体 300 g L 视为病理状态 表明体内存在着频繁的纤维蛋白降解过程 一般D 二聚体 500 g L时 就可以确定有血栓形成 D 二聚体水平增高 见于继发纤溶症 作为鉴别原发性与继发性纤溶症的重要指标 其水平升高多见于深静脉血栓 DVT 肺栓塞 PE 弥散性血管内凝血 DIC 陈旧性血栓时不增高 另外 妊娠时D 二聚体也有升高 但很高的D 二聚体水平则预示有并发症 如先兆子痫 溶栓治疗的监测 溶栓治疗的监测 提示溶栓治疗可能会发生出血的指标 纤维蛋白原在溶栓后数小时内即降至1 Og L以下 治疗3日时的血小板计数低于100 109 L APTT延长2 5倍 提示溶栓治疗有效的指标 当纤维蛋白原为1 2 1 5g L 凝血酶时间在正常的1 5 2 5倍 FDP在300 400mg L可视为溶栓剂有效 并在较安全的范围 有人提出凝血酶 抗凝血酶复合物 TAT 大于6ug L 提示血管持续性闭塞 其敏感度及特异性分别为96 2 和93 1 D 二聚体在溶栓药物治疗1h即可迅速增高 4h后更高 24h仍可高于用药前水平 血浆抗凝血酶活性测定AT 参考范围 108 5 5 3 临床意义 1 活性增高可导致出血 见于血友病 白血病 再障 急性肝炎及使用抗凝药 2 减低可导致血栓形成 见于先天性和获得性抗凝血酶缺乏症 获得性的见于血栓前状态 血栓疾病 DIC和肝脏疾病 一期止血缺陷筛选试验应用 一期止血缺陷是指血管壁和血小板缺陷所致出血性疾病筛选试验选用PLT和BT作为筛选试验 l BT和PLT都正常 2 BT延长 PLT减少 3 BT延长 PLT增多 4 BT延长 PLT正常 二期止血缺陷筛选试验应用 二期止血缺陷是指凝血因子缺乏所致的出血性疾病筛选试验选用APTT和PT作为筛选试验 l APTT和PT都正常 2 APTT延长 PT正常 3 APTT正常 PT延长 4 APTT和PT都延长 纤溶活性亢进性出血的筛选试验的应用 指纤维蛋白 原 和某些凝血因子被纤溶酶降解引起的出血 筛选试验可选用FDP和DD作为纤溶系统活性的筛选试验 l FDP和DD均正常 2 FDP阳性 DD阴性 3 FDP阴性 DD阳性 4 FDP和DD都阳性 血栓与止血检查的确诊试验 血管病变 vWF等 血小板检查 数量 粘附 聚集试验凝血因子测定 纠正试验 直接测某种凝血因子纤溶活性过度测定 原发性和继发性 弥散性血管内凝血 DIC 的实验室诊断1 PC减低或进行性减低 低于100 109 肝病和急性白血病低于50 109 2 血浆Fg含量减低 低于1 5 或进行性减低 肝病低于1 0 急性白血病低于1 8 3 血浆FDP超过200 肝病超过60 或 二聚体 水平较正常对照值增高4倍以上 4 较正常对照值延长或缩短3 以上 肝病超过5 延长10 以上或缩短5 以上 5 抗凝血酶活性 低于60 不适用于肝病 6 可溶性纤维蛋白单体复合物 增高 7 血浆因子 低于50 肝病必备 以上有3项或3项以上异常者 结合临床可作出DIC诊断 凝血异常疾病 一 分类1 血友病和血管性血友病2 先天性联锁 组合 因子缺陷FII V X组合最常见 FVII XI IX其次3 先天性单一因子缺陷除TF Ca2 外其他均可缺陷 最常见为FVII缺陷4 依赖VitK凝血因子缺乏症缺乏维生素K致FII VII IX X合成减少5 肝脏疾病的凝血障碍多种因子合成减少或消耗增多 二 血友病 hemophilia 早期理论 希伯克拉底 Hippocrates 希腊哲学家 医学之父凝血理论 血液离开体温环境后冷却而凝固早期犹太人记载早期关于血友病的记载宗教习俗中的包皮环切术常是血友病婴儿的致死原因阿布尔卡西斯 Albucasis 十一世纪阿拉伯医师描述了一个血友病家庭 其中的男性在轻微受伤后由于出血不止而死亡MosesMaimonides发现此病是由母亲传给儿子的 Hippocrates Albucasis Maimonides 早期的研究 Dr JohnConradOtto在他的论文 家族性出血性疾病 中对血友病提出了第一个现代理论Otto跟踪调查了一个家族 其中的男性成员出现遗传性出血倾向1828 血友病 一词首先出现在一名医科学生发表的论文中 血友病 一词来自拉丁语hemo 意为出血 和philia 意为倾向 组合含义即 出血倾向 英国王子Leopold 在英国女王Victoria的小儿子被发现患有血友病后 血友病方被公之于众March28 1884 Leopold31岁时死于颅内出血 Leopold姐姐的儿子Rupert是血友病患者 皇室疾病 血友病被看作是 皇室疾病 就象是20世纪侵袭欧洲皇室的鼠疫Alice和Beatrice Leopold的姐姐 携带血友病基因Alice公主有8个孩子 儿子Frederick是血友病患者 从窗口摔下后死亡 2个女儿Alix和Irene是携带者 Alix公主嫁给俄国沙皇Nicholas他们有4个孩子 他们唯一的儿子即王位继承人Alexis患血友病Alexis的病情给俄国皇室的未来造成极大的打击一名叫GrigoryRasputin的年轻的修道士能消除Alexis的疼痛症状 历史学家认为Rasputin之所以能做到这点 是因为用了催眠术 CzarNicholaswithAlexis GrigoryRasputin 原因 尽管已经很清楚地知道血友病属遗传性疾病 但其发病原因仍是个谜最初的研究认为 出血不止是由于患者的血管有缺陷20世纪 对该病的病因研究集中到血小板的功能上 突破 1937年 2名哈佛学生 A J Patek和F H L Taylor从健康人的血液中分离出一种物质 它能使血友病患者的血液正常的凝固据此 可推断出如果缺乏此物质会引起血友病此物质被称为 抗血友病球蛋白 现称为因子VIII到1960年 许多凝血因子都被发现了 BloodClottinginHemophiliacs Clottingfactorsworkinadominoformation cascadingoneaftertheotherIfonefactorismissingordoesnotwork clotswillnotformproperlyandbleedingwillcontinue ClottingFactors Hemophiliabloodisshowninyellow 1 概述1 定义是遗传性因子 基因缺陷 突变 缺失 插入等导致内源凝血途径激活凝血酶原酶的功能发生障碍所引起的出血性疾病 2 分类血友病甲 A 乙 B 3 流行病学WHO和世界血友病联盟 WFH 15 20 10万人口我国 2 73 10万人口血友病甲 乙为138 20 4 遗传方式血友病甲 乙为性染色体 X染色体 隐性遗传女性传递 男性发病 血友病 的遗传规律 第一代X YXX第二代XYX X XYXY第三代X YXYXXX X Y第四代X X XYX Y男性血友病女性血友病血友病传递者正常男性正常女性 2 临床表现 血液不凝的后果 可因出血不止而死亡内出血 关节出血 导致关节炎或关节畸形 肌肉出血 导致肿胀和疼痛 影响血管和神经的功能 颅内出血 血友病的常见死因 InternalBleedingintoJoints Hemophiliacshownatbottom 主要为出血倾向 特点是延迟 持续而缓慢的渗血 急性大出血少见迟发的深部软组织出血关节积血肌肉血肿中枢神经系统出血腹膜后出血和累及呼吸道的咽后出血血尿术后出血 血友病临床分型和出血症状 临床分型出血症状亚临床型大手术或重度外伤可有出血轻型手术或轻度外伤可致严重大出血 关节肌肉出血很少 无关节畸形中型小手术后可严重出血 偶有自发出血 关节畸形 但较轻重型肌肉或关节自发性出血 血肿 关节畸形 3 实验室检查 1 筛选试验1 SCT和ACT 均延长2 APTT 延长3 RT和试管法CT 可用于血友病的筛选 在重型 中型可延长 2 纠正试验1 STGT2 BTGT 3 确诊试验1 FVIII C和FVIII Ag2 FIX C和FIX Ag3 FXI C和FXI Ag 4 鉴别试验1 BT vWF Ag检测2 PT 5 排除试验1 复钙交叉试验2 APTT交叉试验 6 携带者和产前诊断1 血友病A直接诊断 变性梯度凝胶电泳 DGGE 单链构象多态性分析 SSCP 检测FVIII基因内含子22倒位间接诊断 限制性内切酶片段长度多态性分析 RFLP 进行检测等 2 血友病B直接诊断 FIX基因直接测序间接诊断 RFLP 产前诊断 绒毛膜绒毛活检组织样本取自胎盘附着子宫处组织样本应具有和胎儿一样的遗传学结构DNA分析判断胎儿性别及血友病的存在度 胎儿镜从脐带中提取胎儿血液样本 产前诊断适用于父亲是血友病患者 母亲是携带者时产前诊断的两种方法 4 诊断和鉴别诊断 1 诊断 无论是否存在临床出血 是否有明显家族史 一旦确定FVIII C或IX C低于正常人活性的50 而vWF无明显减少 即可诊断血友病 发病多在初学走路的幼儿和学龄儿童 轻微外伤或小手术后 出血不止 迁延数日 数月 甚至威胁生命 出血 皮肤大片瘀血或肌肉深部血肿 鼻衄 牙龈等粘膜出血等 关节病变 急性期以肿痛为主 2 鉴别诊断血管性血友病 vWD 获得性凝血因子病 5 治疗原则 尽量避免手术或外伤局部压迫或冷敷止血有新鲜血肿或关节积血时 应卧床休息 减少活动急性期可口服强的松每日40 60mg 分三次服用口服避孕药能缓解女性患者月经多尚无根治方法 出血严重或持续不止时 只有用凝血因子制剂进行替代治疗 一般要求达止血水平 即60 120 HistoryofTreatmentforHemophilia1950s凝血基础理论1960s冷沉淀物1970s冻干血浆浓缩物对病毒灭活作用有所认识1980s开展更先进的病毒灭活试验扩展了供体筛选试验进一步浓缩 纯化1990s非血浆重组DNA浓缩物更敏感的病毒标记筛选试验2000s基因治疗 Dr GrahamPool发现富因子VIII冷沉淀物 三 血管性血友病 vonWillebranddisease vWD 1 概述 1 定义 由于FVIII复合物中的血管性血友病因子 vonWillebrandfactor vWF 基因合成与表达缺陷导致vWF的质和量异常所引起的出血性疾病 BiochemicalFeaturesofvonWillebrandDisease 国际血栓与止血学会因子VIII和vWF专题委员会 1984 1986年 工作报告提出了国际统一的命名法 因子VIII和vWF的命名和简称 命名简称统一名称曾用名称因子VIII蛋白VIIIVIII C抗原VIII AgVIII Ag功能VIII C vWF蛋白vWFVIIIR vWF FVIII vWF抗原vWF AgvWFR Ag功能vWF RcoVIIIR RCOF vWF在血小板粘附 聚集中的作用 血小板粘附血小板血小板聚集GPIbGPIIb IIIaFVIII vWF 内皮细胞 内皮下胶原 vWF与血小板聚集 FACTORVIIIvs vWF 2 发病情况血友病甲 vWD 乙为138 100 20 3 临床表现主要为皮肤粘膜出血外伤后出血不止女性月经过多 分娩后大量出血I型 最常见II型 IIA IIB IIN IIMIII型 最严重 重型与血友病无区别 中型出血以皮下 肌肉出血为主 非自发 与外力有关 轻型仅为粘膜出血 亚临床型为应激 外科手术或产后 出血 血友病A与vWD的出血症状比较 2 实验室检查 1 筛选试验1 BT为诊断vWD的重要指标之一筛选I III型较好 均延长 II型 亚临床型则需再加作阿司匹林耐量试验 BleedingTimeTest Timerisstarteduponincision BT Timetocompletecessationoffreebloodflow 2 APTT和FVIII C检测70 患者可出