蔗糖酶米氏常数的测定PPT课件.ppt_第1页
蔗糖酶米氏常数的测定PPT课件.ppt_第2页
蔗糖酶米氏常数的测定PPT课件.ppt_第3页
蔗糖酶米氏常数的测定PPT课件.ppt_第4页
蔗糖酶米氏常数的测定PPT课件.ppt_第5页
已阅读5页，还剩5页未读， 继续免费阅读

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

目的 了解底物浓度与酶反应速度间的关系 学习求蔗糖酶米氏常数的方法 原理 米氏方程式v 米氏常数的求法很多 最常用的是Lineweaver Burk的作图法 双倒数作图法 米氏方程式可改写为下列倒数形式 选择不同的 s 测定相应的v 求出两者的倒数 以1 s 为横坐标 以1 v为纵坐标作图 绘出一条直线 外推至横轴相交 横轴截距即为 1 Km 蔗糖酶米氏常数的测定 1 2 3 还原糖与3 5 二硝基水杨酸 DNS 试剂反应 4 2020 2 5 5 仪器与试剂 1 仪器 分光光度计 恒温水浴 试管 吸管 秒表 坐标纸2 试剂标准葡萄糖溶液 1mg mL 3 蔗糖溶液 87 7mM 0 2mol LNaAc缓冲溶液 pH4 6 0 5mol LNaOH溶液3 5 二硝基水杨酸试剂 6 操作步骤 1 葡萄糖标准曲线的制定 将各管溶液混合均匀 在沸水浴中加热5min 取出后立即用冷水冷却至室温 以蒸馏水稀释至25mL 摇匀 测540nm处A值 以葡萄糖含量 mg 为横坐标 A值为纵坐标作出标准曲线 7 取试管8支编号 按下表将蔗糖溶液 醋酸缓冲液分别加入试管 于37 水浴中保温10min 一定量酶液同一水浴中保温约10min 于各管中依次按同样间隔 0 5min 加入已保温过的酶液1 0mL 计时 立即摇匀 在37 中准确温浴5min 按同样次序和时间间隔 加入1mL0 5mol LNaOH 摇匀 终止反应 吸取反应物1 0mL 加入盛有3 0mL3 5 二硝基水杨酸试剂和1 0mL水的试管中混匀 放入沸水浴中加热5min 冷却后稀释至25mL 摇匀 在540nm比色测定A值 以A值对应的葡萄糖量为相对反应速度 以1 S 为横坐标 1 v为纵坐标作图
人人文库> 全部分类> 教育资料 > 课件下载

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论