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组织学与胚胎学 主讲 赵培荣 第一章绪论 一 组织学与胚胎学的研究内容与意义1 组织学定义是用显微镜研究正常人体的微细结构及其与功能关系的科学 2 组织学研究内容细胞 组织 器官 系统3 胚胎学定义是研究出生前的个体发生和生长规律及其发育机制的科学 4 胚胎学研究内容受精 卵裂 胚泡 胚层 胎儿娩出 5 意义组织学是基础医学的一门重要基础学科 是临床医学的基础 胚胎学是优生优育的理论基础 对临床诊治起指导作用 二 组织学与胚胎学的研究方法 一 一般光学显微镜技术光镜分辨率0 2 m放大倍数几百倍至千倍 生物制片技术1 石蜡组织切片 2 冰冻切片 3 火棉胶切片 4 磨片 5 涂片 6 铺片 石蜡组织切片的过程 取材 固定 脱水 透明 浸蜡 包埋 切片 染色 封片 HE染色 苏木精 Hematoxylin 伊红 Eosin 染色 碱性染料 将嗜碱性物质 本身酸性 染成蓝色 酸性染料 将嗜酸性物质 本身碱性 染成红色 细胞核中的DNA RNA细胞质中的RNA 细胞质 膜性结构 线粒体 溶酶体 滑面内质网 光镜 HE图片 涂片 二 组织化学和细胞化学技术 原理 是通过化学反应或物理反应的原理显示组织细胞内某种化学成分 并可进行定位 定性 半定量研究 如 PAS反应 过碘酸 希夫反应 多糖 PA 氧化 醛 Schiff试剂 紫红色沉淀 PAS图片 三 免疫组织化学技术 原理 是应用抗原与抗体特异性结合的原理 检测组织细胞内多肽 蛋白质或受体等大分子物质的技术 直接法 用标记的抗体与细胞的相应抗原特异性结合 间接法 标记二抗 灵敏度高于直接法 1 PAP法 其原理是一抗同抗原相结合 二抗既能同一抗相结合 又能同PAP复合物相结合 后者由过氧化物酶和抗过氧化物酶抗体组成 最后以DAB显色 直接法和间接法图 PAP法 2 ABC法 是用一抗同抗原结合 生物素化的二抗再与一抗结合 最后用亲合素 生物素 过氧化物酶复合物处理 使复合物同生物素化的二抗结合 显色部位即表明抗原存在的部位 该法比PAP法敏感20 40倍 ABC法 四 电子显微镜技术 分辨率0 2nm 放大倍数几千倍至几百万倍 1 透射电子显微镜技术观察细胞内部的结构 2 扫描电子显微镜技术观察细胞表面的结构 电镜 电镜技术过程 电镜图片 2 扫描电镜观察组织C的表面立体结构 扫描电镜 五 冷冻蚀刻复型 是用透射电镜观察组织或细胞断裂面的金属复制膜 组织经甘油处理后快速冷冻 190 高真空下用钢刀将组织劈开 升温至 100 使组织升华 出现自然的凸凹面 先喷一层铂膜 再喷一层碳膜 以加固铂膜 用次氯酸等将组织腐蚀掉 清理复型 电镜观察 其凸凹结构影像恰与实物相反 此法可以观察细胞膜内部两层脂质分子的结构 冷冻蚀刻 六 细胞培养技术 将人或动物的活细胞在体外适宜的环境中 如温度 PH值 营养等 培养成活 可以进行细胞增殖 分化 代谢 吞噬及癌变机理等多方面的研究 获得体内实验难以达到的目的
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