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1 下列属于动物细胞培养与植物组织培养主要区别的是 a 培养基成分不同b 动物细胞培养不需要在无菌条件下进行c 动物细胞可以传代培养 而植物细胞不能d 动物细胞能够大量培养 而植物细胞只能培养成植株 解析 选a 植物组织培养和动物细胞培养都是细胞工程中的基础技术 二者主要的区别是培养基成分不同 植物组织培养时培养基中需要添加生长调节剂 而动物细胞培养时培养基中需要添加动物血清 2 在克隆多莉羊的过程中 没有运用到下列哪项技术 a 细胞培养技术b 细胞核移植技术c 胚胎移植技术d 基因工程技术 解析 选d 动物克隆繁殖过程需用到动物细胞培养技术 细胞核移植技术和胚胎移植技术 不涉及基因工程技术 3 用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织 其主要原因是这样的组织细胞 a 容易产生各种变异b 具有更强的全能性c 分裂增殖的能力强d 取材十分方便 解析 选c 幼龄动物的器官或组织细胞分裂增殖的能力强 便于细胞培养 4 下列为有关动物细胞培养的叙述 其中错误的是 a 是动物细胞工程的基础技术b 将所取的组织先用胰蛋白酶等进行处理使其分散成单个细胞c 在培养瓶中要定期用胰蛋白酶处理 使细胞从瓶壁上脱离 制成悬浮液d 动物细胞培养都只能传50代左右 所培养的细胞就会衰老死亡 解析 选d 在动物克隆和单克隆抗体制备等过程中 都要用到动物细胞培养技术 故其为基础技术 将胚胎或幼龄动物的器官或组织用胰蛋白酶等进行处理使其分散成单个细胞 制成细胞悬浮液 培养过程中出现细胞贴壁生长时要用胰蛋白酶处理 使细胞从瓶壁上脱离 进行传代培养 培养到50代左右时 大部分细胞死亡 少数细胞能无限增殖 5 如图是动物细胞培养的过程示意图 请据图完成下列问题 1 容器a中的动物器官或组织首先要进行的处理是 然后用 酶处理 使细胞分散开来 这样做的目的是 2 培养首先在b瓶中进行 瓶中的培养基成分有 等 此时的培养称为 这一时期的细胞具有恒定的 同功酶类型和生化特性等 3 在c瓶中正常培养了一段时间后 发现细胞全部死亡 原因是 解析 1 在进行培养时应尽量使细胞分散开 便于与培养液充分接触进行物质交换 使其分散需要用胰蛋白酶处理 2 动物细胞培养过程中尽量使培养基成分与体内环境基本相同 所以需要添加糖 氨基酸 生长因子 无机盐 动物血清等 此时的培养称为原代培养 细胞形成细胞株 一般具有恒定的染色体组型 同功酶类型 病毒敏感性和生化特性等 3 在c瓶中的培养属于传代培养 在传代培养过程中 到10 50代有些细胞死亡 有些细胞可能发生遗传物质的改变 还能继续增殖 如果无此现象则说明细胞遗传物质没有改变 细胞没有发生癌变 答案 1 剪碎胰蛋白使细胞与培养液充分接触 2 糖 氨基酸 生长因子 无机盐和动物血清原代培养染色体组型病毒敏感性 3 细胞没有发生癌变 一 动物细胞的培养及与组织培养的比较1 培养过程 1 选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织作为动物细胞培养材料的原因 这些组织或器官中的细胞生命力旺盛 分裂能力强 2 培养前要将组织细胞分散成单个细胞的原因 成块组织不利于培养 其中的细胞不能与培养液充分接触 而且动物细胞具有接触抑制的特性 分散了制成细胞悬浮液利于培养 3 比较原代培养与传代培养原代 2 动物细胞培养的条件 1 无菌无毒的环境 2 营养 水 无机盐 葡萄糖 氨基酸 核苷酸 动物血清等 3 适宜的温度和ph 4 气体环境 3 植物组织培养和动物细胞培养的比较 1 动物细胞培养一般不能最终形成新的动物个体 而只能获得更多的动物细胞 2 原代培养的细胞因代谢消耗和接触抑制现象 培养到一定时期必须进行传代培养 3 细胞培养的co2环境可以调节培养液的ph 例证1 2010 浙江高考 下列关于动物细胞培养的叙述 正确的是a 培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞b 克隆培养法培养过程中多数细胞的基因型会发生改变c 二倍体细胞的传代培养次数通常是无限的d 恶性细胞系的细胞可进行传代培养 解题关键 动物细胞培养过程中会出现接触抑制现象 克隆培养法培养细胞时细胞进行有丝分裂 精讲精析 选d 由于细胞之间相互接触而发生接触性抑制 细胞在培养瓶壁上只能形成单层的细胞 克隆培养法中细胞都是由一个细胞经过有丝分裂而得到的 所以细胞的基因型相同 多数不会发生改变 二倍体细胞传代培养至10代多数会死亡 只有少数的细胞能够培养至50代以后成为细胞系 恶性细胞系的细胞具有癌变的特点 能够无限增殖 可以进行传代培养 互动探究 d选项中的细胞系遗传物质是否已经改变 细胞系的特点是什么 已经改变 可连续传代 二 细胞核移植与克隆过程1 克隆羊培育过程 1 克隆原理 动物细胞核具有全能性 2 克隆技术 核移植和胚胎移植 3 克隆繁殖 无性繁殖 2 体细胞核移植技术的应用前景遗传疾病的治疗 优良品种的培育 物种的优化 濒危动物的保存 转基因动物的扩群等 例证2 因羊奶的营养价值比牛奶高许多 所以可设想让牛产羊奶 科学家对此做了相关的构想 过程如图所示 请据图完成有关问题 1 图中涉及的现代生物技术有 至少写三种 2 小牛a 小牛b 小牛c的性状表现 填 相同 或 不同 你的理由是 小牛a与牛n呢 理由是 3 若研究发现牛n细胞中线粒体发达 故而它的产奶率高 则小牛a会有这一优良性状吗 你的依据是 4 有人设想将羊体细胞与牛体细胞进行融合 以获得新物种 羊 牛 你认为依据目前的生物技术能否实现这一构想 你的理由是 解题关键 解答本题要重点关注以下几点 动物细胞核移植的基本过程 重组细胞的遗传物质来源于供体细胞的细胞核和受体细胞的细胞质 克隆动物的遗传性状受细胞核和细胞质遗传物质的共同控制 精讲精析 1 由题图可知 让羊乳蛋白基因在牛n体内表达获得产羊奶的牛n 需要利用基因工程技术将目的基因 羊乳蛋白基因 导入牛m的受精卵使之表达 目的基因的导入需要在体外条件下完成 经动物细胞培养成胚胎后需植入体内发育成 产羊奶的牛n 2 题干中由早期胚胎到牛1 牛2 牛3的过程属于胚胎的分割移植技术 表现出的性状应该相同 因为这些个体都是由一个细胞 重组细胞 发育而来的 题干图示中经c d两过程获得重组细胞的过程属于核移植技术 3 由重组细胞培养 分割 获得小牛a 其核遗传物质来自于牛n 质遗传物质来自于牛o 由于生物性状中既有核遗传物质控制的性状 又有质遗传物质控制的性状 所以小牛a与牛n性状表现不完全相同 牛n因线粒体发达导致产奶率高这一性状也不会在小牛a个体中得以表现 答案 1 基因工程 核移植 胚胎移植 胚胎分割 动物细胞培养 2 相同这些个体都是由同一个重组细胞发育形成的不完全相同小牛a细胞质中的遗传物质来自牛o 3 不会线粒体中的基因一般通过细胞质传递给后代 小牛a的细胞质主要来自于牛o 4 不能因为高度分化的动物体细胞的全能性受到限制 由羊体细胞和牛体细胞融合得到的杂交细胞不能正常发育成完整个体 具有开放性 其他合理答案也可 规律方法 动物的克隆繁殖需要动物克隆技术和胚胎工程多项技术支持 克隆动物的性状表现由早期胚胎的形成决定 若早期胚胎是经核移植技术形成的重组细胞发育来的 那么克隆动物性状与供体性状相似 1 2011 天台模拟 下列有关动物细胞克隆培养法的叙述中 错误的是 a 细胞克隆培养的最基本要求是建成的细胞克隆系来源于单个细胞b 提高动物细胞克隆成功率需要以滋养细胞支持生长及激素刺激等条件c 原代培养细胞 有限细胞系比无限细胞系 肿瘤细胞更容易克隆d 经克隆培养形成的细胞系称为纯系 解析 选c 理论上各种培养细胞都可以被克隆 但原代培养细胞 有限细胞系克隆时有实际困难 无限细胞系 肿瘤细胞反而更容易克隆 2 2011 台州模拟 下列关于动物细胞培养的叙述 正确的是 a 动物细胞培养的目的是获得大量的分泌蛋白b 通过动物细胞培养获得细胞株或细胞系 证明了动物细胞也具有全能性c 动物细胞培养一般不需要脱分化过程d 胚胎干细胞培养时 加饲养层细胞是为了促进干细胞分化 解析 选c 动物细胞培养的目的是产生大量细胞 不是为了获得大量分泌蛋白 通过动物细胞培养获得细胞株或细胞系只能证明细胞的分裂 不能证明细胞的全能性 胚胎干细胞培养时 加饲养层细胞是为了促进细胞生长而不分化 动物细胞培养一般不需要脱分化过程 3 2009 江苏高考 动物器官的体外培养技术对于研究器官的生理 病理过程及其机制意义重大 如图是一个新生小鼠的肝脏小块培养装置示意图 请回答下列问题 1 肝脏切成小薄片 这有利于肝脏细胞 2 气室中充入5 co2气体的主要作用是 3 培养液中添加抗生素是为了抑制细菌生长 但要注意选择抗生素的 以保证抗生素对肝脏无害 4 有机物x有毒性 可诱发染色体断裂 利用上图所示装置和提供的下列材料用具 探究肝脏小块对有机物x是否具有解毒作用 材料用具 肝脏小块 外周血淋巴细胞 淋巴细胞培养液 植物凝集素 刺激淋巴细胞分裂 显微镜 载玻片 盖玻片 玻璃皿 滴管 吉姆萨染液 使染色体着色 有机物x溶液等 实验过程 在淋巴细胞培养液中加入植物凝集素培养淋巴细胞 取4等份 备用 利用甲 乙 丙 丁4组上图所示装置 按下表步骤操作 表示已完成的步骤 上表中还需进行的操作是 培养一段时间后 取4组装置中的等量培养液 分别添加到4份备用的淋巴细胞培养液中继续培养 一段时间后取淋巴细胞分别染色 制片 在显微镜下观察 并对比分析 若丙组淋巴细胞出现异常 而甲组的淋巴细胞正常 则说明 解析 本题考查动物细胞培养的相关知识 1 把肝脏切成小薄片 有利于肝脏细胞的呼吸代谢 即吸收氧气和营养物质 排出代谢废物 2 气室中充入5 co2的作用是形成碳酸来维持培养液适宜的ph 3 同时也要注意选择抗生素的种类和剂量来抑制细菌生长 4 乙组和丁组没有做处理 向乙 或丁 组装置中放置肝脏小块作为对照实验 有机物x有毒性 可诱发染色体断裂 所以要观察淋巴细胞的染色体形态和数量是否变化 甲组添加肝脏小块 淋巴细胞染色体正常 丙组没有添加 出现染色体异常 说明肝脏小块对有机物x具有解毒作用 答案 1 吸收氧气和营养物质 排出代谢废物 2 维持培养液适宜的ph 3 种类和剂量 4 向乙 或丁 组装置中放置肝脏小块 染色体形态和数量肝脏小块对有机物x具有解毒作用 一 选择题 共12小题 每小题4分 共48分 1 动物细胞培养过程的顺序是 原代培养 传代培养 用胰蛋白酶处理组织 形成分散的悬浮液a b c d 解析 选d 动物细胞培养时先用胰蛋白酶处理组织 形成分散的悬浮液 原代培养后进行细胞的传代培养得到细胞株或细胞系 2 动物细胞培养技术是动物细胞工程的基础 是因为 a 所有动物细胞工程技术都离不开动物细胞培养过程b 动物细胞工程主要是培养新个体c 动物细胞工程的目的是培养单个细胞d 动物细胞工程和植物细胞工程的目的相同 解析 选a 所有动物细胞工程技术都离不开动物细胞培养过程 动物细胞培养技术是动物细胞工程的基础 动物细胞工程和植物细胞工程的目的不相同 3 利用下列细胞工程技术培养出的新个体中 只具有一个亲本遗传性状的是 细胞和组织培养 细胞融合 动物胚胎移植 克隆技术a b c d 解析 选c 细胞和组织培养属无性繁殖 细胞融合技术培养出的个体含有两个亲本的遗传性状 动物胚胎移植过程中的胚胎是受精作用形成的 也含有两个亲本的遗传性状 克隆技术得到的个体具有供核个体与接受细胞核个体两个亲本的遗传性状 是无性繁殖的产物 4 下列关于克隆技术的叙述中 不正确的是 a 具有广阔的应用前景b 克隆实际上是一种无性繁殖方式c 可能会给人类带来许多负面的影响d 动物体细胞克隆实验的成功率较高 解析 选d 动物体细胞克隆实验的成功率较低 克隆技术实际上是一种无性繁殖方式 具有广阔的应用前景 但可能会给人类带来许多负面的影响 5 2011 嘉兴模拟 动物细胞培养与植物组织培养技术列表比较如下 你认为哪一项目的比较有错误 a 培养基的区别b 原理c 结果d 培养目的 解析 选b 表中所列各项中动物细胞培养和植物组织培养的原理不同 前者是利用细胞的增殖 后者是利用细胞的全能性 6 2011 杭州模拟 下列有关克隆的叙述 错误的是 a 转基因植物的培育利用了细胞的全能性b 动物组织培养过程中不会发生组织分化c 多莉 绵羊的性状与供核绵羊不完全相同d 肝细胞难以克隆成个体是因为存在阻止核基因表达的调节蛋白 解析 选b 动物细胞培养过程可以伴随着组织分化 多莉 绵羊的性状与供核绵羊不完全相同 与受体绵羊也有相似之处 肝细胞难以克隆成个体是因为存在阻止核基因表达的调节蛋白 方法技巧 核移植技术获得的动物与供核动物性状不完全相同的原因分析 1 克隆动物的绝大部分dna来自供体细胞核 但细胞质中线粒体的dna来自受体卵细胞 2 性状是基因与环境共同作用的结果 3 个体发育中可能发生基因突变 产生新的性状 4 克隆动物的基因型与性别取决于供核动物 7 如图是某克隆羊的培育过程模式图 则与获得该克隆羊接近的生殖方式和其发育成熟时所分泌的主要性激素依次是 a 无性繁殖 雌性激素b 无性繁殖 雄性激素c 有性繁殖 雄性激素d 有性繁殖 雌性激素 解析 选b 克隆是无性繁殖 图中供核羊是雄性 克隆羊也为雄性 在发育成熟时分泌的主要性激素是雄性激素 8 将甲绵羊体细胞的细胞核移入乙绵羊的去核卵细胞中 再将此卵细胞植入丙绵羊的子宫内发育 出生的小绵羊即 克隆绵羊 此 克隆绵羊 a 基因型与甲相同 性别一定与甲不同b 基因型与乙相同 性别一定与乙相同c 基因型与丙相同 性别一定与丙不同d 基因型与甲相同 性别一定与甲相同 解析 选d 克隆绵羊基因型与供核绵羊相同 性别也与供核绵羊相同 与接受核的一方无关 9 下列关于细胞工程的叙述中 正确的是 a 细胞核移植和细胞融合技术中 都改变了细胞中的染色体数b 通过组织培养可以迅速获得大量脱毒植物幼苗c 经细胞核移植培育出的新个体具有两个亲本的遗传性状d 克隆动物的性状与提供细胞核的个体性状完全相同 解析 选b 细胞核移植技术没有改变细胞的染色体数目 细胞融合技术改变了染色体数目 细胞核移植培育出的新个体的过程属无性繁殖 不具有两个亲本的性状 克隆动物的性状与提供细胞核的个体性状不完全相同 10 2011 嘉兴模拟 下列有关动物细胞工程的叙述中 不正确的是 a 动物细胞培养过程中 用胰蛋白酶处理可使动物细胞分散开来b 动物细胞工程是在细胞水平上的操作 基因工程是在分子水平上的操作c 取烧伤病人的健康皮肤细胞进行培养获得大量皮肤细胞 体现了动物细胞的全能性d 动物克隆常用的技术手段中 最基础的是动物细胞培养 解析 选c 烧伤病人进行皮肤移植时 取自身健康皮肤经过培养得到大量皮肤细胞 运用的是动物细胞培养 该过程没有体现动物细胞的全能性 动物细胞培养是动物细胞工程中的基础技术 11 一只羊的卵细胞核被另一只羊的体细胞核置换后 这个卵细胞经过多次分裂 再植入第三只羊的子宫内发育 结果产下一只羊羔 这种克隆技术具有多种用途 但是不能 a 有选择地繁殖某一性别的家畜b 繁殖家畜中的优秀个体c 用于保存物种d 改变动物的基因型 解析 选d 克隆技术可以有选择地繁殖某一性别的家畜 繁殖家畜中的优秀个体或用于保存物种 但不能改变动物的基因型 12 如图为某哺乳动物生殖过程示意图 b为卵细胞 下列相关叙述中 不正确的是 a 动物个体 的产生分别属于有性生殖和无性生殖b 动物个体 的产生方式表明 高度分化的动物细胞的细胞核也具有发育为完整个体的潜在能力c 按照动物个体 的产生方式 后代的性别比仍为1 1d 产生图中a b c三种细胞的方式 仅c为有丝分裂 解析 选c 图示中动物个体 为有性生殖产生的 后代性别比为1 1 而动物个体 为核移植产生的克隆动物 其性别与供体的性别一致 二 非选择题 共2小题 共52分 13 25分 回答下列有关动物细胞培养的问题 1 在动物细胞培养的过程中 当贴壁细胞分裂生长到细胞表面 时 细胞会停止分裂增殖 这种现象称为细胞的 此时 瓶壁上形成的细胞层数是 要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来 需要用酶处理 可用的酶是 2 随着细胞传代次数的增多 绝大部分细胞分裂停止 进而出现 的现象 但极少数细胞可以连续增殖 其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成 细胞 该种细胞的黏着性 细胞膜表面蛋白质 糖蛋白 的量 3 现用某种大分子染料 对细胞进行染色时 观察到死细胞被染色 而活细胞不被染色 原因是 4 检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目 最好选用细胞分裂到 期的细胞用显微镜进行观察 5 在细胞培养过程中 通常在 条件下保存细胞 因为在这种条件下 细胞中 的活性降低 细胞的 速率降低 6 给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后 发生了排斥现象 这是因为机体把移植的皮肤组织当做 进行攻击 解析 本题考查动物细胞培养的相关知识 1 在培养过程中会出现接触抑制现象 而使细胞形成单层 2 随传代培养的进行 有大部分细胞会衰老死亡 少数细胞遗传特性发生改变而无限增殖 变成癌细胞 答案 1 相互接触接触抑制单层 或一层 胰蛋白酶 2 衰老甚至死亡不死性降低减少 3 由于活细胞的膜具有选择透性 大分子染料不能进入活细胞内 故活细胞不能着色 或由于死细胞的膜丧失了选择透性 大分子染料能够进入死细胞内而着色 4 中 5 冷冻 或超低温 液氮 酶新陈代谢 6 抗原 14 27分 探究创新题 现有甲 乙两种可能有一定毒性的化学物质 实验室研究人员欲通过动物细胞培养的方法来鉴定它们是否有毒性并比较二者毒性的强弱 请你以一个研究人员的身份参与此项研究 完成下列实验报告并回答有关问题 实验原理 根据这种变异细胞占全部培养细胞的百分数 以下称q值 可判断该化学物质的毒性 实验材料 活的小白鼠胚胎 药品用具 胰蛋白酶液 动物细胞培养液 动物细胞固定液 适宜浓度的龙胆紫溶液
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