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文档简介

实验五果蝇唾腺染色体的观察 1 1 学习果蝇幼虫唾腺的剖取方法和唾腺染色体的制片方法 2 观察果蝇唾腺染色体的形态特征 一 实验目的 2 双翅目昆虫 果蝇等 幼虫期唾腺细胞中具有相当于普通染色体100 150倍的巨大染色体 由于存在于唾液腺细胞中 所以称为唾腺染色体 salivaryglandchromosome 它是由于唾腺细胞发育到一定阶段后就不再进行有丝分裂 永久停留在间期 唾腺染色体经过多次复制而不分开 约有1000 4000根染色体丝的拷贝 所以又叫多线染色体 polytenechromosomes 二 实验原理 3 黑腹果蝇巨大的唾腺染色体是从染色中心向四周放射状地伸出5长1短共6条臂 果蝇染色体数为2n 8 其中1号染色体 X染色体 为端着丝粒染色体 其着丝粒附着地一端在染色中心上 另一端游离 2号 3号染色体为中部着丝粒染色体 每条呈 V 伸展两臂 4号染色体很短小 呈点状附在染色中心边缘 4 特征巨大 体细胞配对 染色体只有半数 n 各染色体的异染色质多的着丝粒部分互相靠拢形成染色中心 深浅不同 疏密个别的横纹 5 染色质丝的不同部位螺旋化程度不同 其中螺旋化程度较高的部位形成染色粒 这些染色粒经多线染色体的 放大 形成染色较深的横纹 横纹的相对大小和空间排列是恒定的 可以作为天然的精确基因定位的 坐标 这些横纹的数目和位置一般是恒定的 具有果蝇种的特征 染色体的缺失 重复 倒位 易位等 都能在唾腺染色体上辨别出来 bandedchromosomes1000 x 6 材料 果蝇的三龄幼虫试剂 1 醋酸洋红器具 显微镜 镊子 解剖针 载玻片 盖玻片 滤纸 绘图纸 三 仪器与材料 7 1 取果蝇三龄幼虫置于载玻片上 由于果蝇的唾腺位于幼虫体前1 3 1 4处 所以左手持镊子按压住虫体后端三分之一的部位 固定幼虫 右手持解剖针扎住幼虫头部口器部位 适当用力向右拉唾腺腺体随之而出 四 实验程序 8 9 果蝇三龄幼虫解剖图 Salivarygland 唾腺Gonad 性腺Ganglion 神经节Trachea 气管Ovary 卵巢Intestine 肠 10 挑取果蝇唾腺的过程 11 唾腺的位置及形态特征 12 13 2 滴加一滴醋酸洋红 在显微镜下 4倍镜 去除唾腺周围的脂肪等其他组织部分 唾腺是一对透明的棒状腺体 外有白色的脂肪组织 不透明 去除幼虫其它组织部分 并把唾腺周围的白色脂肪剥离干净 14 2020 2 6 15 分离出来的果蝇唾腺 位置 在幼虫体前约1 3处 形状 形如一对香蕉 上小上大 一边常附着带状的不透明的脂肪 颜色 半透明如玻璃 略带白色 比周围组织透明 细胞特征 唾腺上的细胞较大 轮廓清晰 用低倍镜即可清楚看到 16 唾腺组织 17 不同人操作得到的唾腺组织可能不一样 18 放大的唾腺组织 19 放大的唾腺组织 20 放大的唾腺组织 21 3 盖上盖玻片 用刀片支起盖玻片一角 按住盖玻片另一边 用解剖针轻轻敲打盖玻片 去掉刀片 稍加热后覆上滤纸垂直压片 4 观察 先在10倍镜下观察找到染色体后 再换高倍镜下观察 比较各染色体的横向纹带 带宽大小 带纹排列顺序 以及由着丝点纠集组成的染色体中心 22 10倍镜 23 40倍镜 24 100倍镜 25 重要实验步骤 取果蝇三龄幼虫 一手持镊子夹住虫体中部稍后 固定幼虫 另一手持解剖针按住幼虫头部 轻缓拉开头部 去除幼虫的其他组织部分和唾腺周围的脂肪等其他组织 再用常规染色体制片方法制片 26 实验注意事项 1 取果蝇三龄幼虫最佳 其行动迟缓 肥大 爬上管壁 将要化蛹 2 要辨别清楚哪些是唾腺细胞 3

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