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血清丙氨酸氨基转移酶活力的测定 改良赖氏法 主讲人 杨宇光小组成员 刘婷婷刘杰陈琪杨宇光 实验目的 了解血清丙氨酸氨基转移酶活力单位的定义掌握血清丙氨酸氨基转移酶活力单位的测定方法和临床意义 实验原理 丙酮酸 2 4 二硝基苯腙在碱性环境中呈现红棕色 颜色的深浅与丙酮酸含量成正比 与标准丙酮酸的显色进行比较 即可测定丙酮酸的含量 酮戊二酸也能与2 4 二硝基苯腙结合成相应的苯腙 在碱性条件下显色 两种苯腙的吸收光谱有差异 在520nm比色时 丙酮酸 2 4 二硝基苯腙的吸光度值远较 酮戊二酸苯腙高 反应30min后 酮戊二酸量减少而丙酮酸量增高 在一定范围内 520nm处吸光度增加的程度与反应体系中丙酮酸与 酮戊二酸的物质的量之比呈线性关系 实验操作 1 标准曲线的绘制 取试管5支 按表操作 实验操作 将上述各管混匀 室温放置10min后以蒸馏水调零 用520nm波长比色 读取各管吸光度 然后以各管吸光度减去0号管的吸光度之差 An Ao 为纵坐标 各管相应的转氨酶活力单位为横坐标 绘制标准曲线取试管2只 标明测定管和对照管 将测定前将底物液在37 水浴中预温5min 再按下表操作 血清丙氨酸氨基转移酶活力的测定 混匀 室温放置10min后 以蒸馏水调零 在520nm波长处比色 读取吸光度 用T管得吸光度减去C的吸光度 查标准曲线 即得到待测血清中所含ALT的酶活力 临床意义 ALT广泛存在于机体的各种组织中 但肝细胞中含量最多 当肝
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