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电喷雾质谱ESI MS 姚鋆2020年1月31日yaojun123 标准蛋白质组学流程 电喷雾是一种离子化方法 可以用作质谱仪的离子源质谱仪擅长测定生物大分子分子量多肽序列翻译后修饰 历史 1914年第一次详细地描述Zeleny1964 1969年深入地研究TaylorDole1989年用于生物大分子2002年诺贝尔化学奖 1 4 Fenn1996年纳升级电喷雾 nanoESI Mann 喷雾 参数 电压 溶液组成 相对位置 谱图 Myoglobin多电荷使得样品谱图复杂 质荷比mass to chargeratio 原理 电喷雾的原理有两种主流解释库仑爆炸离子蒸发核心是去溶剂 nanoESI 流速小于500nl min使用拉尖的石英或不锈钢毛细管末端小于30mm电压小于2500V没有辅助气或者极低的辅助气常与nanoHPLC或者毛细管电泳 CE 联用 nanoHPLC 电喷雾产生的质谱信号强度与被测物质的浓度相关 nano HPLC与质谱仪联用 使用电喷雾的ORBITRAP质谱仪 ORBITRAP质谱仪能精确地测定质荷比CID PQD ETD HCD都能够将多肽碎裂成碎片离子速度与精度的平衡 CID PQD ETD LTQdetector ORBITRAPdetector HCD ORBITRAP检测器 精确测定质荷比ppm级 LTQ检测器 较精确地测定质荷比擅长多肽的碎裂 nano HPLC联用质谱仪测定多肽 HPLC用反相模式C8 C12 C18 ODS 0 1 TFA 0 1 FA 0 5 Hac蛋白质组学大量使用胰酶trypsinN term K R分子量400 6000 串级质谱 时间串联离子阱空间串联三重四极杆 ORBITRAP 从本质上来说是时间串联将生成第一张谱图的任务交给ORBITRAP检测器 多肽的碎裂 a x b y c z 某四肽的碎裂 多肽碎裂的谱图 这是一张用LTQ检测器采集的CID碎裂谱图 谱图的解析 结合第一张谱图 主要信号峰都得到归属 翻译后修饰 第一张谱图DMass第二张谱图 42 42 42 42 42 42 42 42 42 42 Moretogo butnottoday 质谱仪可以定量地测定蛋白质质谱仪的硬件构
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