实验七 维生素C的定量测定-2,6-二氯酚靛酚法.ppt

实验七维生素C的定量测定 2 6 二氯酚靛酚法 一 实验目的二 实验原理三 器材仪器和主要试剂四 实验操作五 思考题 一 实验目的 从食品原料等提取维生素C 脱色2 6 二氯酚靛酚钠 蓝色 滴定 计算 二 实验原理 染料2 6 二氯靛酚的颜色反应表现两种特性 一氧化还原状态 氧化态为深蓝色 还原态变为无色 二介质的酸度影响 在碱性溶液中呈深蓝色 在酸性介质中呈浅红色 用蓝色的碱性染料标准溶液 对含维生素C的酸性浸出液进行氧化还原滴定 染料被还原为无色 当到达滴定终点时 多余的染料在酸性介质中则表现为浅红色 由染料用量计算样品中还原型抗坏血酸的含量 当抗坏血酸全部被氧化后 稍多加一些染料 使滴定液呈淡红色 即为终点 VC还原型 脱氢VC氧化型 2 6 二氯酚靛酚氧化型 酸性溶液中 呈玫瑰色 2 6 二氯酚靛酚还原型 无色 三 器材仪器和主要试剂 偏磷酸 2 溶液 W V 盐酸 2 溶液 W V 抗坏血酸标准溶液 0 2mg ml 称取50mg 准确至0 1mg 抗坏血酸 溶于浸提剂中并稀至250ml 现配现用 2 6 二氯靛酚 2 6 二氯靛酚吲哚酚钠盐 溶液 称取碳酸氢钠52mg溶解在200ml热蒸馏水中 然后称取2 6 二氯靛酚50mg溶解在上述碳酸氢钠溶液中 冷却定容至250ml 过滤至棕色瓶内 保存在冰箱中 每次使用前 用标准抗坏血酸标定其滴定度 标定 吸取1ml抗坏血酸标准溶液于50ml锥形瓶中 加入10ml浸提剂 摇匀 用2 6 二氯靛酚溶液滴定至溶液呈粉红色15s不褪色为止 同时 另取10ml浸提剂做空白试验 滴定度 mg ml cv V1 V2s 每毫升2 6 二氯靛酚溶液相当于抗坏血酸的毫克数 C 抗坏血酸的浓度 mg ml V 吸取抗坏血酸的体积 ml V1 滴定抗坏血酸溶液所用2 6 二氯靛酚溶液的体积 ml V2 滴定空白所用2 6 二氯靛酚溶液的体积 ml 白陶土 或称高岭土 对维生素C无吸附性 本实验结果为 0 088mg ml 四 实验操作 1 提取 桔子肉10克 猕猴桃或枣5克 于研钵 加2 HCl约10ml 充分研磨 提取液通过两层纱布滤入50ml容量瓶 2 HCl定容到50ml 2 脱色 液干燥锥形瓶 加白陶土一匙 用于吸附生物样品中的色素 充分振摇 约10分钟 过滤 脱色滤液 3 滴定 1 样品滴定 取三角烧瓶两只 各加脱色滤液10ml 用2 6 二氯酚靛酚钠 蓝色 滴定至出现微红色并保持5秒钟不褪色为止 记下二份样品滴定所用的染液毫升数 滴定过程宜迅速 不超过2分钟 取其平均值 VA 2 空白滴定用10ml2 HCl代替脱色滤液 2 6 二氯酚靛酚钠 蓝色 滴定至出现微红色并保持5秒钟不褪色为止 记下滴定所用的染液毫升数 VB 计算 维生素 mg 100g 样品 VA VB S V 100 W D式中 VA 滴定样品用去2 6 二氯酚靛酚钠的平均ml数VB 滴定空白用去2 6 二氯酚靛酚钠的ml数S 每毫升2 6 二氯酚靛酚钠溶液相当于维生素 的mg数V 样品提取液总毫升 定容后的ml数 50或100ml D 滴定时所取的样品